本发明公开了一种重组大鼠磷脂酶Cγ2腺病毒,通过将大鼠磷脂酶Cγ2基因插入含有腺病毒基因组的腺病毒穿梭质粒pHBAd‑MCMV‑GFP中获得,所述大鼠磷脂酶Cγ2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1本发明还提供了上述重组大鼠磷脂酶Cγ2腺病毒的构建方法和应用。本发明针对PLCγ2在癌细胞凋亡中的促进作用,构建PLCγ2重组腺病毒以代替基因的模式,可以针对性对癌细胞生长情况进行调控,重组大鼠磷脂酶Cγ2腺病毒能够稳定表达大鼠磷脂酶Cγ2,病毒滴度高,促细胞凋亡效应显著;重组腺病毒及其表达的大鼠磷脂酶Cγ2对大鼠肝肿瘤细胞具有显著抑制细胞增殖、促进其凋亡效应,为肝肿瘤的预防和治疗提供新的治疗思路。
小黑杨磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C编码基因PsnPI‑PLC及其应用,它涉及小黑杨磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C编码基因PsnPI‑PLC及其应用。其目的在于提供小黑杨磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C编码基因PsnPI‑PLC及其应用。小黑杨磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C编码基因PsnPI‑PLC核苷酸序列如序列表Seq ID No:1所示,氨基酸序列如序列表Seq ID No:2所示,该基因应用在提高植物耐盐性上。PsnPI‑PLC过表达烟草植株耐盐性优于非转基因植株,该基因过表达可以提升烟草的耐盐性,在林木耐盐育种领域有较高的应用价值,本发明应用于分子育种领域。
本发明公开了一种重组大肠杆菌及制备磷脂酶C的方法和大豆毛油脱胶方法,其中,制备磷脂酶C的方法是通过如下步骤完成的:(1)以保藏编号为GIM1.142(ATCC6538)的金黄色葡萄球菌的基因组DNA为模板,克隆得到磷脂酶C基因,其碱基序列如SEQ ID NO:1所示;(2)将(1)所得的磷脂酶C基因克隆到pET-28a(+)表达载体上,构建得到重组的表达质粒;(3)将(2)所得的重组质粒转化大肠杆菌BL21本发明采用重组大肠杆菌所产磷脂酶C作为催化剂,酶来源方便,产量高,发酵工艺简单且成本低;磷脂酶C脱胶与传统酶法脱胶相比,能缩短反应时间,且降低了中性油的损耗,提高精炼率,在油脂工业领域有一定应用前景。
本发明涉及一个来自“百令”生产菌冬虫夏草中国被毛孢参与水解磷脂制备相应游离脂肪酸中的磷脂酶C,编码这个酶的基因及其应用。所述磷脂酶C的氨基酸序列与SEQ ID No.1所示的蛋白具有90%以上同源性,其编码基因核苷酸序列与SEQ ID No.2所示序列具有90%以上同源性。本发明所提供的核苷酸序列的克隆DNA可以用来通过转导、转化、结合转移的方法转入工程菌中,通过调节催化水解磷脂制备相应游离脂肪酸的酶对应编码基因的表达,赋予宿主漆酶的高表达性,为扩大磷脂酶C的生物应用提供了有效途径
本发明公开了一种嗜热毛壳菌磷脂酶的制备方法,包括如下步骤:1)嗜热毛壳菌磷脂酶基因的合成,合成的嗜热毛壳菌磷脂酶基因的序列如SEQ ID NO.1所示,合成的基因编码更加符合里氏木霉高效表达的基因编码;2)嗜热毛壳菌磷脂酶表达质粒的构建;3)里氏木酶的转化与嗜热毛壳菌磷脂酶高产菌株的筛选,得到的嗜热毛壳菌磷脂酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示;4)嗜热毛壳菌磷脂酶的分离与提纯。本发明还公开了上述方法制得的嗜热毛壳菌磷脂酶以及其在制备面食产品中的应用。