本发明提供一个从大豆孢囊线虫克隆的几丁质合成酶基因SCN‑CHS,该基因的DNA序列如SEQ ID No.1所示,基因SCN‑CHS的cDNA序列如SEQ ID No.2所示,基因SCN‑CHS的蛋白质序列如SEQ ID No.3所示。选用大豆孢囊线虫几丁质合成酶基因(SCN‑CHS)的几丁质合成核心结构域,以此结构域为靶点构建寄主植物介导的基因沉默(HIGS)转基因植株,表明HIGS植株对SCN的影响不依赖于生理小种,且对SCN的影响可稳定遗传本发明将有助于解析几丁质合成酶基因SCN‑CHS在大豆孢囊线虫中的生物学功能,明确基于RNAi开发的HIGS植株在防控大豆孢囊线虫病害的应用潜力。
本发明涉及一种艾纳香查尔酮合酶基因Bb‑CHS,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1,一种艾纳香查尔酮合酶基因Bb‑CHS编码的蛋白质,氨基酸序列如SEQ ID NO:2,本发明还涉及RT‑PCR和RACE技术相结合,用于克隆艾纳香查尔酮合酶基因Bb‑CHS基因全长的方法。为进一步研究艾纳香Bb‑CHS基因的表达、调控奠定了基础,为Bb‑CHS基因参与艾纳香黄酮组成及调控机制研究提供参考,同时也为菊科植物Bb‑CHS基因功能和进化研究提供了新的背景资料。另外Bb‑CHS基因的大量表达,有助于提高艾纳香的生物学产量,同时提高植株有效成分榭皮素等类黄酮化合物的含量,从而同时提高艾纳香的产量和品质。
本发明公开了一种靶向蚜虫AK、SOD和CHS基因并可致死蚜虫的dsRNA药剂的制备、筛选及其应用,所述蚜虫AK、SOD和CHS基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5,所述靶向蚜虫AK、SOD和CHS基因并可致死蚜虫的dsRNA的核苷酸序列为SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.6,本发明开发了一种可筛选高效致死蚜虫的dsRNA本发明还提供了一种dsRNA复配药剂的制备方法,该药剂通过诱导蚜虫靶标基因AK、SOD和CHS的沉默,导致橘蚜出现高致死率,从而实现对柑橘蚜虫的防治,减少柑橘衰退病的传播。