本发明提供了一种核酸分子、同源重组载体、转基因动物及其构建方法以及动物体内细胞标记方法，核酸分子具有这样的特征，包括：5’同源臂、3’同源臂以及位于5’同源臂和3’同源臂之间的融合蛋白编码序列，其中，融合蛋白编码序列记作DreER，其核酸序列如SEQ ID NO:1第3067‑5076位核苷酸所示，5’同源臂核酸序列如SEQ ID NO:1第1‑3000位核苷酸所示，3’同源臂核酸序列如SEQ ID NO:1第5968Vgll4‑DreER通过同源重组技术切除报告基因小鼠(如R26‑rRFP小鼠)中两个同向rox序列之间的STOP序列来永久标记VGLL4阳性的细胞。
本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种斜生栅藻叶绿体同源重组空载体及其应用。载体包括上下游同源臂，以及同源臂间设启动子和终止子，启动子和终止子之间插入与至少一个外源基因构成的多顺反子结构的SEQ ID NO:6所示的碱基序列；其中，上游同源臂含SEQ ID NO:1所示碱基序列，下游同源臂含SEQ ID NO:2所示碱基序列。采用本发明的斜生栅藻叶绿体同源重组空载体可实现多个外源基因在叶绿体中稳定表达。
本发明提供了一种表达eGFP的同源重组载体，属于基因组编辑技术领域，所述表达eGFP的同源重组载体包括载体骨架和插入片段，所述插入片段包括左同源臂、CMV启动子、eGFP表达框和右同源臂；所述左同源臂的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；所述右同源臂的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明中所述同源重组载体与CRISPR/Cas9打靶载体共转染非洲绿猴胚胎肾上皮细胞后，通过G418筛选，得到定点整合eGFP并稳定表达eGFP的非洲绿猴胚胎肾上皮细胞。
本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种普通小球藻叶绿体同源重组空载体及其应用。重组空载体包括上下游同源臂，以及同源臂间设至少一个启动子和终止子，启动子和终止子之间插入与至少一个外源基因构成多顺反子结构的SEQ ID NO:7所示的碱基序列；其中，上游同源臂含SEQ ID NO:1所示碱基序列，下游同源臂含SEQ ID NO:2所示碱基序列。
本发明公开了一种蛋白核小球藻叶绿体转基因系统及其应用，所述蛋白核小球藻叶绿体转基因系统包含SEQ ID NO:1所示核苷酸序列中不小于1000bp的连续片段作为上游同源臂和下游同源臂，及插入上游同源臂和下游同源臂之间的启动子本发明利用来源于蛋白核小球藻非光依赖性叶绿素酸酯氧化还原酶DPOR的基因(chlL)的序列片段作为上下游同源重组片段，成功构建了蛋白核小球藻的叶绿体转基因系统，转化载体可以将外源基因导入蛋白核小球藻叶绿体
