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[发明专利]一种电喷雾质谱中多磷酸化位点肽段的检测和鉴定方法-CN200610134982.9无效
发明人：张丽华;王晖;段继诚;丛永正;张维冰;梁振;张玉奎 -专利权人：中国科学院大连化学物理研究所
申请日： 2006-12-22 - 公布日： 2008-06-25 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明涉及磷酸化肽的检测方法，具体地说是一种电喷雾质谱中多磷酸化位点肽段的检测和鉴定方法。利用磷酸酶对磷酸化肽进行处理，通过控制磷酸化肽的去磷酸化程度，将处理后的样品与未处理的样品分别进入电喷雾质谱中进行分析和比较。从而测定磷酸化肽段，并确定其磷酸化位点。本发明的优点为：可作为一种电喷雾质谱中初步判断多磷酸化肽段存在的方法；可提高多磷酸化肽段的质谱响应信号和检出率；通过控制反应条件能够推测多磷酸化肽段的磷酸化位点，并可作为一种多级质谱分析的验证方法；方法简单
一种喷雾质谱中多磷酸化位点肽段检测鉴定方法

[发明专利]磷酸化肽段富集的方法、检测和定量的方法-CN201910350948.2在审
发明人：秦钧;汪宜;丁琛;石文昊;宋雷;王钰珅;李恺;刘明伟 -专利权人：北京谷海天目生物医学科技有限公司
申请日： 2019-04-28 - 公布日： 2019-08-16 - 主分类号： C07K1/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种磷酸化肽段富集的方法、检测和定量的方法。其中，磷酸化肽段富集的方法包括蛋白质组样本的裂解、酶解和基于二氧化钛的磷酸化肽段富集的步骤，其中，蛋白质组样本的裂解、酶解后得到的溶液中包含磷酸化肽段和非磷酸化肽段，磷酸化肽段和非磷酸化肽段之和为总肽段，在基于二氧化钛的磷酸化肽段富集的步骤中二氧化钛与总肽段的质量比例为10～100:1。微量样本的应用使得初始肽段需求降至微克级别，扩展了可以检测的样本范围。进一步的，应用脱氧胆酸钠裂解液高效裂解组织或者细胞，结合二氧化钛对磷酸化肽段进行富集，最后应用高效液质联用系统进行单组分检测和定量，可以高效快速的在微量样本中富集和定量磷酸化肽段。
磷酸化肽段富集肽段二氧化钛裂解样本蛋白质组非磷酸化微量样本酶解检测应用脱氧胆酸钠高效快速联用系统组分检测高效液裂解液细胞

[发明专利]一种分离富集磷酸化肽的方法-CN200610047124.0无效
发明人：邹汉法;周厚江;叶明亮;封顺 -专利权人：中国科学院大连化学物理研究所
申请日： 2006-07-05 - 公布日： 2008-01-09 - 主分类号： G01N30/08 文献下载
摘要：本发明涉及磷酸化肽的分离富集，具体地说是一种磷酸化肽的高选择性、特异性的富集和纯化方法，将磷酸酯锆固载于载体表面用于磷酸化肽的富集和纯化。该方法基于磷酸酯锆与磷酸化肽之间的相互作用；磷酸酯锆可以固载在芯片表面，也可以固载在色谱基质上来实现磷酸化肽的分离和富集。所述的方法有很高的特异性，可用于生物样品中低丰度磷酸化肽段的纯化和富集。
一种分离富集磷酸化方法

[发明专利]一种表面固定双金属离子的磁性纳米材料的制备及应用-CN201711342636.4在审
发明人：李嫣;江洁冰;孙雪妮;佘晓健;李佳佳 -专利权人：复旦大学
申请日： 2017-12-14 - 公布日： 2019-07-02 - 主分类号： C07K1/14 文献下载
摘要：本发明将两种金属离子同时固定在聚多巴胺包裹的磁性纳米结构材料表面，并以此为固相萃取材料，从蛋白酶解液中富集磷酸化肽，利用双金属离子对单磷酸化肽和多磷酸化肽富集的互补偏向性，实现对磷酸化肽的全面检测。本发明方法操作简单便捷，可以快速、高效地实现单磷酸化肽及多磷酸化肽的富集及质谱分析。
磷酸化肽双金属富集离子磁性纳米材料多磷酸化肽表面固定制备磁性纳米结构分析化学技术固相萃取材料蛋白酶解液金属离子聚多巴胺全面检测质谱分析偏向性应用

