本发明涉及一种温敏多肽,包括多个短肽重复单元,每个所述短肽重复单元的序列如SEQ ID NO:1所示;还涉及该温敏多肽的编码基因;还涉及带有该温敏多肽编码基因作为纯化标签的蛋白表达载体;还涉及该蛋白表达载体的制备方法;还涉及一种蛋白纯化方法。本发明合成的温敏多肽具有可逆相变特性,可通过可逆相变循环过程实现多肽分子的分离纯化。以温敏多肽作为标签赋予融合蛋白表现出可逆相变性质,开发简单快捷、纯化成本低、回收效率高、适用范围广的蛋白质分离纯化方法。
本发明提供了一种桦树花粉主要致敏蛋白Bet v 8的提取和分离纯化方法及应用。所述Bet v 8的提取方法包括使用pH 4.5的醋酸盐缓冲液作为提取液对桦树花粉致敏蛋白进行提取,所述的分离纯化方法包括先制备桦树花粉水溶蛋白提取液,随后通过阳离子交换层析和Con A琼脂糖凝胶4B层析进一步分离纯化,最终获得纯化的主要致敏蛋白Bet v 8。本发明所制备的提取液或纯化蛋白可用于患者血清样品中主要致敏蛋白的检测,同时还可进一步制备成过敏原检测试剂或脱敏制剂,在提高桦树花粉的皮试阳性率及脱敏疗效方面具有广泛应用。