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[发明专利]表达hTERT基因的重组非增殖型腺病毒及应用-CN201410194781.2无效
发明人：张越峰;金洁 -专利权人：浙江大学
申请日： 2014-05-10 - 公布日： 2014-07-30 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明提供一种表达hTERT基因的重组非增殖型腺病毒。是从质粒pIRES2-EGFP-hTERT中酶切获得目的基因hTERT，插入pSG218穿梭载体中巨细胞病毒启动子的下游，得到携带hTERT基因的重组穿梭载体，再将该重组穿梭载体与病毒骨架载体pPE3-F11B共转染至人胚肾293细胞，得到携带hTERT的非增殖型腺病毒。用该重组腺病毒感染人类多发性骨髓瘤细胞，可以使细胞过度表达hTERT基因，增强细胞对表阿霉素的耐药。本发明的主要用途是建立过表达hTERT基因的多发性骨髓瘤细胞株模型，并在此模型上进一步研究hTERT基因参与多发性骨髓瘤细胞耐药的机制。
表达 htert 基因重组增殖病毒应用

[发明专利]抑制端粒酶活性的核酶基因hTERT－5'RZ cDNA、重组载体与核酶-CN200410040520.1无效
发明人：刘柏林;屈艺;刘菽秋 -专利权人：四川大学
申请日： 2004-08-24 - 公布日： 2005-03-23 - 主分类号： C12N15/52 文献下载
摘要：本发明公开了一种抑制端粒酶活性的核酶基因hTERT－5’RZ cDNA、含该基因的重组载体和重组载体转录的核酶hTERT－5’RZ。将核酶基因hTERT－5’RZcDNA插入载体pcDNA3.1(+)的EcoRI－XhoI位点，即获重组质粒pcDNA3.1 hTERT－5’RZ。将重组质粒pcDNA3.1 hTERT－5’RZ用XhoI和EcoRI酶切使之线性化，采用T₇/SP₆体外转录试剂盒，经T₇RNA聚合酶催化即可转录出核酶hTERT－5’RZ，其二级结构如图3所述。核酶hTERT－5’RZ和核酶teloRZ还可以组成双核酶。检测结果表明，核酶hTERT－5’RZ和双核酶均能有效地抑制肿瘤生长。
抑制端粒活性基因 htert rz cdna 重组载体

[发明专利]由茶碱调控其靶特异性核糖核酸的取代活性的变构反式剪接I型核酶-CN200880000802.5有效
发明人：李城旭;张善英;金朱玄 -专利权人：檀国大学校产学协力团
申请日： 2008-12-16 - 公布日： 2010-03-31 - 主分类号： C12Q1/00 文献下载
摘要：提供了由茶碱调控靶特异性核糖核酸的取代活性的变构反式剪接I型核酶，其中靶向hTERT的反式剪接核酶识别人端粒酶反转录酶(hTERT)的mRNA作为癌症特异性RNA转录物以通过通信模块将茶碱适体连接到hTERT靶反式剪接核酶上，所述hTERT靶反式剪接核酶具有被证实的反式剪接的能力。变构反式剪接I型核酶可以有利地选择性仅诊断表达靶hTERT RNA的细胞，或者诱导它们的细胞凋亡，这是由于变构反式剪接I型核酶的活性依赖性地受到茶碱的调控以通过反式剪接来更正靶hTERT RNA。
茶碱调控特异性核糖核酸取代活性反式剪接型核酶

[发明专利]一种检测全血或血清样品中端粒酶的活性程度的试剂盒-CN201510033954.7在审
发明人：赵冬梅;于嘉屏 -专利权人：上海迪安医学检验所有限公司
申请日： 2015-01-23 - 公布日： 2015-05-06 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明提供了一种检测全血或血清样品中端粒酶的活性程度的试剂盒，属于分子生物学检测领域，该试剂盒包含如下引物：(1)端粒酶hTERT基因的引物序列：hTERT-F：5’-GGCCGATTGTGAACATGGA-3’；hTERT-R：5’-CCTCTTTTCTCTGCGGAACGT-3’；(2)端粒酶hTERT基因的探针序列：hTERT-P：5’-TACGTCGTGGGAGCCA-3’，且其5’端与荧光报告基因相连
一种检测血清样品端粒活性程度试剂盒

