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[发明专利]一种调节蛋白类药物半乳糖基化水平的CHO细胞培养方法-CN202110312011.3在审
发明人：李得林;黄根树;宁荣良;孟晓;高相雷;郭林峰;李晓平;陈小锋;李文佳 -专利权人：广东东阳光药业有限公司
申请日： 2021-03-24 - 公布日： 2021-09-28 - 主分类号： C12P21/08 文献下载
摘要：本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种调节蛋白类药物半乳糖基化水平的CHO细胞培养方法。该培养方法包括基础培养阶段和补料培养阶段，在补料培养阶段，除补加补料培养基外，还补加L‑半胱氨酸；L‑半胱氨酸可以在补料培养阶段，与补料培养基同时补加，补加量为1.2～4.8mmol/L；还可以在基础培养阶段和补料培养阶段分别补加，且在基础培养阶段补加量为0.3～2.0mmol/L，在补料培养阶段补加量为0.6～1.8mmol/L。本发明的方法不仅可以通过调整半胱氨酸的补料量，提高蛋白类药物的半乳糖基化水平，而且不改变药物的其他关键质量属性。本培养方法操作简单，适合大规模生产。
一种调节蛋白类药物半乳糖水平 cho 细胞培养方法

[发明专利]一种无灭菌发酵生产聚羟基脂肪酸酯的方法-CN201710832790.3有效
发明人：叶健文;汪东升;陈风义 -专利权人：北京蓝晶微生物科技有限公司
申请日： 2017-09-15 - 公布日： 2022-04-12 - 主分类号： C12P7/625 文献下载
摘要：本发明提供一种以嗜盐菌无灭菌发酵生产聚羟基脂肪酸酯(PHA)的方法，所述方法包括以下步骤：(1)将嗜盐菌接入发酵培养基中进行发酵培养；(2)发酵进入对数期后，通过补加第一补料培养基进行第一阶段补料发酵；(3)第一阶段补料发酵结束后，通过补加第二补料培养基进行第二阶段补料发酵；(4)第二阶段补料发酵结束后，通过补加第三补料培养基进行第三阶段补料发酵直至发酵结束，其中，在以上步骤(2)中的第一补料培养基和步骤(3)中的第二补料培养基包含碳源和氮源，在以上步骤(4)中的第三补料培养基仅包含碳源，并且在以上步骤(3)的第二补料培养基中的氮源含量低于在以上步骤(2)的第一补料培养基中的氮源含量。
一种灭菌发酵生产羟基脂肪酸方法

[发明专利]一种用于双歧杆菌高密度培养的补料培养基及补料方法-CN202310510913.7在审
发明人：季学猛;刘海薇;付文慧;王津;王硕 -专利权人：南开大学
申请日： 2023-05-08 - 公布日： 2023-08-04 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于双歧杆菌高密度培养的补料培养基及补料方法，补料方法包括如下步骤：将权利要求1所述的补料培养基通过碱泵与发酵培养基连接，根据所述的发酵培养基的pH值控制所述的补料培养基的补入量即成。本发明通过优化补料培养基及补料方法，无需发酵罐补料偶联技术便实现了根据pH值变化，利用碱泵自动补充碳源和碱液，实现了保持pH值和碳源浓度的稳定；该补料方法对发酵罐的设备技术要求低，操作简单，降低了发酵成本
一种用于杆菌高密度培养培养基方法

[发明专利]一种发酵生产胰岛素原的补料培养基及补料培养优化方法-CN200810210403.3有效
发明人：赵志全;钟传青;强红刚 -专利权人：鲁南制药集团股份有限公司
申请日： 2008-08-09 - 公布日： 2010-02-10 - 主分类号： C12P21/04 文献下载
摘要：一种发酵生产胰岛素原的补料培养基及补料培养优化方法，属于微生物工程领域。本发明针对目前大肠杆菌表达胰岛素原过程中发酵密度小、表达量低等不足，提出了一种含有DMEM-高糖培养基的补料培养基，以及一种将这种补料培养基应用于大肠杆菌发酵胰岛素原中的分批补料优化方法。本发明涉及的培养方法工艺易于控制，通用性强，弥补了大肠杆菌表达胰岛素前体的补料培养基和补料培养优化方法。
一种发酵生产胰岛素培养基培养优化方法

[发明专利]一种HEK293细胞组合梯度培养基及其用途-CN202110144051.1有效
发明人：肖志华 -专利权人：上海奥浦迈生物科技股份有限公司
申请日： 2021-02-03 - 公布日： 2021-04-27 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：一种用于HEK293细胞的浓度梯度培养基组，包括培养时按时间顺序添加的基础培养基，补料培养基X，补料培养基Y，补料培养基Z；其中维生素，血清替代物中不同成分的浓度从基础培养基到补料培养基Z呈不同变化趋势
一种 hek293 细胞组合梯度培养基及其用途

