本发明涉及一种头足类线粒体基因组研究领域，尤其涉及一种梭子蟹科线粒体COI基因通用引物及设计和扩增方法，所述的梭子蟹科线粒体COI基因通用正向引物为SEQ ID NO.1：5’‑TCNACAAAYCATAAAGAYATYGG‑3’，反向引物为SEQ ID NO.2：5’‑TANACYTCWGGRTGHCCRAARAAYCA‑3’。本发明解决了现有技术中并没有利用DNA条形码技术对梭子蟹科进行鉴定的方法，具有1）本发明提供的梭子蟹科线粒体COI基因通用引物，可以一次性高效批量对多种梭子蟹科进行扩增，能够为梭子蟹科物种鉴定提供极大的便利；2）本发明在梭子蟹科线粒体COI基因两段保守区域设计通用引物，扩增出中间的变异序列，扩增长度在600‑700 bp左右，既有足够的信息位点用于物证鉴定区分，又能保证一个测序反应就能完成，操作简单，节约成本的优点
本发明提供一种基于ARMS荧光PCR法检测基因多态性的通用型荧光发夹引物，所述引物的核苷酸序列如Seq ID No：1和2所示。本发明提供的检测引物与荧光引物价格低廉，所需要的其他实验耗材价格也廉价易得。在实验过程中不需测序，在节省了检测成本的同时，大大缩短了检测周期，提高了检测的效率。与Taqman探针法相比，本发明使用的是一对通用荧光引物，无需针对每个SNP位点去合成特异的荧光引物(探针)，具有更好的位点适应性。根据不同基因和基因型，只需要合成普通的PCR特异性扩增引物即可，大大降低研发成本。