[发明专利]核素¹²⁵I标记双调控溶瘤腺病毒的方法及其对前列腺癌靶向治疗的实验研究方法-CN201811476838.2在审
发明人：韩从辉;郝林;史振铎;韩晓晓 -专利权人：徐州市中心医院
申请日： 2018-12-04 - 公布日： 2019-05-03 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明提供一种核素¹²⁵I标记双调控溶瘤腺病毒的方法及其对前列腺癌靶向治疗的实验研究方法，通过前列腺特异性抗原PSA启动子的克隆与鉴定；hTERT/PSA双调控增殖腺病毒载体RSOAds－hTERT/PSA的构建及鉴定；核素¹²⁵I标记hTERT/PSA双调控增殖型溶瘤腺病毒构建¹²⁵I－RSOAds－hTERT/PSA核素‑溶瘤病毒标记物；¹²⁵I－RSOAds－hTERT/PSA体外对激素非依赖性前列腺癌细胞的转染效率、肿瘤杀伤效应检测；¹²⁵I－RSOAds－hTERT/PSA靶向治疗前列腺癌抑瘤效应、瘤微环境改变观察本发明能够实现准确的影响分析，通过较全面的实验方法，进而实现对核素¹²⁵I标记PSA/hTERT启动子双调控溶瘤腺病毒对前列腺癌靶向治疗及瘤微环境影响的检测分析，保证了结果的准确性与可靠性
双调控前列腺癌溶瘤腺病毒靶向治疗实验研究启动子微环境构建激素非依赖性前列腺癌细胞前列腺特异性抗原肿瘤杀伤效应增殖腺病毒检测分析溶瘤病毒影响分析转染效率标记物体外抑瘤增殖克隆检测观察保证

[发明专利]抑制端粒酶逆转录酶hTERT表达的ShRNA在抗肿瘤中的应用-CN200610038270.7无效
发明人：孙倍成;王尤山;罗望;徐玲;许淼;张泓 -专利权人：南京中脉生物医药有限公司
申请日： 2006-02-14 - 公布日： 2006-10-11 - 主分类号： A61K48/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种抑制端粒酶逆转录酶hTERT表达的ShRNA在抗肿瘤中的应用。AATTCAAAAACCAAGCATTCCTGCTCAAGCTGACTCGATCTCTTGAATCGAGTCAACTTGAACAGGAATACTTGG－3’；将所述的ShRNA插入到慢病毒表达载体中，再整合到染色体中稳定表达SiRNA，从而抑制hTERT的表达；所述的ShRNA序列可识别端粒酶hTERT，被识别的序列为：CCAAGCATTCCTGCTCAAGCTGACTCGA，该序列针对hTERT全长mRNA序列(NCBI AB085628.)第3036
抑制端粒逆转录 htert 表达 shrna 肿瘤中的应用

[发明专利]hTERT慢病毒重组体永生化人牙周膜干细胞系的方法-CN201510256715.8有效
发明人：李昂;刘瑾;苟建重;王嗣岑 -专利权人：西安交通大学
申请日： 2015-05-19 - 公布日： 2018-06-05 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：hTERT慢病毒重组体永生化人牙周膜干细胞系的方法，包括以下步骤：步骤一、原代人牙周膜干细胞(hPDLSC)的培养：步骤二、稳定表达hTERT基因的永生化基因工程细胞系hTERT‑PDLSC构建：本发明利用表达hTERT基因的慢病毒载体，在一定条件下将其感染原代培养的PDLSC，经过嘌呤霉素的抗性筛选，得到稳定表达hTERT基因的永生化细胞系，能够将细胞使用寿命从3‑8代延长至35代，得到性质稳定、功能良好、
永生化人牙干细胞系稳定表达慢病毒重组体基因工程细胞系牙周膜干细胞慢病毒载体永生化细胞抗性筛选使用寿命性质稳定牙周组织嘌呤霉素干细胞感染原牙周炎表型构建研发细胞治疗研究

[发明专利]肿瘤靶向性腺相关病毒载体的构建和应用-CN200710071560.6无效
发明人：王毅刚;黄芳;张义玲;姜永厚;钱程;刘新垣 -专利权人：浙江理工大学
申请日： 2007-10-09 - 公布日： 2008-05-07 - 主分类号： C12N15/86 文献下载
摘要：本发明公开了一种肿瘤靶向性腺相关病毒载体系统rAAV－hTERT－gene的构建方法：用肿瘤特异性hTERT启动子控制腺相关病毒所携带的外源基因表达，构建成具有肿瘤靶向性、且可任意插入一种具有抗癌作用治疗基因的腺相关病毒载体系统rAAV－hTERT－gene。本发明还公开了按照上述方法构建的肿瘤靶向性腺相关病毒rAAV－hTERT－hTRAIL：该病毒为肿瘤靶向性腺相关病毒载体系统rAAV－hTERT－gene携带具有广泛选择性抗肿瘤活性的hTRAIL基因。
肿瘤靶向性腺相关病毒载体构建应用

