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[发明专利]一种构建融合质粒的方法、融合质粒和用途-CN202111336469.9在审
发明人：李健;巴方;刘晚秋 -专利权人：上海科技大学
申请日： 2021-11-12 - 公布日： 2023-05-16 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域,公开了一种构建融合质粒的方法，由该方法构建的融合质粒和用途。本发明方法利用丝氨酸整合酶催化多质粒融合，在融合体系中，对供体基因、受体基因和丝氨酸整合酶进行孵育，获得所述融合基因。该方法利用丝氨酸整合酶即可实现多种不同质粒的融合，相较于其他分子克隆技术，具有产物得率高，操作过程简单，成本低等优点，同时可以实现环状DNA分子之间的融合以及可堆叠的多轮质粒融合，可以成为一种构建融合质粒的新手段
一种构建融合质粒方法用途

[发明专利]一种pPIC9-ompA-Fc重组质粒、构建方法、在毕赤酵母表达系统中的诱导表达及其应用-CN201610717365.5有效
发明人：朱瑞良;魏凯;胡莉萍;董雯雯;黄河;刘丽萍;李鑫;于翠莲;张浩 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2016-08-24 - 公布日： 2020-07-03 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明提供了一种pPIC9‑ompA‑Fc重组质粒、构建方法、表达及其应用，属于基因工程技术领域，以禽波氏杆菌DNA及以鸡脾脏mRNA为模版合成的cDNA为模版，通过PCR分别获得ompA‑linker基因和鸡IgY‑Fc‑linker基因，再将两份PCR产物进行SOE‑PCR得到ompA‑linker‑Fc融合基因，将融合基因连接至PMD18‑T克隆质粒，连接转化后对重组质粒进行测序，双酶切并连接至表达质粒pPIC9中，将连接产物转化受体菌，最后鉴定阳性转化子，获得pPIC9‑ompA‑Fc融合质粒。本发明成功克隆禽波氏杆菌ompA及鸡IgY Fc，并将两种基因成功融合至表达质粒，实现了重组质粒毕赤酵母高效表达，成本低廉，增强了融合蛋白的活性。
一种 ppic9 ompa fc 重组质粒构建方法酵母表达系统中的诱导及其应用

[发明专利]一种融合蛋白表达质粒载体及其构建方法与应用-CN202310195912.8在审
发明人：王红胜;钟科;黎婕昕;王召同 -专利权人：中山大学
申请日： 2023-03-03 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，公开了一种融合蛋白表达质粒载体及其构建方法与应用。本发明提供的融合蛋白表达质粒载体，通过将MetRS基因与ALKBH3连接得到的MetRS‑ALKBH3融合基因整合到真核表达质粒上，可以靶向特定的tRNA的去甲基化。同时，本发明提供的融合蛋白表达质粒载体可以在真核细胞内进行表达。
一种融合蛋白表达质粒载体及其构建方法应用

[发明专利]多酶偶联定位体系及其构建方法和应用-CN202110550828.4在审
发明人：申晓林;童贻刚;陈昕;周朝;袁其朋;王佳;孙新晓 -专利权人：北京化工大学
申请日： 2021-05-20 - 公布日： 2021-08-17 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明提供了一种多酶偶联定位体系，包括dCas蛋白‑linker‑目标酶融合质粒、引导RNA质粒和DNA支架质粒；所述dCas蛋白‑linker‑目标酶融合质粒在所述引导RNA质粒的引导下锚定在所述DNA支架质粒上。所述dCas蛋白‑linker‑目标酶融合质粒中的目标酶通过linker与dCas蛋白连接。所述目标酶是目标产物生物合成途径中所需的酶。所述DNA支架质粒包含多个dCas结合位点。
多酶偶联定位体系及其构建方法应用