[发明专利]一种以木薯淀粉原料生产ε-聚赖氨酸的连续流加补料分批发酵工艺-CN201510454549.2在审
发明人：扶教龙;吴晨奇;施磊;徐敏强;鞠鑫;金萍;王桃云 -专利权人：苏州科技学院
申请日： 2015-07-29 - 公布日： 2015-10-07 - 主分类号： C12P13/02 文献下载
摘要：本发明涉及ε-聚赖氨酸的生产，具体的说是一种以木薯淀粉原料生产ε-聚赖氨酸的连续流加补料分批发酵工艺，属生物化工技术领域。它用木薯淀粉发酵培养基对ε-聚赖氨酸产生菌进行发酵培养，当培养体系的还原糖浓度下降至5-25g/L时进行连续补料，向发酵培养基中补加400-700g/L的木薯淀粉补料培养基，使还原糖浓度一直维持在5-25g并同时向发酵培养基中连续补加同样体积的无机氮源补料培养基或有机氮源加无机氮源补料培养基或全料补料培养基直至发酵结束。本发明显著提高了ε-聚赖氨酸的产量，又降低了生产成本，而且补料方式简单易行，便于操作，对ε-聚赖氨酸工业的发展具有重要的意义。
一种木薯淀粉原料生产赖氨酸连续流加补料分批发酵工艺

[发明专利]一种多级连续发酵生产丁二酸的方法-CN201410609027.0在审
发明人：陈可泉;王震;姜岷;何珣;肖文;欧阳平凯 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2014-11-04 - 公布日： 2015-02-25 - 主分类号： C12P7/46 文献下载
摘要：一种多级连续发酵生产丁二酸的方法，包括以下步骤：第一步，配种子培养基、初始发酵培养基、碳源补料罐培养液和培养基补料罐培养液；第二步，对串联发酵罐组、碳源补料罐、培养基补料罐、种子培养基、初始发酵培养基、碳源补料罐培养液、培养基补料罐培养液以及血清瓶进行灭菌处理；第三步，取灭菌后的血清瓶，接入灭菌后的种子培养基，通入CO₂后再接入产琥珀酸放线杆菌（Actinobacillussuccinogenes）NJ113摇床培养后作为发酵菌种；第四步，多级连续发酵。
一种多级连续发酵生产丁二酸方法

[发明专利]一种多级连续发酵生产丁二酸的方法-CN201410459744.X无效
发明人：陈可泉;王震;何珣;肖文;欧阳平凯 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2014-09-11 - 公布日： 2014-11-19 - 主分类号： C12P7/46 文献下载
摘要：一种多级连续发酵生产丁二酸的方法，包括以下步骤：第一步，配种子培养基、初始发酵培养基、碳源补料罐培养液和培养基补料罐培养液；第二步，对串联发酵罐组、碳源补料罐、培养基补料罐、种子培养基、初始发酵培养基、碳源补料罐培养液、培养基补料罐培养液以及血清瓶进行灭菌处理；第三步，取灭菌后的血清瓶，接入灭菌后的种子培养基，通入CO2后再接入产琥珀酸放线杆菌（Actinobacillussuccinogenes）NJ113摇床培养后作为发酵菌种；第四步，多级连续发酵。
一种多级连续发酵生产丁二酸方法

[实用新型]一种分子生物培养用智能补料装置-CN202122320772.1有效
发明人：段佩玲;张晓霞;杨显辉;王亚旭 -专利权人：郑州铁路职业技术学院
申请日： 2021-09-24 - 公布日： 2022-02-08 - 主分类号： C12M1/22 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种分子生物培养用智能补料装置，所述补料组件包括储料箱，所述储料箱的底部中间固定设置有补料管机构，所述补料管机构的内腔活动设置有补料开关机构，本实用新型涉及智能补料技术领域。该分子生物培养用智能补料装置，通过强力浮漂圈、堵球、出料口以及导料管的相互配合，当培养皿中培养液减少时，强力浮漂圈和堵球随着水位下降而下降，使出料口和储料箱内部连通，储料箱中的培养液流经导料管到培养皿内，及时精准补给培养皿中缺少的培养液，省时省力，利用透明观察窗能及时观察培养皿中的情况，由于密封性的补料设计确保了培养皿一直处于无菌环境中，不会被外部所污染，保证分子生物的正常生长。
一种分子生物培养智能装置

[发明专利]一种调节PD-1抗体和LAG-3抗体酸性电荷异构体的CHO细胞培养方法-CN202211373985.3有效
发明人：周荣云;赵如奎;徐传学;闫少羽;王玉倩;李文;龙杰;黄晶晶;白莉惠;朱吉满 -专利权人：广州誉衡生物科技有限公司
申请日： 2022-11-04 - 公布日： 2023-04-11 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种调节PD‑1抗体和LAG‑3抗体酸性电荷异构体的CHO细胞培养方法，采用分批补料培养方式培养，在细胞培养至第4~5天后，培养温度降至30‑34℃，同时按照下述补料策略进行培养：在第3、6、8、10天同时添加第一补料培养基和第二补料培养基进行补料培养，同时在第3天添加复合调节剂进行补料培养。本发明从细胞培养的代谢过程调控出发，通过改变降温时间、改变补料策略、向基础培养基中添加天冬氨酸、复合调节剂等，使得其表达过程中营养充分并且对部分电荷异质性的修饰和降解起到抑制和阻止作用，从而能稳定、有效地改善抗体产品的电荷异质性及保持或增加抗体的表达量
一种调节 pd 抗体 lag 酸性电荷异构体 cho 细胞培养方法