[发明专利]一种富集磷酸肽或磷酸化蛋白质的开管毛细管柱及方法-CN200810211727.9无效
发明人：钱小红;张养军;薛彦峰;卫军营 -专利权人：中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所
申请日： 2008-09-23 - 公布日： 2010-03-31 - 主分类号： G01N1/40 文献下载
摘要：本发明涉及一种功能化修饰的开管毛细管柱离线及在线富集磷酸肽或磷酸化蛋白质的方法：制备一种内壁具有可选择性吸附磷酸肽或磷酸化蛋白质的磷酸锆功能基团的开管毛细管柱，负载样品后可以对磷酸肽或磷酸化蛋白质进行富集，再利用清洗缓冲液除去非磷酸肽或非磷酸化蛋白质和盐，清洗完成后利用洗脱液对磷酸肽或磷酸化蛋白质进行洗脱，洗脱的磷酸肽或磷酸化蛋白质可点在MALDI靶上，进行正常的MALDI-TOF-MS分析。也可以接在微升或纳升级LC-ESI-MS的液相部分上，结合ESI-MS/MS自动在线富集分析磷酸肽或磷酸化蛋白质。
一种富集磷酸磷酸化蛋白质毛细管方法

[发明专利]一种双钛功能化磁性纳米材料分离富集磷酸化肽的方法-CN201811254427.9有效
发明人：邓春晖;王嘉雯;王紫丹;孙念荣 -专利权人：复旦大学
申请日： 2018-10-26 - 公布日： 2022-01-28 - 主分类号： C07K1/22 文献下载
摘要：本发明提出一种双钛功能化磁性纳米材料特异性分离富集磷酸化肽的方法，双钛功能化磁性纳米材料借助超声作用分散于磷酸化肽上样液中，37℃下孵育10‑60分钟，用磷酸化肽上样液充分洗涤，以体积比0.5‑20%氨水作为洗脱液本发明通过控制磁性二氧化钛/钛离子功能化材料的合成条件实现对单磷酸化肽段和多磷酸化肽段的富集均取得良好的效果，结合色谱质谱技术能够实现大规模鉴定蛋白质磷酸化位点，从而建立特定疾病的磷酸化位点数据库，为众多与蛋白质磷酸化相关的疾病研究提供数据支持以及思路启发
一种功能磁性纳米材料分离富集磷酸化方法

[发明专利]一种磷酸化肽富集材料及其制备方法与应用-CN201611019827.2有效
发明人：孙涛垒;梁鑫淼;卿光焱;李秀玲;陆琦;姜舸 -专利权人：武汉理工大学;中国科学院大连化学物理研究所
申请日： 2016-11-18 - 公布日： 2019-01-04 - 主分类号： C08F220/54 文献下载
摘要：本发明提供一种磷酸化肽富集材料及其制备方法与应用。该磷酸化肽富集材料包括基底及形成于基底表面的双组分共聚物层，双组分共聚物层的厚度为10‑80nm。本发明将该材料与柱固相萃取模式或分散固相萃取模式有机的结合可实现复杂混合物中磷酸化肽高选择性、高重复性和高通量地富集，从而实现多磷酸化肽和单磷酸化肽的选择性富集，可显著提高磷酸化蛋白鉴定数目。因此，其有望在磷酸化肽富集，进而大规模分离磷酸化蛋白等方面获得广泛的应用。
磷酸化肽组分共聚物富集材料固相萃取基底表面富集制备分析化学原子转移自由基聚合反应应用有机化学领域多磷酸化肽复杂混合物磷酸化蛋白选择性富集表面引发分离磷酸高选择性高重复性高通基底接枝蛋白