[发明专利]hTERT-miR-221/222海绵及其在逆转乳腺癌的他莫昔芬耐药中的应用-CN201910364686.5有效
发明人：张国君;陈敏;欧阳檐秀;冯军 -专利权人：厦门大学附属翔安医院
申请日： 2019-04-30 - 公布日： 2021-03-19 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：hTERT‑miR‑221/222海绵及其在逆转乳腺癌的他莫昔芬耐药中的应用，涉及乳腺癌内分泌耐药的治疗。所述hTERT‑miR‑221/222海绵是特异靶向乳腺癌细胞内miR‑221/222的新型靶向复合物，所述hTERT‑miR‑221/222海绵是由人端粒酶逆转录酶启动子和miR‑221/222海绵组成所述hTERT‑miR‑221/222海绵可在逆转乳腺癌的他莫昔芬耐药中应用。所述hTERT‑miR‑221/222海绵可在乳腺癌细胞中稳定高效表达，从而逆转他莫昔芬耐药以及抑制肿瘤细胞的生长侵袭，在正常细胞中低表达甚至不表达，从而不影响正常细胞生长，因此副作用较小。
htert mir 221 222 海绵及其逆转乳腺癌莫昔芬耐药中的应用

[发明专利]hTERT重组子诱导构建神经管缺陷细胞模型及其细胞库-CN201310407552.X在审
发明人：翁炳焕;舒静;李晓;沈国松;杨燕梅;金帆 -专利权人：翁炳焕
申请日： 2013-09-01 - 公布日： 2015-03-18 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及用于医学领域的hTERT重组子诱导构建神经管缺陷细胞模型及其细胞库，其主要特征是以内切酶EcoR I和Xho I双酶切质粒pCIneo-hTERT和载体pLXSNneo，以Ligation Mix连接经PCR扩增、凝胶电泳分离的hTERT和pLXSNneo酶切产物，构建pLXSNneo-hTERT重组子，转化DH5a感受态细胞以纯化扩增并抽提质粒，以脂质体转染离体传代呈对数生长的神经管缺陷细胞，使重组子与细胞DNA整合，并扩大培养经G418筛选含阳性重组子克隆，筛选细胞形态、生长曲线、染色体核型、裸鼠致瘤试验、细胞端粒酶活性、hTERT mRNA表达、免疫组化、细胞增殖周期及其凋亡率符合永生细胞特性并与原代细胞相同或相近者作为hTERT重组子诱导的神经管缺陷细胞模型冻存于液氮，为从细胞水平在体外长期研究其发病机制奠定基础。
htert 重组诱导构建神经管缺陷细胞模型及其

[发明专利]猪支气管上皮细胞系、制备方法及其应用-CN201710556520.4有效
发明人：谢星;邵国青;冯志新;甘源;庞茂达;张磊;刘蓓蓓;王海燕;于岩飞;陈蓉;熊祺琰;刘茂军;韦艳娜;华利忠;吴猛 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2017-07-10 - 公布日： 2020-08-28 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：猪支气管上皮细胞系hTERT‑PBEC，保藏编号为CCTCC NO：C201749。该细胞系hTERT‑PBEC的制备方法，包括构建携带绿色荧光蛋白基因和人端粒酶逆转录酶基因的真核表达载体pEGFP‑hTERT；利用Lipofectamin 3000将真核表达载体pEGFP‑hTERT转染猪原代支气管上皮细胞，通过G418筛选得到猪支气管上皮细胞系hTERT‑PBEC。
支气管上皮细胞系制备方法及其应用

[发明专利]顺铂联合phTERT－HRP/IAA在治疗宫颈癌细胞药物中的应用-CN200810197011.8无效
发明人：周云峰;周福祥;谢丛华;廖正凯;张红艳 -专利权人：武汉大学
申请日： 2008-09-18 - 公布日： 2009-03-04 - 主分类号： A61K33/24 文献下载
摘要：本发明公开了一种顺铂联合phTERTp－HRP/IAA在治疗宫颈癌细胞药物中的应用，具体涉及顺铂对hTERT基因启动子活性的增强作用，顺铂与phTERTp－HRP/IAA共同用于杀伤人宫颈癌细胞的协同作用本发明采用Hela细胞进行研究，通过hTERT启动子调控的下游荧光素酶报告基因的表达，评价顺铂对hTERT启动子活性的影响。并通过检测细胞增殖率、细胞凋亡率、细胞周期来评价顺铂与hTERT启动子调控HRP/IAA系统基因治疗联合使用时的协同杀伤作用和机制。结果证实，顺铂可以增强hTERT基因启动子活性，与phTERTp－HRP/IAA联用时对人宫颈癌细胞有显著的杀伤作用。
联合 phtert hrp iaa 治疗宫颈癌细胞药物中的应用