[发明专利]一种细胞内支架，由其构造的质粒及质粒的应用-CN201811365967.4有效
发明人：朱律韵;谢斯思;朱凌云;邱鑫源;朱楚姝;吴小敏;张东裔 -专利权人：中国人民解放军国防科技大学
申请日： 2018-11-16 - 公布日： 2021-07-02 - 主分类号： C12N15/62 文献下载
摘要：本发明公开了一种细胞内支架，由其构造的质粒及质粒的应用，细胞内支架包括DNA支架序列和TALE‑目的分子融合蛋白；DNA支架序列包括结合序列BM1、结合序列BM2和结合序列BM3，TALE‑目的分子融合蛋白包括TALE1‑目的分子融合蛋白、TALE2‑目的分子融合蛋白和TALE3‑目的分子融合蛋白；TALE1‑目的分子融合蛋白结合在结合序列BM1上，TALE2‑目的分子融合蛋白结合在结合序列BM2上，TALE3‑目的分子融合蛋白结合在结合序列BM3上。将DNA支架序列构建在pSB1C3、BBa_J63009或pSB4A5质粒上；将TALE‑目的分子融合蛋白构建至pET28a(+)质粒上，将获得的改造质粒共转化至大肠杆菌中，进行IPTG诱导表达，可应用于甲羟戊酸合成反应中提高甲羟戊酸的产量
一种细胞内支架构造质粒应用

[发明专利]一种同时结合TGFβ和VEGF的双靶点融合蛋白质粒的构建方法-CN202110398534.4在审
发明人：储碧心;王晓宇;傅大莉 -专利权人：中国人民解放军西部战区总医院
申请日： 2021-04-13 - 公布日： 2021-09-14 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及一种能够表达同时靶向TGFβ和VEGF的融合蛋白的质粒的构建方法，步骤如下：设计并构建了融合蛋白、VEGFR‑1、TβR‑II基因和引物合成，PCR扩增；以pCI/Y2质粒为模板，设计引物，PCR扩增获得Fc基因；将Fc基因片段经重组PCR方法获得TF融合基因片段；对TF融合基因片段进行Nhe I和EcoR I双酶切，质粒pIRESpuro3用同一组酶进行双酶切，将两种酶切片段回收后进行连接反应，得到质粒pIRESpuro3/TF；对构建成功的pIRESpuro3/TF质粒进行BspE I和EcoR I双酶切，同时用同一组酶对已得到的融合基因片段进行双酶切，酶切片段回收后进行连接反应，得到质粒本发明构建的质粒瞬转细胞后，得到所需融合蛋白，纯化后经鉴定均有良好的活性和亲和力，为后续研究和开发该类药物用于临床肿瘤治疗奠定了基础。
一种同时结合 tgf vegf 双靶点融合蛋白质粒构建方法

[发明专利]用于检测融合基因的混合基因、标准质粒、试剂盒及其制备方法-CN201810555746.7有效
发明人：曹金良 -专利权人：上海科医联创医学检验所有限公司
申请日： 2018-05-31 - 公布日： 2022-04-22 - 主分类号： C12Q1/6811 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于检测融合基因的混合基因，其基因序列如SEQ ID NO:1所示，包括SEQ ID NO:2的BCR‑ABL融合基因、SEQ ID NO:3的AML‑ETO融合基因、SEQ ID NO:4的PML‑RARA融合基因和SEQ ID NO:5的ABL内参基因；还涉及含有混合基因的标准质粒，包括SEQ ID NO:6的PUC57质粒；还涉及一种含有标准质粒的试剂盒；还涉及一种标准质粒的制备方法其优点在于，能够用于在定量检测人的骨髓或外周血标本中的白血病相关融合基因中BCR‑ABL、RUNX1‑RUNX1T1(AML‑ETO)和PML‑RARA融合基因双标准曲线建立；有效地提高了检测效率及精确度，降低人为操作失误，避免出现多质粒污染；标准质粒的最低检出拷贝数为1*100个/ml；操作简单，不易污染，检测范围大，能够有效降低检测成本。
用于检测融合基因混合标准质粒试剂盒及其制备方法

