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[发明专利]一种NK细胞培养基及NK细胞的培养方法-CN201510401730.7有效
发明人：葛啸虎;陈海佳;王一飞;曾维杰;王小燕 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2015-07-09 - 公布日： 2018-04-03 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明提供了一种NK细胞培养基及NK细胞的培养方法，该NK细胞培养基以重量份数计，包括以下组分无血清基础培养基83～93重量份；血浆4～6重量份；白细胞介素‑2 0.5～1.5重量份；抗CD3单克隆抗体本发明提供的NK细胞培养基安全性较好，在上述组分的培养基下培养的NK细胞快速稳定增殖，且对肿瘤细胞具有较好的杀伤活力。实验结果表明本发明提供的NK细胞培养基培养NK细胞两周后，增殖倍数将近翻了50倍；对K562的杀伤活性在401的效靶比时达到了91％。
一种 nk 细胞培养基培养方法

[发明专利]一种利用滋养细胞高效扩增NK细胞的制备方法-CN201910979773.1有效
发明人：郭红;陈佃雷;汤文玲;刘蕾 -专利权人：山东德升生物工程有限公司
申请日： 2019-10-11 - 公布日： 2021-03-19 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程和细胞生物学领域，具体涉及一种利用滋养细胞高效扩增NK细胞的制备方法，包括1)pHR‑mbIL‑21、pHR‑4‑1BBL和pHR‑MICA质粒载体构建，2)分别用pHR‑mbIL‑21、pHR‑4‑1BBL和pHR‑MICA质粒载体制备重组慢病毒，3)K562‑mbIL‑21‑4‑1BBL‑MICA滋养细胞的制备，4)PBMC细胞的提取，5)NK细胞的体外扩增；本发明提供一种NK细胞的制备方法，采用单独构建表达mbIL‑21、4‑1BBL、MICA三种分子的质粒载体，重组慢病毒感染K562的方法，制备NK细胞，制备方法解决现有技术的缺点，利用IL‑21、4‑1BBL、MICA分子同时表达的K562细胞然后作为滋养细胞用于扩增培养NK细胞，其NK细胞扩增倍数高达890倍，制得NK细胞的纯度到达92.2％，并且不同的PBMC细胞间的扩增倍数重复性好。
一种利用滋养细胞高效扩增 nk 制备方法

[实用新型]一种NK水封阀操作实验装置-CN201921057124.8有效
发明人：陆锦楚;陆智杰;金文;张佳 -专利权人：上海宝徕科技开发有限公司
申请日： 2019-07-08 - 公布日： 2020-06-16 - 主分类号： G09B25/02 文献下载
摘要：本实用新型提供了一种NK水封阀操作实验装置，属于冶金煤气教学技术领域，括实验板和NK水封阀，所述NK水封阀固定安装在实验板侧方，所述实验板侧方还安装有水箱，所述NK水封阀与水箱之间通过排水管连通，所述排水管上设有排水阀，所述排水管上还连通有上水管，所述上水管上设有上水阀；所述NK水封阀上还连通有溢流管和放散管，所述放散管与溢流管远离NK水封阀的一端连通有管路，放散管上设有放散阀。本实用新型实施例中，通过将整个庞大的NK水封阀操作系统，浓缩于一块实验板上，并在实验板上集成带灯按钮以及指示灯等元器件，配合MCU控制系统利用模拟的方式，让学生进行整个过程的动手操作，极大地简化了硬件成本
一种 nk 水封操作实验装置

[发明专利]一种基于NK1R蛋白的白血病检测试剂盒-CN201610580723.2在审
发明人：付彩云;周涵薇;陈麒;施越;葛晨涛 -专利权人：浙江理工大学
申请日： 2016-07-21 - 公布日： 2017-01-04 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于NK1R蛋白的白血病检测试剂盒。具体地，本发明涉及：检测受试者中NK1R表达水平的方法；受试者中NK1R的表达水平在白血病病人检测中的用途；以及涉及一种试剂盒产品，其包括作为活性成分的NK1R的抗体和包括涉及该产品的说明书。
一种基于 nk1r 蛋白白血病检测试剂盒

[发明专利]一种高纯度NK细胞的分离培养方法-CN202110303147.8在审
发明人：杨本艳姿;李雪莲;陈强 -专利权人：四川新生命干细胞科技股份有限公司
申请日： 2017-09-05 - 公布日： 2021-07-02 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于分离培养高纯度NK细胞的试剂盒，它包含培养基1‑3，本发明还提供了一种高纯度NK细胞的分离培养方法。利用本发明提供的试剂盒及分离培养方法，可以高效获得满足临床使用的NK细胞，细胞数量多，纯度高、杀伤活性好，在同种异体NK回输方面具有突出优势，应用前景良好。
一种纯度 nk 细胞分离培养方法

