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[发明专利]海洋DNA聚合酶I-CN202080069145.0在审
发明人：阿特勒·诺拉尔夫·拉森;伊冯娜·皮奥特罗斯基 -专利权人：特罗姆瑟大学-挪威北极圈大学
申请日： 2020-10-01 - 公布日： 2022-07-15 - 主分类号： C12N9/12 文献下载
摘要：本发明涉及DNA聚合酶。特别地，本发明涉及海洋来源的热不稳定DNA聚合酶，其具有高聚合酶活性、链置换活性和3’‑5’核酸外切酶活性。此外，本发明提供了基本上没有链置换活性的热不稳定DNA聚合酶。
海洋 dna 聚合

[发明专利]一种菠萝蛋白酶浸提液的制备方法及其所用的稳定保护剂-CN201310321104.8有效
发明人：李媚;廖安平;黄江冲;蓝平;蓝丽红;唐梅;吴如春;谢涛;文承彦 -专利权人：广西民族大学;南宁市速泊安特生化科技有限公司
申请日： 2013-07-29 - 公布日： 2013-10-23 - 主分类号： C12N9/50 文献下载
摘要：本发明公开了一种菠萝蛋白酶浸提液的制备方法及所用的稳定保护剂。该制备方法包括：在原料中加入水和菠萝蛋白酶活性稳定保护剂，混合，破碎，压榨取汁液，将所得汁液的pH值调整为3.0～6.5，4～30℃持续的时间为5～40分钟，过滤，即得菠萝蛋白酶浸提液。该制备方法能够充分发挥菠萝蛋白酶活性稳定保护剂的作用，减少在后续的分离提纯操作中菠萝蛋白酶的失活，保持菠萝蛋白酶的活性稳定，有效提高浸提液中菠萝蛋白酶的酶活回收比率。本发明所述的菠萝蛋白酶活性稳定保护剂能够有效保护菠萝蛋白酶的活性，使菠萝蛋白酶浸提液中的菠萝蛋白酶的酶活回收比率大大增强。
一种菠萝蛋白酶浸提液制备方法及其所用稳定保护

[发明专利]微生物中酶活性的诱导和稳定-CN201210105416.0有效
发明人：乔治·E·皮尔斯;吉恩·德拉戈;桑热塔·甘谷利 -专利权人：佐治亚州立大学研究基金会
申请日： 2007-01-30 - 公布日： 2012-08-15 - 主分类号： C12N11/10 文献下载
摘要：本发明涉及用于在酶或能产生所述酶的微生物中诱导所需活性的方法。本发明进一步涉及稳定在微生物中的活性的方法。在具体实施方式中，本发明提供了用于诱导和稳定腈水合酶活性、酰胺酶活性和天冬酰胺酶I活性的方法。本发明进一步提供包含具有被诱导和/或被稳定的活性的酶或者微生物的组合物。
微生物活性诱导稳定

[发明专利]微生物中酶活性的诱导和稳定-CN200780011311.6有效
发明人：乔治·E·皮尔斯;吉恩·德拉戈;桑热塔·甘谷利 -专利权人：佐治亚州立大学研究基金会
申请日： 2007-01-30 - 公布日： 2009-04-15 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明涉及用于在酶或能产生所述酶的微生物中诱导所需活性的方法。本发明进一步涉及稳定在微生物中的活性的方法。在具体实施方式中，本发明提供了用于诱导和稳定腈水合酶活性、酰胺酶活性和天冬酰胺酶I活性的方法。本发明进一步提供包含具有被诱导和/或被稳定的活性的酶或者微生物的组合物。
微生物活性诱导稳定

[发明专利]一种高热稳定性和高活性的胃蛋白酶突变体设计方法-CN202210895764.6在审
发明人：李金金;韩彦强 -专利权人：上海茵肽信息科技有限公司
申请日： 2022-07-27 - 公布日： 2022-10-18 - 主分类号： C12N9/64 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种为了解决胃蛋白酶热稳定性及活性的问题，从而提出了一种针对胃蛋白酶活性和热稳定性的高效理性设计方法。主要从计算机理论计算快速虚拟筛选突变体，然后使用多重实验验证酶催化结果两方面进行。选取具有高温活性、稳定性和广泛pH稳定性的胃蛋白酶进行一系列理性计算，筛选出潜在的热稳定性和高活性的突变体；利用毕赤酵母表达系统进行异源表达，利用纯化后的重组胃蛋白酶测定热稳定性和酶活性，最终筛选出具有最高热稳定性和活性的胃蛋白酶突变体对为未来胃蛋白酶的工业化生产和应用具有重要的指导意义。
一种高热稳定性活性胃蛋白酶突变体设计方法

