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- [发明专利]一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶酶活的检测方法-CN202011040466.6在审
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张劲楠;楼志华;丁红辉;刘翔
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江苏省奥谷生物科技有限公司
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2020-09-28
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2020-12-04
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C12Q1/533
- 本发明公开了一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶酶活的检测方法,所述方法包括:以廉价易得的麦芽糊精为底物,通过控制底物DE值、底物溶液浓度、反应酶浓度、底物和待测酶液的加量比例、DNS反应体系等,进而简便、廉价且稳定地检测MTSase酶活。结果显示:控制底物DE值在5~20;底物溶液浓度在3%~5%;MTSase浓度在0.075~0.125U/mL;底物和待测酶液加量比例为1:(0.5~1);DNS反应体系为10、25或50mL均可较为稳定、准确地检测MTSase酶活,能获得重复性较强的检测结果。本发明可以应用于MTSase存在且与底物正常反应的前提下检测MTSase酶活力,如MTSase基因工程菌发酵过程中离线或在线连续取样时酶活的检测、MTSase应用研发时转化多种底物过程中酶活的检测等,具有良好的应用前景
- 一种麦芽寡糖海藻合成酶酶活检测方法
- [发明专利]一种快速筛选漆酶产生菌的液体显色方法-CN202110752033.1有效
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杨忠义
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白银赛诺动物保健技术有限公司
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2021-06-29
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2023-05-19
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C12Q1/04
- 本发明公开了一种快速筛选漆酶产生菌的液体显色方法,属于微生物选育方法技术领域,包括菌体选择培养、不同pH缓冲液配置、显色反应底物溶液配置、菌种显色能力测定、漆酶溶液制备和菌种产漆酶能力测定,具体方法为:吸取ABTS溶液于试管中,加入菌体,25℃静置反应,记录反应液显绿时间,本发明通过对菌种类型、底物溶液、温度和菌体用量等方面对显色反应的影响进行试验,并通过菌体显色能力与产酶能力进行比较,证明了菌体催化底物显色能力与菌种液体发酵产酶能力之间呈正相关,因此,仅通过菌体直接与底物溶液发生显色反应一步,在短时间内就可以检验出菌种有与无产漆酶能力和产酶能力高与低,利用该方法能够一步完成筛选,方法简单、快速灵敏。
- 一种快速筛选产生液体显色方法
- [发明专利]一种筛选酪氨酸酶抑制剂的方法-CN201510394028.2有效
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陈健敏;黄梅萍
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莆田学院
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2015-07-07
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2018-02-23
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G01N21/31
- 本发明公开了一种筛选酪氨酸酶抑制剂的方法,包括将切碎后的双孢蘑菇加入至预冷的pH=6.8的磷酸缓冲溶液中;将所述磷酸缓冲溶液匀浆处理,然后用尼龙纱布过滤,得到酪氨酸酶的粗提液;在96孔板的每孔中加入所述酪氨酸酶的粗提液,将96也板放入冰箱中进行吸附;配制左旋多巴底物溶液和称取待筛选的酪氨酸酶抑制剂溶液;取步骤三所得到的96孔板,在96孔板上加入底物溶液以及在不同的底物溶液中加入酪氨酸酶抑制剂溶液进行对照培养;比较酪氨酸酶抑制剂与对照组溶液的颜色深浅来判断曲酸对酪氨酸酶的抑制效果本发明通过对酪氨酸酶粗提液的进行吸附,得到较为纯净的固定化的酪氨酸酶,大大简化了酪氨酸酶的提纯步骤。
- 一种筛选酪氨酸抑制剂方法
- [发明专利]一种酶促反应底物浓度检测方法-CN201911022332.9有效
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徐詹程
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徐詹程
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2019-10-25
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2022-02-15
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G01N21/27
- 本发明涉及生物化学检测领域,具体涉及一种酶促反应底物浓度检测方法,包括以下步骤:步骤一,在检测孔1滴加已知浓度底物溶液,在检测孔2滴加待测底物溶液,检测孔1和检测孔2所含试剂酶活一致;步骤二,设定反应时间,到设定时间后分别检测所述检测孔1和检测孔2的反射光度或颜色;步骤三,根据所述检测孔1检测结果和内置的不同酶活‑反应程度曲线得到试剂酶活;步骤四,根据所述步骤三得到的酶活调用内置的不同底物浓度‑反应程度曲线,根据所述检测孔2的检测结果得到待测底物的浓度。应用本发明酶促反应底物浓度检测方法可降低甚至消除酶活变化对底物浓度测定的影响。
- 一种反应浓度检测方法
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