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[发明专利]一株具有解磷能力的巨大芽孢杆菌及其在溶解磷矿粉中的应用-CN202010478891.7在审
发明人：宗睿;倪海平;刘鲁民;钟传青;赵佳;周英萍 -专利权人：青岛和协生物科技有限公司;山东建筑大学
申请日： 2020-05-29 - 公布日： 2020-08-28 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明涉及一株具有解磷能力的巨大芽孢杆菌及其在溶解磷矿粉中的应用，属于农业生物技术领域。我国磷肥发展遇到产量不能满足农业生产，每年需要大量进口；缺乏高浓度高质量磷肥等问题。这些问题都严重阻碍了农业生产，所以应该寻找提高肥料质量、提升土壤肥力的方法与途径，比如利用微生物活化磷矿粉或土壤中的难溶磷来释放土壤中无效磷，将其转化为植物可以利用的磷，以提高土壤肥力。研究表明巨大芽孢杆菌HX63菌株能够分泌有机酸、产生磷酸酶，并且可以提高种子发芽率、促进植株生长发育等，能够用于难溶磷素的溶解。因此，本发明中的巨大芽孢杆菌HX63菌株能为微生物菌肥开发提供良好的菌株资源，具有良好的开发应用前景。
具有能力巨大芽孢杆菌及其溶解磷矿粉中的应用

[发明专利]一种骨肉瘤细胞的无血清培养基及其制备方法-CN201710377297.7有效
发明人：曹广祥;付加芳;王志宇;钟传青;宗工理 -专利权人：山东省医药生物技术研究中心
申请日： 2017-05-25 - 公布日： 2020-05-26 - 主分类号： C12N5/09 文献下载
摘要：本发明公开了一种骨肉瘤细胞的无血清培养基，由碳水化合物、氨基酸、核苷酸、维生素、无机盐、微量元素和添加物组成；所述添加物是由终浓度为10‑100mg/L透明质酸、1‑10mg/L吐温‑80、0.1‑10mg/L绿原酸和0.5mg/L酚红组成。本发明首次提供了一种适用于骨肉瘤细胞大规模悬浮培养的无血清培养基，本发明的无血清培养基能适用于骨肉瘤细胞高密度悬浮培养和表达重组蛋白，本发明的无血清培养基中化学成分明确，制备简单，能够重复性地人工配制并且质量稳定，同时生产成本较低，为利用骨肉瘤细胞表达重组蛋白的规模化生产提供一种成本低廉的培养方法。
一种骨肉细胞血清培养基及其制备方法

[发明专利]一种超表达内源性溶菌酶的菌株的构建方法及构建的菌株与应用-CN201610872882.X有效
发明人： 钟传青;曹广祥;付加芳;宗工理 -专利权人：山东建筑大学;山东省医药生物技术研究中心
申请日： 2016-09-30 - 公布日： 2019-12-10 - 主分类号： C12N15/76 文献下载
摘要：本发明公开了一种超表达内源性溶菌酶的菌株的构建方法，步骤如下：首先构建内源性溶菌酶的超表达载体，然后将超表达载体通过接合转移转入至出发菌株中，筛选得到内源性溶菌酶超表达的基因工程菌。本发明采用超表达技术，通过高表达内源性溶菌酶基因，改善工业菌株的细胞通透性，增强营养物质的摄取和次级代谢产物的分泌效率，最终提高了代谢产物的表达水平。本发明首次提出将该菌株的构建方法应用于工业微生物的菌种改造，为微生物育种提供了一条全新的方法。
一种表达内源性溶菌酶菌株构建方法应用

[发明专利]一株高底物专一性酰基转移酶的珍贵束丝放线菌及其应用-CN201810191854.0有效
发明人：曹广祥;宗工理;钟传青;付加芳 -专利权人：山东省医药生物技术研究中心（山东省病毒研究所）
申请日： 2018-03-08 - 公布日： 2019-05-28 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明公开了一株高底物专一性酰基转移酶的珍贵束丝放线菌，为珍贵束丝放线菌(Actinosynnema pretiosum)X4732,已于2018年2月5日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO.60327。本发明采用连续易错PCR方法体外突变酰基转移酶的基因，以酰基转移酶缺失菌株为出发菌，通过接合转移技术建立含有酰基转移酶基因的突变体库，筛选获得正突变株，通过发酵验证、传代培养获得遗传性状稳定的珍贵束丝放线菌X4732。本发明菌株的安丝菌素AP‑3合成水平比原始菌株X47高2.7倍，可应用于工业化发酵生产。
束丝放线菌酰基转移酶保藏专一性工业化发酵生产微生物菌种保藏酰基转移酶基因传代培养发明菌株合成水平缺失菌株突变体库遗传性状原始菌株正突变株易错PCR 接合出发菌方法体丝菌发酵突变应用筛选验证基因

