本发明公开了L‑鼠李树胶糖‑1‑磷酸醛缩酶及其在催化合成稀有糖D‑山梨糖中的应用，其基因序列为由SEQ ID NO.1编码的野生型L‑鼠李树胶糖‑1‑磷酸醛缩酶分别经过其氨基酸第115、116、148、本发明通过对RhaD的氨基酸位点进行定点突变，克服了野生型RhaD催化合成D‑山梨糖没有立体选择性的缺陷，实现了RhaD催化D‑甘油醛为醛受体合成D‑山梨糖时的立体选择性，使得催化反应产物以D‑山梨糖为主本发明方法制备的定点突变的RhaD制备D‑山梨糖，合成效率高、工艺简单、节约成本、D‑山梨糖立体选择性催化效率最高达到91.7％。
本发明公开了一种制备槐糖的方法。属于有机化合物的合成技术领域。本发明以常用有机碱或无机碱如NaOH、乙醇钠为催化剂选择性催化水解甜菊糖苷，以制备槐糖这种在自然界中稀有存在的二糖。本发明提供了一种高效、环境友好的新方法以制备槐糖。Trichoderma reesei by sophorose[J].Journal of Bacteriology,1979，139(3)：761-769[2]陈育如，刘虎，姜中玉，刘友芬，一种同时制备异甜菊醇和槐糖的方法
本发明公开了L‑鼠李树胶糖‑1‑磷酸醛缩酶及其在催化合成稀有糖D‑阿洛酮糖中的应用，其基因序列为由SEQ ID NO.1编码的野生型L‑鼠李树胶糖‑1‑磷酸醛缩酶分别经过其氨基酸第29、188、266或本发明克服了野生型RhaD产生D‑阿洛酮糖:D‑山梨糖＝1：1没有立体选择性的缺陷，使得催化反应仅产生D‑阿洛酮糖或以D‑阿洛酮糖为主，且经过突变的RhaD的酶活较高。
本发明提供了一种海藻糖合成酶基因优化序列，包含如SEQ ID No.1所示的DNA序列。所述海藻糖合成酶基因优化序列表达的氨基酸包含如SEQ ID No.2所示的序列。本发明的海藻糖合成酶基因优化序列，通过密码子优化，在不改变最终氨基酸序列的基础上，将灰色链霉菌来源海藻糖合成酶基因序列中大肠杆菌稀有密码子或低频密码子均进行合理优化，突破了异源基因在大肠杆菌中的基因翻译瓶颈，提高了基因翻译效率，实现了在大肠杆菌中高产量可溶性表达，解决了大肠杆菌异源表达效率低的问题，大大降低海藻糖合成酶的生产成本。本发明可提高海藻糖合成酶的工业产值，降低生产成本。
