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[发明专利]一种KCl低渗低电导率电穿孔缓冲液及其应用-CN201811360917.7在审
发明人：孙泽玮;陈文静;郑良荣 -专利权人：浙江大学
申请日： 2018-11-15 - 公布日： 2019-04-09 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明提供一种KCl低渗低电导率电穿孔缓冲液，每100ml缓冲液含30mM KCl。通过将Hela细胞消化，并重悬在缓冲液中，加入质粒混匀，进行电穿孔，将电击后细胞继续培养，行流式细胞术，即可分析EGFP阳性细胞比例。本发明所述低渗低电导率电穿孔缓冲液，因其低渗、低电导率的性质，可达到较高的电穿孔效率。本发明经比较转染效率，证明低渗低电导率缓冲液在用量相同情况下转染效率显著高于DMEM，而且在价格上明显低于市售商品。本发明所述KCl低渗低电导率电穿孔缓冲液，配置简便，价格低廉，转染效率显著高于DMEM培养基，易于推广。
低电导率低渗电穿孔缓冲液转染效率缓冲液电穿孔流式细胞术市售商品阳性细胞电击混匀质粒细胞消化配置应用分析

[发明专利]一种低渗低电导率电穿孔缓冲液及其应用-CN201811360943.X在审
发明人：孙泽玮;陈文静;郑良荣 -专利权人：浙江大学
申请日： 2018-11-15 - 公布日： 2019-04-09 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明提供一种低渗低电导率电穿孔缓冲液，所述缓冲液每100ml含30mM NaCl。通过将Hela细胞消化，并重悬在缓冲液中，加入质粒混匀，进行电穿孔，将电击后细胞继续培养，行流式细胞术，即可分析EGFP阳性细胞比例。本发明所述低渗低电导率电穿孔缓冲液，因其低渗、低电导率的性质，可达到较高的电穿孔效率。本发明经比较转染效率，证明低渗低电导率缓冲液在用量相同情况下转染效率显著高于DMEM，而且在价格上明显低于市售商品。本发明所述低渗低电导率电穿孔缓冲液，配置简便，价格低廉，转染效率显著高于DMEM培养基，易于推广。
低电导率低渗电穿孔缓冲液转染效率电穿孔缓冲液流式细胞术缓冲液每市售商品阳性细胞电击混匀质粒细胞消化配置应用分析

[发明专利]一种低电导率低渗透压电穿孔缓冲液及应用-CN202210139435.9有效
发明人：葛啸虎;程国钢;马德美;田应洲;白云飞;王达;赵刚刚;王淼 -专利权人：天九再生医学（天津）科技有限公司
申请日： 2022-02-16 - 公布日： 2022-05-24 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明公开一种低电导率低渗透压电穿孔缓冲液及应用，包括NaCl和蔗糖，调pH为1‑2，该缓冲液由于其低渗、低电导率的性质，可以达到较高的电穿孔效率；该缓冲液能够用于细胞外囊泡电穿孔过程，结合相应的电转条件，能够大幅提高细胞外囊泡电穿孔载药效率，使用此条件制备的载药外泌体性质未发生明显改变：形态完整、粒径、颗粒数和表面标志物无明显变化，但装载效率要明显更高。
一种电导率渗透压电穿孔缓冲液应用

[发明专利]一种电穿孔转染昆虫细胞的方法-CN201110133422.2无效
发明人：井申荣;杨靖佳;曾韦锟;黄芬 -专利权人：昆明理工大学
申请日： 2011-05-23 - 公布日： 2011-11-23 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明公开了一种电穿孔转染昆虫细胞的方法，本方法将构建的含报告基因的重组杆状病毒基因组和昆虫细胞在电穿孔缓冲液中混和，在电穿孔仪器中按照电穿孔条件进行电穿孔转染，从而将外源基因转染到昆虫细胞中。
一种穿孔转染昆虫细胞方法