[发明专利]微生物中酶活性的诱导和稳定-CN201180006968.X无效
发明人：乔治·E·皮尔斯;T·A·图克 -专利权人：佐治亚州立大学研究基金会
申请日： 2011-01-24 - 公布日： 2012-11-07 - 主分类号： C12N9/96 文献下载
摘要：本文提供的是用于诱导和稳定酶活性的方法。任选地，酶处于能够产生所述酶的微生物中。在一些实施方案中，所述酶可以是腈水合酶、酰胺酶或天冬酰胺酶I。提供的是包含具有受诱导和/或稳定的活性的酶或微生物的组合物。还提供的是通过使植物或植物部分暴露于具有受诱导和/或稳定的活性的酶或微生物而延迟植物发育过程的方法。
微生物活性诱导稳定

[发明专利]酶组合物及其制备方法-CN201911078135.9有效
发明人：张小蒙;张莉;杨恒月;周敏 -专利权人：江苏医药职业学院
申请日： 2019-11-06 - 公布日： 2022-04-29 - 主分类号： C12N9/96 文献下载
摘要：本发明属于酶活性技术领域，涉及一种酶组合物及其制备方法。该酶组合物包括：酶以及蝉花活性物质。本发明提供的酶组合物能够提高酶的热稳定性，并且不影响酶的活性。
组合及其制备方法

[发明专利]稳定的α-半乳糖苷酶水性组合物及其相关方法-CN201010170755.8有效
发明人： W·霍尔克;R·米勒;M·施米特;H·索贝克;J-P·萨尔霍弗 -专利权人：霍夫曼-拉罗奇有限公司
申请日： 2010-04-21 - 公布日： 2010-10-27 - 主分类号： C12N9/96 文献下载
摘要：本发明涉及稳定的α-半乳糖苷酶水性组合物及其相关方法。本发明提供包含具有α-半乳糖苷酶酶活性的蛋白的水性组合物。本发明还提供了使包含具有α-半乳糖苷酶酶活性的蛋白的水性组合物稳定的方法，以及制备包含所述的具有α-半乳糖苷酶酶活性的蛋白的纯化的水性组合物的方法。
稳定半乳糖水性组合及其相关方法

[发明专利]稳定化胆碱酯酶底物溶液-CN200610164253.8无效
发明人： N·戈特沙尔克;H·－J·凯特兹亚;M·穆克克;R·纳格尔;F·韦伯 -专利权人：霍夫曼－拉罗奇有限公司
申请日： 2006-12-07 - 公布日： 2007-06-13 - 主分类号： C12Q1/46 文献下载
摘要：本发明涉及极性有机溶剂在使胆碱酯酶底物溶液稳定化中的用途，其中在缓冲溶液中至少一种底物被至少一种极性有机溶剂物质稳定，还涉及所述溶液用于确定样品中胆碱酯酶活性的用途。此外，本发明还包括用于确定样品中胆碱酯酶活性的稳定化胆碱酯酶底物溶液，其中至少一种底物被至少一种极性有机溶剂物质稳定。此外，本发明涉及用于确定样品中胆碱酯酶的活性的方法，以及用于确定样品中胆碱酯酶的活性的试剂盒和用于进行确定样品中胆碱酯酶的活性的方法的试剂盒。
稳定胆碱酯酶溶液

[发明专利]哈工大异养硝化不动细菌L7产低温氨单加氧酶的方法及其分离纯化方法-CN201310201282.7有效
发明人：李伟光;黄晓飞;秦雯;张多英 -专利权人：哈尔滨工业大学
申请日： 2013-05-27 - 公布日： 2013-10-30 - 主分类号： C12N9/02 文献下载
摘要：哈工大异养硝化不动细菌L7产低温氨单加氧酶的方法及其分离纯化方法，它涉及产酶的方法及其分离纯化方法。产酶：L7菌株接种到产酶液体培养基中培养。分离纯化：一、L7菌株接种到产酶液体培养基中培养，收集菌体；二、将菌体破碎，制备不含溶菌酶的细胞膜；三、对细胞膜进行分离，平衡，洗脱，层析，收集的样品即完成。本发明中产酶液体培养基接种L7菌株的产酶量高，活性稳定，4℃培养70～78h后酶活性最高，产酶量最高。本发明分离纯化方法，所得低温氨单加氧酶是分子量31KDa的单体蛋白，在4～15℃酶活性稳定，当温度超过20℃时，酶失活。在pH值7.5～9酶活性稳定，当pH值为8.0时，酶活性最高。
哈工大硝化不动细菌 l7 低温氨单加氧酶方法及其分离纯化

