本发明公开了一种人工改造的β‑半乳糖苷酶GaLT1及其在水解乳糖中的应用,所述β‑半乳糖苷酶GaLT1是在来源于T.scotoductus的野生型β‑半乳糖苷酶GaLT0的N端氨基酸序列连接了一个人工改造的双亲短肽序列,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明β‑半乳糖苷酶GaLT1相较于野生型的β‑半乳糖苷酶GaLT0的温度稳定性得到了显著改善,55℃的半衰期提高10倍;此外,β‑半乳糖苷酶GaLT1的牛奶乳糖降解率也明显提高,55℃、2h内能降解牛奶中
本发明公开了一种特异靶向小鼠Galt基因的sgRNA导向序列及其应用,属于医学遗传学和分子生物学技术领域。所述sgRNA对应的核苷酸序列含有如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3中的任意一种所示序列。本发明还公开了利用上述的特异靶向小鼠Galt基因的sgRNA导向序列编辑小鼠Galt基因的方法。本发明的sgRNA导向序列可以介导Cas9蛋白,高效地切割靶点DNA,进而用于编辑小鼠Galt基因,影响小鼠Galt基因编码蛋白的功能。
本发明涉及B3GALT5基因第三号外显子的单核苷酸多态性(SNP)。本发明提供了分析B3GALT5基因第三号外显子的SNP或其活性的方法。本发明的SNP是SEQ ID NO:1所示序列的人B3GALT5基因第三号外显子的第13位的C->T多态性。该SNP导致编码蛋白第4位发生Thr(T)->Met(M)改变,从而改变了蛋白活性。