[发明专利]一种用于监测磷酸化蛋白质组学中磷酸化肽段富集过程的方法-CN202310585540.X在审
发明人：张宝;陈亮宇;李捷 -专利权人：谱天（天津）生物科技有限公司
申请日： 2023-05-23 - 公布日： 2023-08-29 - 主分类号： G16B40/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于监测磷酸化蛋白质组学中磷酸化肽段富集过程的方法，包括以下步骤：1)设置至少两组外源肽段参考品，每组外源肽段参考品至少包含三条含有不同磷酸化修饰位点的肽段，并且对于每一组中每种肽段，在其他各组中均有序列一致，但是同位素标记不同的对应肽段；2)在样品处理过程中，在不同的时间点加入上述不同的外源肽段参考品，且任意两组外源肽段参考品加入的时间点之间，均包括磷酸化肽段富集的步骤；3)进样检测，提取处理数据，定量外源肽段参考品，计算不同磷酸化修饰肽段的得率比值，以此评价两个外源肽段参考品加入时间点之间的磷酸化富集过程是否合格。该方法能有效评价磷酸化肽段富集效率。
一种用于监测磷酸化蛋白质组学中富集过程方法

[发明专利]一种肝磷酸化肽的制备方法、肝磷酸化肽、抗氧化肉制品及制备方法-CN202110067352.9有效
发明人：李思宁;唐善虎;夏佳军;蔡寅川 -专利权人：西南民族大学
申请日： 2021-01-19 - 公布日： 2022-09-06 - 主分类号： A23J3/34 文献下载
摘要：本发明涉及一种肝磷酸化肽的制备方法、肝磷酸化肽、抗氧化肉制品及制备方法，属于食品加工技术领域。本发明所述肝磷酸化肽的制备方法，包括以下步骤：将牦牛肝泥与磷酸盐缓冲液混合，加入蛋白酶K，恒温酶解，加入碱性蛋白酶，恒温酶解，灭酶，离心取上清，干燥，得到肝蛋白肽；将肝蛋白肽溶解于Tris‑HCl溶液，得到肽溶液，将肽溶液与复合磷酸盐混合，干燥，得到肝磷酸化肽。基于本发明肝磷酸化肽制备得到的肉制品能更好地抵抗氧自由基攻击；且在贮藏过程中色泽稳定、抗氧化效果明显。
一种磷酸化制备方法氧化肉制品

[发明专利]一种铀中毒时作为铀促排剂的磷酸化五肽-CN202011209424.0有效
发明人：李希建;唐伟;陈春;褚健;于立冰;熊忠华;夏斌元;李文靖 -专利权人：中国工程物理研究院材料研究所
申请日： 2020-11-03 - 公布日： 2022-04-29 - 主分类号： C07K7/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种铀中毒时作为铀促排剂的磷酸化五肽，该磷酸化五肽的序列为：Tyr‑pThr‑Pro‑Thr‑pTyr，其中，p表示磷酸化；且该磷酸化五肽的结构式为：本发明设计的磷酸化五肽属于短直链多肽并且作为铀酰离子的螯合剂，相比现有技术来说，该种磷酸化五肽具有良好的生物相容性，在铀元素促排方面有更好的应用前景。
一种中毒作为铀促排剂磷酸化

[发明专利]一种同时富集磷酸化肽段和糖基化肽段并质谱分析的方法-CN201310025887.5有效
发明人：陆豪杰;张莹;杨芃原 -专利权人：复旦大学
申请日： 2013-01-23 - 公布日： 2014-07-23 - 主分类号： G01N27/62 文献下载
摘要：本发明属蛋白质分析领域，涉及富集磷酸化肽和糖基化肽的方法，具体涉及一种利用氨基修饰的磁性纳米材料同时选择性富集磷酸化肽和糖基化肽的新方法。本发明通过一锅法合成了氨基修饰的磁性纳米材料Fe₃O₄@NH₂，利用磁性材料Fe₃O₄和磷酸化肽之间的螯合作用以及材料表面带正电的氨基和带负电的磷酸肽之间的静电作用，实现磷酸化肽段的选择性富集；利用磁性纳米材料表面氨基的亲水性实现糖肽的选择性富集；进一步实现磷酸化肽段和糖基化肽段的同时富集和质谱分析。本发明方法步骤简单、操作方便、快速高效，可以实现磷酸化肽和糖基化肽的同时高灵敏质谱分析。
一种同时富集磷酸化糖基化肽段谱分析方法