[发明专利]一种基于间皮素锚定的哺乳动物融合蛋白展示质粒、细胞系及应用-CN202110058337.8有效
发明人：焦顺昌;张嵘;张艳玲;袁翰 -专利权人：北京鼎成肽源生物技术有限公司;焦顺昌
申请日： 2021-01-15 - 公布日： 2021-09-17 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于间皮素锚定的哺乳动物融合蛋白展示质粒、细胞系及应用，属于抗体筛选技术领域，所述哺乳动物融合蛋白展示质粒，包括顺次连接有编码信号肽的基因、编码待筛选蛋白的基因和编码间皮素的基因的融合基因和初始质粒本发明提供的基于间皮素锚定的哺乳动物融合蛋白展示细胞系，将所述哺乳动物融合蛋白展示质粒转入哺乳动物抗体展示细胞获得。本发明提供的基于间皮素锚定的哺乳动物融合蛋白的展示质粒，利用间皮素融合蛋白即可膜上表达又可分泌表达的特性，实现待筛选蛋白在哺乳动物细胞的展示，能够大大提高待筛选蛋白的筛选效率；待筛选蛋白和间皮素形成的融合蛋白表达效率更高
一种基于间皮素锚定哺乳动物融合蛋白展示质粒细胞系应用

[发明专利]体外检测蛋白间相互作用的方法和检测试剂盒及其应用-CN201811388110.4有效
发明人：马聪 -专利权人：香港理工大学深圳研究院
申请日： 2018-11-20 - 公布日： 2023-09-08 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：在细胞外采用双分子萤光互补技术进行检测，包括：S01、构建第一重组质粒，第一重组质粒中包含第一检测蛋白基因、萤光素酶基因片段和蛋白纯化标签基因；然后，将第一重组质粒载体进行过表达，得到第一融合蛋白；第一融合蛋白中含第一检测蛋白和萤光素酶蛋白片段；S02、构建第二重组质粒，第二重组质粒中含第二检测蛋白基因、萤光素酶互补基因片段和蛋白纯化标签基因；将第二重组质粒载体进行过表达，得到第二融合蛋白；第二融合蛋白中含第二检测蛋白和萤光素酶互补蛋白片段；S03、将第一融合蛋白和第二融合蛋白在细胞外孵育，加入萤光素酶底物，观察是否发射萤光，并检测发光强度。
体外检测蛋白相互作用方法试剂盒及其应用

[发明专利]表达鼠疫耶尔森氏菌F1‑V融合蛋白的伤寒沙门氏菌Ty21a及其用途-CN201380038155.8有效
发明人： D·J·埃科;M·奥索里奥;M·R·富特 -专利权人：美国政府（由卫生和人类服务部的部长所代表）
申请日： 2013-05-22 - 公布日： 2017-04-26 - 主分类号： A61K39/02 文献下载
摘要：本文描述了用于表达鼠疫耶尔森氏菌F1‑V融合蛋白的质粒构建体的产生。在所公开的质粒中，所述F1‑V融合蛋白编码序列与大肠杆菌htrA启动子可操作地连接，并且与大肠杆菌HlyA分泌信号序列框内融合。还描述了包含所述F1‑V融合蛋白表达质粒的肠道沙门氏菌血清变型伤寒沙门氏菌菌株Ty21a，例如用作抗鼠疫的口服疫苗。
表达鼠疫耶尔森氏菌 f1 融合蛋白伤寒沙门氏菌 ty21a 及其用途

[发明专利]一种以癸酸为原料利用大肠杆菌工程菌制备10-羟基-2-癸烯酸的方法-CN201910088897.0有效
发明人：苏静;王瑞明;王芬;孙淑慧;汪俊卿;杨晓慧 -专利权人：齐鲁工业大学
申请日： 2019-01-30 - 公布日： 2020-08-04 - 主分类号： C12P7/42 文献下载
摘要：本发明涉及一种利用大肠杆菌工程菌制备10‑羟基‑2‑癸烯酸的方法，步骤如下：(1)构建重组质粒pBbB5K‑P450融合酶、重组质粒pBbB5K‑FadK、重组质粒pBbB5K–MCAD、重组质粒pBbB5K‑YdiI；(2)构建pBbB5K‑ydiI‑MCAD‑FadK‑P450融合酶组合质粒；(3)融合酶组合质粒转化大肠杆菌，经筛选，诱导培养，制得诱导细胞；(4)将诱导细胞经转化培养基培养，制得静息细胞，然后向培养基中加入癸酸
一种癸酸原料利用大肠杆菌工程制备 10 羟基癸烯酸方法