[发明专利]优化电穿孔的方法-CN200980132804.4有效
发明人： S·泽库诺夫 -专利权人：麦克赛特股份有限公司
申请日： 2009-07-15 - 公布日： 2011-07-13 - 主分类号： C12N13/00 文献下载
摘要：本发明的实施方式涉及一种电穿孔技术，其能在高导电性缓冲液中递送高幅度的长电脉冲，并最大程度降低经历电穿孔对细胞的损伤。
优化穿孔方法

[发明专利]一种优化的电穿孔技术转染悬浮细胞的方法-CN201410166759.7在审
发明人：侯雯婷;蒋卫;李慧;张超;李刚 -专利权人：北京大学
申请日： 2014-04-24 - 公布日： 2014-08-13 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明属于哺乳动物细胞基因工程领域，具体是一种优化的电穿孔技术转染悬浮细胞的方法，特别是适用于难转染的CEMx174细胞系。其特征是用含10％血清的RPMI-1640细胞培养基为电穿孔缓冲液，以合适的浓度混合细胞与外源DNA，然后使用电穿孔仪进行电转染，将外源DNA导入细胞内。本方法不需要特殊制备的电转缓冲液以及其他转染试剂，可方便快速的将外源DNA导入细胞，同时获得较高的悬浮细胞转染效率。
一种优化穿孔技术转染悬浮细胞方法

[发明专利]通过电穿孔技术进行的外源基因转移方法-CN201180006731.1有效
发明人：早川靖彦;早川清 -专利权人：内帕基因株式会社
申请日： 2011-01-12 - 公布日： 2012-10-10 - 主分类号： C12N15/00 文献下载
摘要：本文公开了一种通过电穿孔技术进行的外源基因转移方法，该方法可适用于多种动物细胞并且在存活率和基因转移效率方面得到极其显著提高。本文还公开了一种甚至在没有使用专用转移缓冲液的时候能够通过电穿孔技术以高存活率和基因转移效率引入外源基因的方法。还公开了一种通过电穿孔技术进行的外源基因转移方法，其特征在于在特定条件下将第一电脉冲(强脉冲)和第二电脉冲(弱脉冲)连续施加于动物细胞，和显著提高存活率和基因转移效率；以及通过电穿孔技术进行的上述外源基因转移方法，其中可用于培养所述细胞的液体培养基被用作转移缓冲液。
通过穿孔技术进行基因转移方法

[发明专利]哺乳动物细胞高效电转染缓冲液及其制备方法-CN201510638518.2有效
发明人：周勇;申友锋 -专利权人：重庆高圣生物医药有限责任公司
申请日： 2015-09-28 - 公布日： 2020-01-07 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了哺乳动物细胞高效电转染缓冲液，该缓冲液是对Cytomix缓冲液的进一步改良。该缓冲液中加入的无血清Opti‑MEM培养基、RPMI‑1640培养基及PBS缓冲液能对细胞起营养保护作用，能增加细胞存活率，同时加入的ATP和谷氨酰胺可阻止细胞质成分渗漏，加强细胞膜抗氧化作用，有利于电穿孔的重新闭合本发明公开的电转染缓冲液，能够明显提高外源基因在目标细胞的电转染效率（高达64.82%），并能提高细胞存活率（高达62.33%）。本发明还提供了该电转染缓冲液的制备方法，该方法操作简单，可操作性强。
哺乳动物细胞高效转染缓冲液及其制备方法

[发明专利]一种配合高密度矩阵针电极使用的电转染缓冲液及其制备方法-CN201511024184.6有效
发明人：汪莹;戴晓兵 -专利权人：苏州壹达生物科技有限公司
申请日： 2015-12-31 - 公布日： 2019-07-12 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明公开了一种能够与高密度矩阵针电极配合使用的电转染缓冲液，该缓冲液的主要成分浓度为氯化钾10‑20mMol/l、葡萄糖10‑20mMol/L、三磷酸腺苷5‑6mMol/l、蔗糖350‑450mMol实验表明，使用本发明的缓冲液对细胞K562、HL60、BHK21进行电穿孔试验，配合高密度矩阵针电极使用比Bio‑Rad电转杯具有更好的细胞存活率和电转染效率，具有预料不到的技术效果。
一种配合高密度矩阵电极使用转染缓冲液及其制备方法