[发明专利]一种重组人凝血因子IX活性分子的补料发酵方法-CN201810259116.5有效
发明人：费保进;谭晓晶;梁洪 -专利权人：成都蓉生药业有限责任公司
申请日： 2018-03-27 - 公布日： 2022-03-01 - 主分类号： C12N9/64 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组人凝血因子IX活性分子的补料发酵方法，它包括如下步骤：(1)接种培养：将用于生产重组人凝血因子IX活性分子的细胞株接种于培养基中，发酵培养；(2)补料发酵：发酵72‑96小时后，调节培养液中钙、镁离子浓度；并补加培养基，继续发酵；(3)当发酵至细胞活率低于70％，终止培养。本发明采用一种重组人凝血因子IX活性分子的补料发酵方法，对补料培养工艺进行了优化，通过控制发酵过程中钙离子与镁离子的浓度比例、补料液中Cell Boost 2的含量、葡萄糖的浓度、补料频率等因素，有效的提高了重组人凝血因子
一种重组凝血因子 ix 活性分子发酵方法

[发明专利]一种CHO细胞组合糖类补料培养基-CN202110248408.0有效
发明人：肖志华 -专利权人：上海奥浦迈生物科技股份有限公司
申请日： 2021-03-08 - 公布日： 2021-05-18 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：一种用于CHO细胞培养的组合糖类补料培养基以及鉴于温度变化CHO细胞的培养基添加方法，培养过程中采用补料培养基在不同培养温度节点添加，温度节点依次为30℃‑34℃‑37℃‑34℃‑32℃，补料培养基1‑
一种 cho 细胞组合糖类培养基

[发明专利]一种大肠杆菌发酵方法-CN201911205619.5有效
发明人：孙磊;张迎新;纪摇摇;孙保国;黄勇开;陈海滨 -专利权人：宁波酶赛生物工程有限公司
申请日： 2019-11-29 - 公布日： 2022-08-26 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明适用于微生物技术领域，提供了一种大肠杆菌发酵方法，包括：将大肠杆菌接种到发酵底液后，加入发酵补料进行预补料，然后恒温培养发酵；当需要补料时，以递增的补料速度加入发酵补料；当发酵液OD600达到20~35时，停止补料，并添加诱导培养基诱导；继续加入发酵补料至诱导剂消耗完毕；提高加料速度并继续加入发酵补料。本发明实施例提供的大肠杆菌发酵方法，当检测到需要补料时，以递增的补料速度进行补料，能够控制大肠杆菌的生长密度以及残糖浓度，在该条件下添加诱导培养基诱导蛋白表达，配合两段恒速补料策略，显著提高了目标蛋白表达量，在产业化培养时，仍能保持较高的工艺稳定性。
一种大肠杆菌发酵方法

[发明专利]化学成分限定高效补料培养基及其制备方法和应用-CN202010411627.1有效
发明人：王龙;纪明宇;王猛 -专利权人：上海多宁生物科技有限公司
申请日： 2020-05-15 - 公布日： 2021-01-29 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明涉及补料培养基技术领域，具体公开了一种化学成分限定高效补料培养基，由补料培养基A和补料培养基B组成，并且两者不相互混溶，所述补料培养基A包含有总浓度为12900‑124000mg/L的氨基酸，总浓度为1210‑12560mg/mL的无机盐和微量元素，总浓度为780‑10260mg/L的维生素，以及总浓度为1300‑8020mg/mL的其它成分；所述补料培养基B包含有总浓度为18000‑180000mg本发明补料培养基中的营养成分浓度高，特别是氨基酸和维生素含量高，因而能减少稀释效应，提高细胞密度和抗体蛋白表达，与其他商业补料培养基相比，本发明补料培养基培养效果好，生产成本低，优势明显。
化学成分限定高效培养基及其制备方法应用

[发明专利]一种基于代谢参数的补料培养基开发方法及系统-CN202210473120.8在审
发明人：陈亮;张祥涛;黄贺声;梁国龙 -专利权人：深圳太力生物技术有限责任公司
申请日： 2022-04-29 - 公布日： 2022-06-28 - 主分类号： G16C20/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于代谢参数的补料培养基开发方法及系统。方法包括：(1)代谢参数拟合：对于选定的基础培养基配方、以及细胞培养目标参数，采用代谢参数拟合模型，拟合细胞培养至预设时间t0的代谢参数(2)补料培养基开发：根据步骤(1)获得的细胞培养至预设时间的代谢参数、以及补料培养基添加时刻的细胞状态，估算补料培养基添加时刻的各培养基成分代谢消耗量；确定补料培养基各成分的浓度，使得该时刻采用的补料培养基成分满足该时刻各培养基成分代谢消耗量
一种基于代谢参数培养基开发方法系统

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