[发明专利]常山乙素用于提高NK细胞杀伤力的用途-CN202210113768.4在审
发明人：不公告发明人 -专利权人：淮安泰凯睿医药科技有限公司
申请日： 2022-01-30 - 公布日： 2022-04-01 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明公开了常山乙素用于提高NK细胞杀伤力的用途。本发明基于细胞增殖实验、Western blot实验、ELISA实验和靶细胞杀伤实验，发现常山乙素在体外可以促进NK细胞增殖并提高其杀伤力，这说明常山乙素具有提高NK细胞增殖活性和杀伤力的作用，可以用于开发提高NK细胞增殖活性和杀伤力的培养基。
常山用于提高 nk 细胞杀伤力用途

[发明专利]P－选择素糖蛋白配体1的调节剂-CN200710003904.X有效
发明人：林荣华;吴忠勋;徐碧岭 -专利权人：台医生物科技股份有限公司
申请日： 2002-03-13 - 公布日： 2007-10-03 - 主分类号： A61K39/395 文献下载
摘要：与T细胞或NK细胞表面的P－选择素糖蛋白配体1(PSGL－1)结合的化合物，可用于诱发T细胞或NK细胞的消减和/或诱发T细胞或NK细胞的细胞凋亡。本发明的化合物及方法可用来调节自身免疫性疾病、器官移植排斥以及过敏性疾病中的不需要的T细胞或NK细胞诱发的免疫应答。
选择糖蛋白调节剂

[发明专利]一种提高骨髓瘤杀伤活性的NK细胞制备方法-CN202111009846.8有效
发明人：郑成云;任婧;姜杨 -专利权人：山东大学第二医院
申请日： 2021-08-31 - 公布日： 2023-05-26 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明属于生物医药领域，提供了一种提高骨髓瘤杀伤活性的NK细胞制备方法：NK细胞中加入GSK‑3β抑制剂孵育。本发明提供的提高NK细胞杀伤活性的方法，采用GSK‑3β抑制剂处理，可以增强NK细胞对骨髓瘤细胞的杀伤能力。本发明制备过程简单、可操作性强，为临床医学应用提供了可行的办法。
一种提高骨髓瘤杀伤活性 nk 细胞制备方法

[发明专利]P－选择素糖蛋白配体1的调节剂-CN02802984.4有效
发明人：林荣华;吴忠勋;徐碧岭 -专利权人：台医生物科技股份有限公司
申请日： 2002-03-13 - 公布日： 2004-02-04 - 主分类号： A61K39/395 文献下载
摘要：与T细胞或NK细胞表面的P－选择素糖蛋白配体1(PSGL－1)结合的化合物，可用于诱发T细胞或NK细胞的消减和/或诱发T细胞或NK细胞的细胞凋亡。本发明的化合物及方法可用来调节自身免疫性疾病、器官移植排斥以及过敏性疾病中的不需要的T细胞或NK细胞诱发的免疫应答。
选择糖蛋白调节剂

[发明专利]一种治疗病毒性角膜炎的NK细胞分泌的蛋白滴眼液及其制备方法和应用-CN201610029136.4在审
发明人：王一飞;陈海佳;葛啸虎;应杰 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2016-01-15 - 公布日： 2016-06-01 - 主分类号： A61K35/14 文献下载
摘要：本发明涉及生物医学技术领域，具体涉及一种治疗病毒性角膜炎的NK细胞分泌的蛋白滴眼液及其制备方法和应用，本发明的治疗病毒性角膜炎的NK细胞分泌的蛋白滴眼液，针对病毒性角膜炎治疗中通过消炎、抗病毒为主的治疗方式进行制备，成分明确，针对性强，效果明显，制备方法首先对NK细胞进行扩增培养，然后再收集NK细胞分泌的蛋白，将蛋白进行纯化和冻干后与辅助制剂复配制得NK细胞分泌的蛋白滴眼液，制备方法简单、成本低，本发明的NK细胞分泌的蛋白滴眼液在治疗病毒性角膜炎的应用中具有显著的效果
一种治疗病毒性角膜炎 nk 细胞分泌蛋白滴眼液及其制备方法应用