[发明专利]导入hTERT重组子构建巨核细胞模型及其细胞库-CN201310403790.3在审
发明人：翁炳焕;罗玉琴;李晓;严恺;沈国松;黄荷凤 -专利权人：翁炳焕
申请日： 2013-09-01 - 公布日： 2015-03-18 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及用于医学领域的导入hTERT重组子构建巨核细胞模型及其细胞库的方法，其主要特征是以内切酶EcoR I和Xho I双酶切质粒pCIneo-hTERT和载体pLXSNneo，以Ligation Mix连接经PCR扩增、凝胶电泳分离的hTERT和pLXSNneo酶切产物，构建pLXSNneo-hTERT重组子，转化DH5a感受态细胞以纯化扩增并挑取耐氨苄青霉素菌落抽提质粒，以脂质体转染离体传代呈对数生长的巨核细胞，使重组子与细胞的DNA整合，并扩大培养经G418筛选含阳性重组子细胞，筛选细胞形态、生长曲线、染色体核型、裸鼠致瘤试验、转染细胞端粒酶活性、hTERT mRNA表达、免疫组化、细胞增殖周期及其凋亡率符合永生化细胞特性并与原代细胞相同或相近者作为hTERT介导的体外研究巨核细胞模型冻存于液氮，为从细胞水平在体外长期研究相关疾病的发病机制奠定基础。
导入 htert 重组构建巨核细胞模型及其细胞

[发明专利]hTERT重组构建染色体易位细胞模型及其细胞库-CN201310403850.1在审
发明人：翁炳焕;李晓;马袁英;马裕;叶光勇;金帆 -专利权人：翁炳焕
申请日： 2013-09-01 - 公布日： 2015-03-18 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明涉及用于医学领域的hTERT重组构建染色体易位细胞模型及其细胞库，其主要特征是以内切酶EcoR I和Xho I双酶切质粒pCIneo-hTERT和载体pLXSNneo，以Li gation Mix连接经PCR扩增、凝胶电泳分离的hTERT和pLXSNneo酶切产物，构建pLXSNneo-hTERT重组子，转化DH5a感受态细胞以纯化扩增并挑取耐氨苄青霉素菌落抽提质粒，以脂质体转染离体传代呈对数生长的染色体易位细胞，使重组子与细胞DNA整合，并扩大培养经G418筛选含阳性重组子克隆，筛选细胞形态、生长曲线、染色体核型、裸鼠致瘤试验、转染细胞端粒酶活性、hTERT mRNA表达、免疫组化、细胞增殖周期及其凋亡率符合永生细胞特性并与原代细胞相同或相近者作为hTERT介导染色体易位细胞模型冻存于液氮中，为从细胞水平在体外长期研究其发病机制奠定基础。
htert 重组构建染色体易位细胞模型及其

[发明专利]hTERT转染构建染色体缺失猫叫综合征细胞模型及其细胞库-CN201310407632.5在审
发明人：翁炳焕;舒静;李晓;罗玉琴;沈国松;黄荷凤 -专利权人：翁炳焕
申请日： 2013-09-01 - 公布日： 2015-03-18 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及用于医学领域的hTERT转染法构建染色体缺失猫叫综合征细胞模型及其细胞库，其主要特征是以内切酶EcoR I和Xho I双酶切质粒pCIneo-hTERT和载体pLXSNneo，以Ligation Mix连接经PCR扩增、凝胶电泳分离的hTERT和pLXSNneo酶切产物，构建pLXSNneo-hTERT重组子，转化DH5a感受态细胞以纯化扩增并抽提质粒，以脂质体转染离体传代呈对数生长的染色体缺失猫叫综合征细胞，使重组子与细胞DNA整合，并扩大培养经G418筛选含阳性重组子克隆，筛选细胞形态、生长曲线、染色体核型、裸鼠致瘤试验、细胞端粒酶活性、hTERT mRNA表达、免疫组化、细胞增殖周期及其凋亡率符合永生细胞特性并与原代细胞相同或相近者作为hTERT转染的染色体缺失猫叫综合征细胞模型冻存于液氮，为从细胞水平在体外长期研究其发病机制奠定基础。
htert 转染构建染色体缺失猫叫综合征细胞模型及其

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