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[发明专利]纯化CR2-crry重组蛋白的制备方法-CN202110915329.0在审
发明人：高谋 -专利权人：高谋
申请日： 2021-08-10 - 公布日： 2021-11-26 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了纯化CR2‑crry重组蛋白的制备方法，涉及重组蛋白制备纯化技术领域，该纯化CR2‑crry重组蛋白的制备方法，包括基因筛选→基因重组→基因克隆→克隆筛选→蛋白表达→蛋白纯化，CR2‑crry重组蛋白作为目的蛋白，纯化包括以下步骤：S1：发酵表达，通过过滤固液分离收集发酵液，浓缩，S2：加入蛋白酶抑制剂，采用PEI沉淀法分开目的蛋白和其他细胞成分，首先在低盐浓度下沉淀核酸以及含有目的蛋白的组分，经过低盐浓度缓冲液的洗杂步骤后，使用高盐缓冲液将目的蛋白从沉淀中复溶，再经过硫酸铵沉淀的方式沉淀目的蛋白，含有的PEI保持在上清液中，最后将沉淀用缓冲试剂复溶得到含有目的蛋白的粗纯样品。解决了CR2‑crry重组蛋白构建和高效纯化的问题。
纯化 cr2 crry 重组蛋白制备方法

[发明专利]一种重组蛋白纯化方法-CN202111520109.4在审
发明人：余剑平;李绍阳;刘洋 -专利权人：佛山汉腾生物科技有限公司;广州汉腾生物科技有限公司;佛山普津生物技术有限公司
申请日： 2021-12-13 - 公布日： 2023-06-16 - 主分类号： C07K1/18 文献下载
摘要：本发明提供了一种重组蛋白纯化方法。所述重组蛋白纯化方法包括如下步骤：获得表达重组蛋白的宿主细胞的培养上清液；将获得的培养上清液依次经过阳离子交换层析、阴离子交换层析、疏水相互作用层析，得到纯化的重组蛋白。本发明提供的纯化方法无需使用蛋白A柱，可以制备出高纯度、高质量的重组蛋白。
一种重组蛋白纯化方法

[发明专利]α螺旋自组装短肽及其在蛋白质纯化中的应用-CN201811557416.8有效
发明人：林章凛;仙丹华;杨晓锋;赵镭;王胥;周碧红 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2018-12-19 - 公布日： 2022-03-29 - 主分类号： C07K14/00 文献下载
摘要：本发明公开了α螺旋自组装短肽及其在蛋白质纯化中的应用，属于基因工程领域。该α螺旋自组装短肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示。将该α螺旋自组装短肽与目的蛋白形成的融合蛋白在宿主细胞内表达后形成有活性的聚集体，通过表达所述融合蛋白来生产和纯化目的蛋白。本发明的α螺旋自组装短肽可以诱导融合蛋白形成大量的有活性的蛋白聚集体，纯化得到的目的蛋白产量和纯度都很高，而且该纯化方法对设备要求低，不需要纯化柱，生产成本低，操作简便，可应用于蛋白质的生产和纯化中。
螺旋组装及其蛋白质纯化中的应用

[发明专利]用于表达、纯化小肽的双标签重组蛋白及其制备方法和应用-CN202211564784.1在审
发明人：王朝;高甜甜 -专利权人：中国科学技术大学
申请日： 2022-12-07 - 公布日： 2023-03-03 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于表达、纯化小肽的双标签重组蛋白及其制备方法和应用，属于重组蛋白技术领域，这种双标签重组蛋白包括纯化标签、目的蛋白、于目的蛋白的一端依次连接的第一蛋白酶切位点和第一促溶标签、以及于目的蛋白的另一端依次连接的第二蛋白酶切位点、第二促溶标签；通过构建双标签重组蛋白表达载体，制备双标签重组蛋白，应用于小肽的表达、纯化，以解决蛋白质体外可溶性表达时，结构简单的小肽序列在体外易降解，不易被纯化的问题。本发明适用于易降解小肽的体外表达纯化。
用于表达纯化标签重组蛋白及其制备方法应用