[发明专利]一种基因工程细胞及体外高效扩增NK细胞的方法-CN201810818273.5在审
发明人：许先进;韩俊峰;雷菁;曾祺森;刘慧莹 -专利权人：武汉赛云博生物科技有限公司
申请日： 2018-07-24 - 公布日： 2018-11-16 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明涉及免疫学领域，具体涉及一种基因工程细胞和利用该基因工程细胞进行体外高效扩增NK细胞的方法。该基因工程细胞利用Piggybac转座子系统构建跨膜稳定表达IL‑15、IL‑18和4‑1BBL的K562工程化细胞，并采用细胞体外刺激技术，提供一种基于基因工程K562细胞扩增激活NK细胞的方法。该基因工程细胞能同时跨膜高表达IL‑15、IL‑18和4‑1BBL；本发明的NK细胞扩增方法操作简单、成本低，扩增的NK细胞具有纯度高、数量大、杀伤活性好等优点，适合于NK细胞大规模制作，为NK细胞过继性免疫治疗应用于临床打下了良好的基础
基因工程细胞扩增体外大规模制作基因工程免疫治疗杀伤活性系统构建高表达工程化免疫学膜稳定激活细胞刺激应用

[发明专利]一种脐血NK细胞的体外扩增方法及其试剂盒与应用-CN201610214351.1在审
发明人：武晓云;刘学敏;康会彦;王云虹;樊晓翔;李志刚;丁炜;武立华;李金艳;沈殿富;张慧珍 -专利权人：北京京蒙高科干细胞技术有限公司
申请日： 2016-04-07 - 公布日： 2017-10-20 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明公开了一种脐血NK细胞的体外扩增方法及其试剂盒与应用。本发明所提供的脐血NK细胞的体外扩增方法包括从分离的脐血单个核细胞活化培养和增殖培养脐血NK细胞的过程。与现有的分离及扩增脐血NK细胞的方法相比，本发明不需要细胞分选，不需要滋养层细胞，操作简单，通用性好，成本低，所用试剂不含动物源成分，安全性好，NK细胞产量高，获得的脐血NK细胞的纯度达90％以上，细胞总数可达
一种 nk 细胞体外扩增方法及其试剂盒应用

[发明专利]一种NK样细胞的培养方法-CN202010942374.0在审
发明人：汤朝阳;秦乐;吴迪;魏志辉;王翠花;其他发明人请求不公开姓名 -专利权人：广东昭泰体内生物医药科技有限公司
申请日： 2020-09-09 - 公布日： 2020-12-08 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明提供了一种NK样细胞的培养方法，所述方法包括以下步骤：(1)将靶向Bcl11b基因的RNP复合物电转入活化的T细胞，得到NK样细胞；(2)将所述NK样细胞与人工抗原呈递细胞共培养；其中，所述RNP本发明将靶向Bcl11b基因的RNP复合物电转入活化的T细胞，使得基因编辑系统转入原代T细胞中进行高效的基因编辑，将所述NK样细胞与人工抗原呈递细胞共培养，可以在2周内快速获得大量高纯度的NK样细胞，制备得到具有显著增强的杀伤作用的NK样细胞。
一种 nk 细胞培养方法

[发明专利]一种体外稳定扩增高纯度、高细胞毒活性NK细胞的方法-CN201910408509.2在审
发明人：邓蒙蒙;程箫;刘丹;吴疆;王保如 -专利权人：安徽瑞达健康产业有限公司
申请日： 2019-05-16 - 公布日： 2019-11-29 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明公开了一种体外稳定扩增高纯度、高细胞毒活性NK细胞的方法，具体涉及自体或同种异体外周血单个核细胞在体外稳定的、大量扩增高纯度、高细胞毒活性的NK细胞的方法，步骤为：(1)分离单个核细胞；(2)通过免疫分选去除单个核细胞中的CD3⁺T淋巴细胞；(3)加入NK细胞培养用无血清细胞培养基及细胞因子IL‑15、IL‑12、IL‑21、IL‑2和OK432，体外培养2‑5天后全换液；(4)NK细胞换液；(5)收获NK细胞。在体外培养条件下稳定扩增大量高纯度、高细胞活性的NK细胞，同时减少T细胞数量，且满足临床应用所需。
单个核细胞细胞毒活性换液增高外周血单个核细胞无血清细胞培养基体外培养条件临床应用免疫分选体外培养同种异体细胞活性细胞因子高纯度扩增体外种体自体去除收获

[发明专利]一种NK滋养层细胞及其制备方法和应用-CN202110113580.5在审
发明人：赵礼军;熊建民 -专利权人：河南省华隆生物技术有限公司
申请日： 2021-01-27 - 公布日： 2021-05-28 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明提供了一种NK滋养层细胞及其制备方法和应用，所述NK滋养层细胞表达膜蛋白CD19、CD86、IL21、CD64和CD137L；所述IL‑21通过与CD8α跨膜区形成IL‑21‑CD8α融合蛋白表达在所述NK滋养层细胞表面；所述CD86包括SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；所述IL‑21‑CD8α包括SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。本发明构建的NK滋养层细胞对CD19、CD86、IL21、CD64和CD137L的表达率高，各因子协同激活NK细胞的增殖能力，实现了体外诱导NK细胞分化成熟的效果。
一种 nk 滋养细胞及其制备方法应用