[发明专利]一种水稻全生长期磷酸化蛋白质组数据库建立及定量方法-CN201911367474.9在审
发明人：方后琴;王方娜;徐燕;沈珈西;张岩;舒烈波 -专利权人：上海鹿明生物科技有限公司
申请日： 2019-12-26 - 公布日： 2020-04-17 - 主分类号： G01N30/88 文献下载
摘要：本发明公开了一种水稻全生长期磷酸化蛋白质组数据库建立及定量方法，包括：1)将幼年期及成熟期的水稻地上部分分别进行蛋白提取及酶解，得到两类酶解肽段；2)将部分两类酶解肽段等量混合后进行色谱分离，再进行磷酸化肽段富集；部分两类酶解肽段分别直接进行磷酸化肽段富集；3)对分离后富集的磷酸化肽段通过DDA模式采集原始数据并建立相应的DDA数据库；对直接富集的磷酸化肽段通过DIA模式采集原始数据并用DDA数据库搜库。本发明建立了水稻全生长期磷酸化蛋白的DDA数据库，可作为参考数据库提供比对信息；开发了水稻磷酸化蛋白的DIA分析方法，具有高通量、高准确性、高重复性等特点，广泛适用于生物磷酸化蛋白质组数据库建立及其精确定量
一种水稻生长期磷酸化蛋白质数据库建立定量方法

[发明专利]一种用于磷酸化肽的富集材料制备方法及应用-CN202210084147.8在审
发明人：张虹;卢延斌;张鹏 -专利权人：杭州惟宸生物科技有限公司
申请日： 2022-01-21 - 公布日： 2022-04-19 - 主分类号： C08F120/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于磷酸化肽的富集材料制备方法及应用，首先采用分子对接、计算机模拟的方法，针对待富集的特异性磷酸化多肽，考虑模板化合物对pH值、温度的稳定性，印迹聚合物形成时间和空间立体结构等因素的影响，虚拟合成磷酸化肽富集分子印迹材料，以此选择最佳的模版化合物；以选择出具有特异性磷酸化蛋白、肽模板化合物作为模板，甲基丙烯酸为功能单体，应用分子印记技术结合微波辅助合成方法，制备与模板化合物所对应的分子印迹纳米颗粒、磁性分子印记纳米颗粒；将制备的磷酸化肽的富集纳米材料，用于血清样品中的特异性磷酸化蛋白、肽的富集提取，并将其应用于质谱法定性、定量检测血清中的特异性的特异性磷酸化蛋白、肽中。
一种用于磷酸化富集材料制备方法应用

[发明专利]一种磷酸化肽的吸附富集方法、添加剂及其应用-CN201410324050.5有效
发明人：訾金;张朝良;林梁 -专利权人：深圳华大基因研究院
申请日： 2014-07-09 - 公布日： 2017-04-12 - 主分类号： C07K1/22 文献下载
摘要：本申请公开了一种磷酸化肽的吸附富集方法。本申请的吸附富集方法包括(1)将非特异吸附抑制剂和部分待检样品添加到上样缓冲液，采用富集过滤柱进行磷酸化吸附富集；(2)收集富集产物，计算20种氨基酸在非磷酸化肽中丰度，作第一丰度，计算非磷酸肽所在蛋白质中20种氨基酸的丰度，作第二丰度，第一丰度比第二丰度，选比值较高的至少一种氨基酸为添加剂；(3)采用加入添加剂的上样缓冲液，对待检样品进行磷酸化肽吸附富集。本申请，运用氨基酸与多肽的竞争吸附作用，减小非磷酸化肽的吸附，增加磷酸化多肽富集的吸附选择性，为提高磷酸化检测的准确性和稳定性奠定基础。
一种磷酸化吸附富集方法添加剂及其应用

[发明专利]一种磷酸化肽段富集试剂盒及富集方法-CN201711395960.2有效
发明人：阮宏强;陈薇 -专利权人：上海中科新生命生物科技有限公司
申请日： 2017-12-21 - 公布日： 2020-11-06 - 主分类号： G01N1/40 文献下载
摘要：本发明提供一种磷酸化肽段富集试剂盒及其富集方法，属于蛋白质肽段富集技术领域，其通过二氧化钛填料高度特异性地结合肽段上磷酸化基团的特性对蛋白质酶解产物中的磷酸化肽段进行富集，同时优化实验条件和缓冲试剂，能够快速地实现大规模的磷酸化肽段富集，它具有检测灵敏度较高，特异性较强，数据分析结果准确等优点，该试剂盒可广泛适用于蛋白质及多肽类的磷酸化修饰位点确证。
一种磷酸化富集试剂盒方法

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