[实用新型]一种蛋白纯化简易操作装置-CN202022120394.8有效
发明人：曹守林;王蓓;张毅 -专利权人：合肥科荣生物科技有限公司
申请日： 2020-09-24 - 公布日： 2021-07-13 - 主分类号： C07K1/14 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种蛋白纯化简易操作装置，包括纯化箱体，所述纯化箱体的上表面固定连接有上料漏斗，所述纯化箱体的内顶壁固定连接有下料管，所述纯化箱体的内部设置有粗分离罐，所述粗分离罐的下表面固定连接有分料漏斗，所述分料漏斗的下表面固定连接有出料管，所述出料管的表面设置有流速控制阀，所述出料管远离分料漏斗的一端固定连接有精细纯化筒，所述纯化箱体的内壁固定连接有横板。该蛋白纯化简易操作装置，通过设置上料漏斗，便于把需要纯化的蛋白质投入到纯化箱体内，通过设置下料管，便于把蛋白质输送到粗分离罐内，通过设置粗分离罐，能够对需要纯化的蛋白质进行沉淀和过滤，从而达到初步纯化的效果
一种蛋白纯化简易操作装置

[发明专利]一种CTLA4-Ig融合蛋白的纯化方法-CN201811640263.3有效
发明人：白义;孙宇石 -专利权人：北京东方百泰生物科技有限公司
申请日： 2018-12-29 - 公布日： 2020-02-07 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明涉及生物医药领域，具体提供了一种CTLA4‑Ig融合蛋白的纯化方法，所述纯化方法包括：发酵液预处理、亲和层析及复合型阴离子交换层析。本发明提供的方法通过亲和层析和复合型阴离子交换层析两步即可完成对CTLA4‑Ig融合蛋白的纯化，而且能够兼顾活性、纯度、得率三个维度，亲和层析用于捕获融合蛋白，复合型阴离子交换层析用于精细纯化蛋白，最终获得质量合格的CTLA4‑Ig融合蛋白，该方法相对现有技术提供的纯化方法而言，简化了纯化工艺，缩短了纯化时间，在最适宜的实验条件下结合实验操作方法获得了产率较高的活性融合蛋白，大大节省了纯化成本。
融合蛋白阴离子交换层析亲和层析发酵液预处理活性融合蛋白生物医药领域纯化蛋白结合实验实验条件产率得率维度捕获精细

[发明专利]发酵液中猪肌红蛋白的分离纯化方法-CN202110558529.5有效
发明人：赵鑫锐;张博涵;周景文;堵国成;李江华;陈坚;钱源 -专利权人：江南大学;江苏东汇生物科技有限公司
申请日： 2021-05-21 - 公布日： 2022-09-30 - 主分类号： C07K14/805 文献下载
摘要：本发明公开了发酵液中猪肌红蛋白的分离纯化方法，属于生物技术领域。本发明通过在发酵液中创造性地分步添加不同浓度的硫酸铵，对表达猪肌红蛋白的重组毕赤酵母的发酵液进行浓缩，并对其进一步超滤浓缩，并对浓缩液进行纯化得到的肌红蛋白纯度达88.04％，纯化率可达66.05％，实现了从发酵液中纯化猪肌红蛋白，解决了之前猪肌红蛋白发酵液难以纯化的问题，并实现了猪肌红蛋白发酵液的高效纯化。本发明的分离纯化方法特异性高，操作条件温和，步骤简洁，纯化效果好，回收率高，成本低，速度快，益于扩大生产。
发酵液中猪肌红蛋白分离纯化方法

[实用新型]低温重力型蛋白纯化箱-CN201621156697.2有效
发明人：岳路明;莫蓓莘;宋剑波;杨海奇;莫小为 -专利权人：深圳大学
申请日： 2016-10-25 - 公布日： 2017-04-19 - 主分类号： C07K1/16 文献下载
摘要：一种低温重力型蛋白纯化箱，包括主体箱，其特点是本箱还包括上样槽、上样管、蛋白纯化柱、温度计和集液器，上样槽位于主体箱上部，上样槽和主体箱相应位置分别开有贯穿孔，上样管的下端穿过该孔与蛋白纯化柱连接，上样管上安装有截止阀该纯化箱与传统的室温纯化方法相比，可以为蛋白纯化提供一个低温洁净的蛋白纯化环境，保证了蛋白的活性，另外可以控制样品流速，提高了蛋白纯化的效率。其操作简便，造价便宜，对样品的要求较低。
低温重力蛋白纯化

