本发明涉及毕赤酵母技术领域，具体为一种制备表面展示果糖基转移酶的毕赤酵母的方法，步骤1：合成改良的果糖基转移酶基因与毕赤酵母锚定蛋白基因的融合序列，且融合后的基因加载体同源臂序列如SEQ ID No.4或SEQID No.7所示；步骤2：构建毕赤酵母表达载体，将融合序列与酶切线性化的毕赤酵母表达载体连接或重组，得到的重组表达载体；步骤3：转化毕赤酵母,将构建好的重组表达载体转化入毕赤酵母感受态细胞中；步骤4：筛选多拷贝阳性克隆，通过高抗筛选出含有多拷贝融合基因的阳性毕赤酵母菌；步骤5：通过甲醇诱导表达后得到表面展示果糖基转移酶的毕赤酵母。本发明的毕赤酵母可以重复利用，制作成本低。