[发明专利]核酸扩增方法-CN96113219.1无效
发明人：戴维·E·伯奇;沃尔特·J·莱尔德;迈克尔·A·佐科利 -专利权人：霍夫曼-拉罗奇有限公司
申请日： 1996-08-25 - 公布日： 1997-06-11 - 主分类号： C12N9/00 文献下载
摘要：本发明提供了由化学修饰而可逆失活的热稳定性酶，其特征在于，该化学修饰的热稳定性酶在温度低于约25℃时呈碱性pH的缓冲水液中温育，导致酶活性在少于约20分钟内酶活性无明显增加，且其中所说的化学修饰的酶在配成25℃下约pH8-9的缓冲水液中在大于约50℃的温度下温育，导致酶活性在少于约20分钟内酶活性至少增加两倍，该化学修饰的热稳定性酶可以用于扩增核酸，该失活酶的活性通过在扩增反应前或作为扩增反应的部分在增高的温度下温育反应混合物而恢复
核酸扩增方法

[发明专利]一种热稳定性壳聚糖酶的制备方法-CN201810894546.4在审
发明人：张娟;冯志彬;段春利 -专利权人：鲁东大学
申请日： 2018-08-08 - 公布日： 2018-12-14 - 主分类号： C12N9/24 文献下载
摘要：本发明公开了一种热稳定性壳聚糖酶的制备方法，包括高催化活性，常温酶活性持久的壳聚糖酶基因的克隆，含高催化活性，常温酶活性持久的壳聚糖酶工程菌的构建，高催化活性，常温酶活性持久的壳聚糖酶BmCsn的制备。本发明的壳聚糖酶具有明显的稳定性，28℃保温7天，酶的活性仅较最初活性降低5％。高于已报道一般产品的稳定性。本发明的壳聚糖酶进行的发酵条件的优化，其蛋白量高达4.5g/L。本发明中的壳聚糖酶经高密度发酵后，其酶活高达834U/mL发酵液。
壳聚糖酶高催化活性酶活性制备热稳定性壳聚糖酶基因高密度发酵发酵条件活性降低蛋白量发酵液工程菌构建酶活保温克隆优化

[发明专利]一种低温活性改良的外切菊粉酶突变体MutDR121EH9-CN202110041629.0有效
发明人：张蕊;周峻沛;黄遵锡;岑潇龙;许波;韩楠玉;唐湘华;李俊俊;吴倩;高艳秀 -专利权人：云南师范大学
申请日： 2021-01-13 - 公布日： 2023-08-15 - 主分类号： C12N9/24 文献下载
摘要：本发明公开了一种低温活性改良的外切菊粉酶突变体MutDR121EH9，该突变体MutDR121EH9具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列，其热活性和热稳定性发生了改变，在低温下具有更高的活性，而热稳定性降低，低温活性变高有利于在低温反应时减少酶的用量或缩短反应时间，热稳定性变差有利于通过热处理控制酶的反应过程。野生酶InuAMN8的最适温度为35℃，突变酶MutDR121EH9的最适温度为20℃；50℃处理后，野生酶InuAMN8保持81％以上的酶活性，突变酶MutDR121EH9的酶活从32％降至14％。
一种低温活性改良外切菊粉突变体 mutdr121eh9

[发明专利]内酯酶的制造方法及其应用-CN200480007576.5无效
发明人：清水昌;片冈道彦;坂本惠司 -专利权人：第一精密化学株式会社
申请日： 2004-03-03 - 公布日： 2006-04-19 - 主分类号： C12N1/15 文献下载
摘要：作为医药品等有用物质的合成中间体，需要大量并且低价地生产光学活性的泛解酸内酯等γ－内酯衍生物。为了这个目的，利用可进行不对称水解的酶－内酯酶的技术很有优势，不过该酶的制造或该酶产生微生物的利用还存在尚未解决的问题。当使用重组技术时也很难以取得到充分并且稳定的酶活性。用重组技术将成熟内酯酶DNA和信号肽区域DNA均导入到宿主中生产能够选择性地不对称水解外消旋泛解酸内酯等的γ－内酯衍生物的内酯酶，能够得到天然内酯酶所欠缺的稳定的活性，还能够得到保持高的酶活性并且稳定地保持该活性的转化子
内酯制造方法及其应用

[发明专利]DNA聚合酶和DNA聚合酶衍生的3′-5′外切核酸酶-CN202080069360.0在审
发明人：阿特勒·诺拉尔夫·拉森;伊冯娜·皮奥特罗斯基 -专利权人：特罗姆瑟大学-挪威北极圈大学
申请日： 2020-10-01 - 公布日： 2022-07-08 - 主分类号： C12N9/12 文献下载
摘要：本发明涉及具有DNA聚合酶和3'‑5'外切核酸酶活性的酶。具体而言，本发明涉及具有海洋来源的DNA聚合酶II活性和3'‑5'外切核酸酶活性的热不稳定酶。此外，本发明涉及主要发挥3'‑5'活性，即不存在聚合酶活性的DNA聚合酶。本发明还涉及外切核酸酶活性用于降解双链DNA的3'‑5'链从而例如在重组克隆过程中或在去除污染核酸分子的过程中进行单链悬突的用途。
dna 聚合衍生外切核酸酶

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