[发明专利]一种具有保健功能的糖葫芦的制备方法及所得产品-CN201711301969.2在审
发明人：张超;李培刚;钟传青;武道吉;曹广祥 -专利权人：山东建筑大学
申请日： 2017-12-10 - 公布日： 2018-07-03 - 主分类号： A23G3/48 文献下载
摘要：本发明提供了一种具有保健功能的糖葫芦的制备方法及所得产品，步骤为：选料；浸糖；按照5%的接种量向发酵基料中接入红曲霉菌，在28‑32℃发酵35‑40h；穿串；熬糖；蘸糖。本发明方法独特，工艺流程简单，操作方便，使产品在保留了传统糖葫芦的基本色、形、味基础上口感更加独特；由于红曲霉菌的发酵作用，延长了产品的保质期；具有提高人体免疫能力等保健功能。
保健功能糖葫芦红曲霉菌制备人体免疫能力传统糖葫芦发酵基料发酵作用工艺流程基本色接种量保质期熬糖穿串浸糖选料发酵保留

[发明专利]一种利用高效生物膜清除石油污染物的生物滞留池-CN201610040989.8有效
发明人： 钟传青;张荻;姜爱华;张言;曹广祥 -专利权人：山东建筑大学;济南市水利局
申请日： 2016-01-21 - 公布日： 2018-06-29 - 主分类号： C02F3/34 文献下载
摘要：本发明提供一种利用高效生物膜清除石油污染物的生物滞留池，属于环境生物工程领域。本发明针对生物滞留池对石油消除效果差的问题，以常规生物滞留池技术为基础，通过在生物滞留特定区域设置生物膜的载体材料，接种高效降解微生物并培养生成生物膜系统，达到维持微生物长期存活、增强石油污染物的去除效果。本发明可以应用于公路、加油站、汽车维修厂、油库等石油泄漏风险较大场所的雨水、冲洗水储存和净化，减少了石油污染物对水环境的破坏。
石油污染物滞留高效生物膜高效降解微生物生物工程领域汽车维修厂生物膜系统常规生物区域设置石油泄漏载体材料冲洗水生物膜水环境去除油库加油站微生物接种存活雨水储存净化石油公路应用

[发明专利]一种养肝护眼固体饮料的制备方法及所得产品-CN201711262941.2在审
发明人：张超;钟传青;曹广祥;王洪波;王乃焜;吕铭;尹明山 -专利权人：山东建筑大学
申请日： 2017-12-04 - 公布日： 2018-06-15 - 主分类号： A23L2/38 文献下载
摘要：本发明提供了一种养肝护眼固体饮料的制备方法及所得产品，步骤为：主要由蓝莓、黑枸杞、苹果、猕猴桃等原料制备而成。将上述原料混合后，加热灭菌，作为发酵基料，然后按照14‑16%的接种量向发酵基料中接入灵芝菌种液，在28℃下发酵培养6d，发酵完成后再按照1‑2%的接种量向发酵液中加入生香酵母，再在相同的温度下发酵48h，发酵完成后将发酵液过滤，干燥后得发酵液浸膏粉；粗粉碎和超微粉碎，得养肝护眼固体饮料。本发明制备方法独特，所得固体饮料质量稳定，采用纯天然原料制作，对护肝养肝都有显著作用，具有显著的保护视力、缓解眼睛疲劳和预防光损伤的功效。 1
固体饮料护眼制备发酵发酵基料发酵液接种量纯天然原料发酵液过滤保护视力超微粉碎发酵培养加热灭菌灵芝菌种生香酵母眼睛疲劳原料混合原料制备质量稳定粗粉碎光损伤浸膏粉猕猴桃护肝蓝莓枸杞苹果缓解预防制作

[发明专利]一种枸杞灵芝保健酒及其制作方法-CN201710271335.0在审
发明人： 钟传青;曹广祥;张春明;亓小宇;张超 -专利权人：山东建筑大学
申请日： 2017-04-24 - 公布日： 2017-06-20 - 主分类号： C12G3/04 文献下载
摘要：本发明涉及一种枸杞灵芝保健酒及其制作方法，将枸杞、灵芝、红枣、杜仲、淫羊藿、女贞子、肉苁蓉、桑枝、玛咖、首乌、陈皮等中草药材烘干粉碎后，放入黄酒中浸泡而成。本发明所涉及的枸杞灵芝保健酒能够有效促进血液循环，提高免疫力，改善睡眠等。另外，本发明还涉及了该枸杞灵芝酒的制作方法，将原料清洗后控干，烘干至水分5％以下后采用干法粉碎，装入自制纱袋，置入黄酒中密封泡制而成。该制法既能利用水、乙醇有效地浸出各中草药材的功效成分，又避免了各功效成分因为受温度、强酸、强碱等受到破坏，保留了枸杞与红枣的香甜气味，得到的保健药酒口感好，效果显著，易于保存，男女老少皆宜，适用人群更广。
一种枸杞灵芝保健酒及其制作方法