[发明专利]一种皮质抑素生长抑素双表达DNA疫苗及制备方法和应用-CN201510097328.4有效
发明人：杨利国;罗璇;梁爱心;韩丽;董方晓;淡新钢 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2015-03-05 - 公布日： 2018-04-27 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种皮质抑素生长抑素双表达DNA疫苗及制备方法和应用，该疫苗是将合成好的皮质抑素14肽基因片段CST14融合乙肝表面抗原基因的融合基因插入到质粒pIRES上获得pIRES‑S/CST14质粒，再将双拷贝生长抑素14肽的乙肝表面抗原融合基因片段S/2SS插入到质粒pIRES‑S/CST14中，获得皮质抑素生长抑素双表达DNA质粒，将该质粒转化到大肠杆菌DH5a中，获得大肠杆菌(Escherichia将该质粒作为疫苗直接免疫动物或与DNA疫苗佐剂混合后免疫动物，可显著促进动物生长。
一种皮质生长抑素双表达 dna 疫苗制备方法应用

[发明专利]融合猪免疫基因抗感染纳米分子制剂的制备和应用-CN200410040749.5无效
发明人：高荣;武梅;孟民杰;李江凌;王泽洲;吕学斌;李惠;付满良;吴凯源;杨毅;沈翼 -专利权人：四川今朝生物科技有限公司
申请日： 2004-09-27 - 公布日： 2005-11-09 - 主分类号： A61K48/00 文献下载
摘要：本发明公开猪白细胞介素－4、6融合基因抗感染纳米分子制剂的制备和应用技术。融合猪白细胞介素－4、6基因，构建融合基因的真核表达质粒(VPIL46)，用离子交联法制备壳聚糖纳米颗粒分子包装质粒：将质粒溶于三聚磷酸盐溶液，与分子量200000、脱乙酰度95％以上的壳聚糖醋酸液，55℃水浴恒温15min，按比例均匀混合质粒和壳聚糖溶液，得到壳聚糖纳米颗粒包装质粒液，粒径40－60nm，Zeta电位+25.6mv。将此VPIL46质粒纳米颗粒制剂以肌肉注射方式单独或协同疫苗免疫实验动物，可显著提高动物特异和非特异的细胞和体液免疫水平，明显增强试验动物的抗感染免疫保护力，提供了壳聚糖纳米颗粒包装VPIL46质粒作为动物抗感染分子制剂的应用技术
融合免疫基因感染纳米分子制剂制备应用

[发明专利]一种促进动物生长的口服重组DNA疫苗及应用-CN200610125580.2有效
发明人：杨利国;舒邓群;梁爱心 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2006-12-26 - 公布日： 2007-10-10 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明包含一种细胞因子GMCSF的克隆，然后将其融合插入到现有生长抑素质粒pcS/2SS中，得到融合表达质粒pGMCSF－SS，将该融合表达质粒转化到减毒鼠伤寒沙门氏菌中，得到具有促进动物生长的口服重组含有融合表达质粒的鼠伤寒沙门氏菌CSO22/pGMCSF－SS，保藏在CCTCC，其保藏号为CCTCC M206141。
一种促进动物生长口服重组 dna 疫苗应用

[发明专利]一种基于MS2噬菌体研究蛋白相互作用的新方法-CN202110605852.3有效
发明人：欧阳永长;刘捷婧;林小容;陈敏;陈伟烙 -专利权人：广州医科大学
申请日： 2021-06-01 - 公布日： 2021-12-14 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明提供的基于MS2噬菌体研究蛋白相互作用的新方法，将待研究的两个蛋白称作X和Y，将MS2噬菌体REP蛋白拆分成功能互补的2个片段REP‑a和REP‑b，使REP‑a与X融合，REP‑b与Y融合；构建质粒1，包含MS2噬菌体基因组，质粒1的REP编码区由REP‑a与X融合基因片段替换，无REP‑b基因片段；构建质粒2，表达REP‑b与Y融合片段；将质粒1表达的病毒样颗粒(VLPs)侵染含质粒2的MS2噬菌体宿主菌并检查是否有噬菌斑形成
一种基于 ms2 噬菌体研究蛋白相互作用新方法

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