[发明专利]一种同步纯化脂肪酶、酸性蛋白酶和碱性蛋白酶的方法-CN202210317561.9在审
发明人：刘影;包洲;刘钟文 -专利权人：江苏悠恒生物技术有限公司
申请日： 2022-03-29 - 公布日： 2022-06-10 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：本发明涉及蛋白纯化技术领域，且公开了一种同步纯化脂肪酶、酸性蛋白酶和碱性蛋白酶的方法，该方法采用硫酸铵盐析以及Q Beads 6FF阴离子层析来进行三种蛋白的纯化，该蛋白纯化技术通过下述步骤进行：通过硫酸铵盐析的方法确定三种蛋白析出时所对应的硫酸铵饱和度；将50％硫酸铵盐析出的蛋白与50％硫酸铵除杂后补至80％硫酸铵盐析出的蛋白分别上柱于QBeads 6FF阴离子交换柱，再用50‑400mM的NaCl溶液洗脱，收集各组分的洗脱液，进行蛋白浓度和酶活的测定；本发明所述的同步纯化脂肪酶、酸性蛋白酶和碱性蛋白酶的方法，最终使得脂肪酶纯化倍数提高63.24倍，酸性蛋白酶10.33倍，碱性蛋白酶31.69倍。
一种同步纯化脂肪酶酸性蛋白酶碱性方法

[发明专利]绿色荧光蛋白融合蛋白免疫亲和柱的制备方法、免疫亲和柱及其运用-CN202010199363.8在审
发明人：方卫斌;张海灵 -专利权人：天德瑞（北京）生物科技有限公司
申请日： 2020-03-20 - 公布日： 2020-08-11 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种绿色荧光蛋白融合蛋白免疫亲和柱的制备方法，其包括如下步骤：S1、制备N个绿色荧光蛋白单克隆抗体，N为正整数；S2、针对每一所述绿色荧光蛋白单克隆抗体制备与其对应的免疫亲和柱，以获得N个免疫亲和柱；以及S3、运用N个免疫亲和柱中的一个或多个对同一绿色荧光蛋白融合蛋白进行纯化，选取纯化效果达到预期值的免疫亲和柱作为目标绿色荧光蛋白融合蛋白免疫亲和柱。其运用多个免疫亲和柱对同一绿色荧光蛋白融合蛋白进行纯化，选取纯化效果达到预期值的免疫亲和柱作为目标绿色荧光蛋白融合蛋白免疫亲和柱，再通过该目标绿色荧光蛋白融合蛋白免疫亲和柱对绿色荧光蛋白融合蛋白进行纯化，以提高纯化效率和效果。
绿色荧光蛋白融合免疫亲和制备方法及其运用

[实用新型]一种蛋白纯化装置-CN201822071918.1有效
发明人：吴杰;曲璟秋 -专利权人：遵义市第一人民医院
申请日： 2018-12-11 - 公布日： 2019-07-23 - 主分类号： G01N1/34 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种蛋白纯化装置包括支架、加样管、蛋白纯化柱和收集管；支架包括竖直杆以及由上到下依次设置的第一平板、第二平板和底座；在竖直杆上还设有两个调节部件，分别用于支撑第一平板和第二平板；加样管、蛋白纯化柱和收集管分别安装在第一平板、第二平板和底座；蛋白纯化柱包括柱体、第一盖体和导流部件；柱体内装有填料层和过滤层；导流部件的下表面沿竖直方向的投影可完全覆盖填料层的上表面；且导流部件的下表面设有均匀分布的出液孔；纯化蛋白时，液体由加样管落入蛋白纯化柱，经导流部件后，依次经出液孔、填料层、过滤层和蛋白纯化柱的出液口，落入收集管中。本实用新型具有蛋白纯化效果好、操作简单便捷等优点。
蛋白纯化柱导流部件加样管收集管填料层蛋白纯化装置本实用新型出液孔过滤层竖直杆下表面支架底座纯化蛋白蛋白纯化第一盖体依次设置由上到下出液口上表面竖直柱体投影体内支撑