[实用新型]一种去除石油烃的生物滞留池-CN201620025892.5有效
发明人：姜爱华;钟传青;王慧;张荻;曹广祥 -专利权人：济南市水利局;山东建筑大学
申请日： 2016-01-12 - 公布日： 2016-06-15 - 主分类号： E03F5/10 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种去除石油烃的生物滞留池，包括除油层，所述除油层设置在种植土层和砾石层之间，所述除油层内填充有亲油憎水材料，砾石层布置在生物滞留池最下层，种植土层布置在生物滞留池最上层，所述种植土层的上表面连接过水通道的一端，所述过水通道的另一端连接马路、加油站或汽车维修厂的路面。由过水通道汇集的含有石油烃污染物的水汇集至生物滞留池中，含有石油烃污染物的水经种植土层，到达除油层，除油层中的亲油憎水材料吸附石油烃污染物，最终去除了雨水或冲洗水中石油烃污染物。
一种去除石油生物滞留

[发明专利]一株高效积累多聚磷酸盐的积磷小月菌工程菌及其应用-CN201510969862.X在审
发明人： 钟传青;曹广祥 -专利权人：山东建筑大学;山东省医药生物技术研究中心
申请日： 2015-12-21 - 公布日： 2016-03-02 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一株高效积累多聚磷酸盐的积磷小月菌工程菌，为积磷小月菌(Microlunatus phosphovorus)JN459-M571，于2015年12月1日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.11770。本发明采用连续易错PCR方法体外突变ppk2基因的启动子，以JN459为出发菌，通过基因重组技术建立含有ppk2基因启动子突变体的菌株库，筛选获得在厌氧条件下分解多聚磷酸盐的能力下降，在好氧条件下合成多聚磷酸盐的能力无显著差异的JN459-M571菌株。本发明菌株在厌氧运行过程中比原始菌株JN459的Poly-P含量高2.4倍，可应用于污水处理厂的EBPR生物除磷工艺。
高效积累磷酸盐小月工程及其应用

[发明专利]一株高活性克拉维胺酸氨基乙酰化酶的棒状链霉菌及其应用-CN201510776880.6有效
发明人：曹广祥;钟传青 -专利权人：山东省医药生物技术研究中心;山东建筑大学
申请日： 2015-11-12 - 公布日： 2016-02-03 - 主分类号： C12N9/78 文献下载
摘要：本发明公开了一株高活性克拉维胺酸氨基乙酰化酶的棒状链霉菌，为棒状链霉菌(Streptomyces clavuligerus)B02-246，于2015年10月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.11484。本发明采用连续易错PCR方法体外突变克拉维胺酸氨基乙酰化酶的基因，以克拉维胺酸氨基乙酰化酶缺失菌株为出发菌，通过接合转移技术建立含有克拉维胺酸氨基乙酰化酶基因的突变体库，筛选获得正突变株，通过发酵验证、传代培养获得遗传性状稳定的棒状链霉菌B02-246。本发明菌株的克拉维酸合成水平比原始菌株B02高1.3倍，可应用于工业化发酵生产。
一株高活性克拉维胺酸氨基乙酰化棒状链霉菌及其应用

[发明专利]一种克拉维酸高产菌株的高通量可视化筛选方法-CN201510782635.6有效
发明人：曹广祥;钟传青 -专利权人：山东省医药生物技术研究中心;山东建筑大学
申请日： 2015-11-12 - 公布日： 2016-01-06 - 主分类号： C12N13/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种克拉维酸高产菌株的高通量可视化筛选方法。首先将两种不同荧光蛋白分别与克拉维酸合成基因簇的早期基因和晚期基因融合，获得出发重组菌株；然后诱变该重组菌株，利用突变菌产生荧光强度的变化来判断克拉维酸合成基因簇是否发生突变。初筛采用肉眼观察菌落荧光强度，选择荧光强度较大的菌落；复筛选取初筛获得的菌落，经培养后提取全细胞蛋白，用酶标仪测定荧光强度，获得克拉维酸合成基因簇高水平表达的突变菌株，最后通过发酵验证突变株的克拉维酸发酵水平。本发明的筛选方法降低了筛选的随机性和盲目性，大幅度降低劳动量，提高了筛选通量和有效性。
一种克拉高产菌株通量可视化筛选方法

[发明专利]一种发酵生产胰岛素原的补料培养基及补料培养优化方法-CN200810210403.3有效
发明人：赵志全;钟传青;强红刚 -专利权人：鲁南制药集团股份有限公司
申请日： 2008-08-09 - 公布日： 2010-02-10 - 主分类号： C12P21/04 文献下载
摘要：一种发酵生产胰岛素原的补料培养基及补料培养优化方法，属于微生物工程领域。本发明针对目前大肠杆菌表达胰岛素原过程中发酵密度小、表达量低等不足，提出了一种含有DMEM-高糖培养基的补料培养基，以及一种将这种补料培养基应用于大肠杆菌发酵胰岛素原中的分批补料优化方法。本发明涉及的培养方法工艺易于控制，通用性强，弥补了大肠杆菌表达胰岛素前体的补料培养基和补料培养优化方法。
一种发酵生产胰岛素培养基培养优化方法

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