[发明专利]纯化PEG修饰重组人干扰素β1b蛋白的方法-CN202310325840.4有效
发明人：杨云凯;马昱;刘明;周玉;韩凝;霍元子 -专利权人：北京生物制品研究所有限责任公司
申请日： 2023-03-30 - 公布日： 2023-06-27 - 主分类号： C07K14/565 文献下载
摘要：本发明涉及一种纯化PEG单修饰的干扰素β蛋白的方法，更具体而言，涉及一种纯化PEG单修饰的人干扰素β1b蛋白的方法，以及用该方法获得的蛋白纯化产品。所述方法能够实现PEG单修饰的β干扰素蛋白与游离PEG、未修饰的蛋白、多点修饰的蛋白及其他杂质的有效分离，从而获得纯度高、游离PEG残余量低、氰基硼氢化钠残余量低的PEG单修饰蛋白纯化产品。
纯化 peg 修饰重组干扰素蛋白方法

[发明专利]一种分离纯化重组LEA蛋白的方法及试剂盒-CN201910745136.8在审
发明人：王建业;章志国;罗桂英;朱孔福;沈兵;曹云霞 -专利权人：安徽医科大学第一附属医院
申请日： 2019-08-13 - 公布日： 2019-11-19 - 主分类号： C12P21/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种分离纯化重组LEA蛋白的方法及试剂盒，本发明通过盐析去除杂蛋白、采用Ni‑NTA柱亲和层析分离纯化重组LEA蛋白，省去了复杂分子筛的纯化步骤，提高了制备效率，缩短了纯化时间，降低了制备成本本发明大幅提高了LEA蛋白分离产量，并保持了LEA蛋白结构完整性以确保在应用中应有的蛋白活性。
分离纯化制备分子筛结构完整性去除杂蛋白柱亲和层析蛋白活性试剂盒盐析应用

[发明专利]一种野生型p53蛋白的分离纯化方法-CN201010144752.7无效
发明人：王佳 -专利权人：复旦大学
申请日： 2010-04-09 - 公布日： 2011-10-12 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明属于生物医药制品以及临床检测等相关领域，主要涉及一种野生型p53蛋白分离纯化的新方法。本发明的野生型p53蛋白的分离纯化方法，包括p53基因的克隆、构建重组表达质粒和蛋白诱导表达及纯化，基于原核系统诱导表达，超声裂解菌体，利用镍柱亲和层析来分离纯化所得裂解上清中的p53蛋白。本发明从原核系统诱导表达，超声裂解的菌体上清中利用镍柱亲和层析来分离纯化得到较大浓度的活性目的蛋白。本发明中没有进行包涵体的变性和复性，而是直接从超声裂解的上清中纯化蛋白，使得目的蛋白的活性得到了最大程度的保持，并通过优化诱导表达以及纯化方案使得目的蛋白的得率较之现有方法也有了较大的提高。
一种野生型 p53 蛋白分离纯化方法

[发明专利]一种虾致敏蛋白pena1提取纯化方法-CN201410004632.5有效
发明人：张弛;潘家荣;赵洁;张勇勇;陆高翔 -专利权人：中国计量学院
申请日： 2014-01-06 - 公布日： 2014-04-30 - 主分类号： C07K14/435 文献下载
摘要：一种虾致敏蛋白pena1提取纯化方法，属于蛋白分离纯化方法的技术领域。其包括以下工艺步骤：1）制备虾肉丙酮粉；2）抽提虾过敏蛋白；3）硫酸铵分级沉淀；4）等电点沉淀；5）DEAE52阴离子交换层析；6）SephadexG-100凝胶层析；7）免疫亲和层析。本发明首次采用致敏蛋白的表位抗体制备免疫亲和柱来纯化致敏蛋白，该方法对于表位序列已知的致敏蛋白的纯化快速简便，且可很好的保持致敏蛋白的免疫活性，对于致敏蛋白的纯化具有重要的借鉴意义。
一种虾致敏蛋白 pena1 提取纯化方法