[发明专利]一种靶向复合外泌体及其制备方法-CN201811338234.1在审
发明人：胡春梅;唐秋莎;贾刚;安艳丽;黄莉莉 -专利权人：南京市第二医院（江苏省传染病医院、南京市公共卫生医疗中心）
申请日： 2018-11-12 - 公布日： 2019-03-08 - 主分类号： A61K47/46 文献下载
摘要：所述方法包括如下步骤：1)采用靶向多肽对外泌体进行靶向修饰，得到膜修饰有靶向多肽的外泌体；2)将膜修饰有靶向多肽的外泌体、药物、纳米四氧化三铁水溶液和电穿孔缓冲液混合，在2～6℃下进行电穿孔处理后，在35
靶向靶向多肽制备膜修饰复合纳米四氧化三铁电穿孔缓冲液医药技术领域主动靶向电穿孔孵育修饰

[发明专利]高通量高效细胞转染的方法及装置-CN201980068022.2在审
发明人：维沙尔·坦登;查尔斯·A·利桑德罗;詹娜·L·巴列斯特里尼;乔纳森·R·科佩塔;帕特里夏·A·斯维尔克 -专利权人：查尔斯·斯塔克·德雷珀实验室有限公司
申请日： 2019-08-30 - 公布日： 2021-07-23 - 主分类号： C12M3/06 文献下载
摘要：使用微流体动力学鞘流结构的系统包括将细胞从含有细胞培养基的侧流输送至包含电穿孔缓冲液的中央流的装置。电穿孔可以在组件中进行，在该组件中，两个或多个微流体通道以平行结构配置提供，并且在该组件中，各种层可以堆叠在一起以形成层压型结构。
通量高效细胞转染方法装置

[发明专利]一种载有利福平的复合外泌体及其制备方法-CN201811338241.1有效
发明人：胡春梅;唐秋莎;黄莉莉;张侠 -专利权人：南京市第二医院（江苏省传染病医院、南京市公共卫生医疗中心）
申请日： 2018-11-12 - 公布日： 2021-08-31 - 主分类号： A61K47/46 文献下载
摘要：本发明通过将利福平、外泌体和电穿孔缓冲液混合，在2～6℃下进行电穿孔处理，得到载有利福平的复合外泌体初体；将载有利福平的复合外泌体初体在35～40℃下孵育25～35min，得到载有利福平的复合外泌体。
一种载有利福平复合外泌体及其制备方法

[发明专利]一种主动趋炎抗炎工程化外泌体及其制备方法-CN201911214385.0有效
发明人：谢海燕;武广昊;赵倩茹;张金凤 -专利权人：北京理工大学
申请日： 2019-12-02 - 公布日： 2020-11-10 - 主分类号： A61K9/51 文献下载
摘要：所述外泌体以基于M2型巨噬细胞衍生的外泌体为载体，并将HAL以电穿孔的方式载入所述载体内，所述外泌体的平均粒径为120nm～250nm。将HAL与所述载体充分混匀于缓冲液中并放置于电穿孔容器中，使用电穿孔法使HAL进入所述载体内，电转15s，以上步骤均在‑5℃～5℃完成，离心去除多余的HAL，得到所述外泌体。
一种主动趋炎抗炎工程化外及其制备方法

[发明专利]一种利用纳米电穿孔和其他非内吞的细胞转染制备治疗性外泌体的方法-CN201880065004.4在审
发明人： L·J·李;J·施;Z·杨 -专利权人：俄亥俄州创新基金会
申请日： 2018-08-06 - 公布日： 2020-05-22 - 主分类号： A61K9/00 文献下载
摘要：含有高拷贝功能性核酸的治疗性细胞外囊泡(EV)通过将供体细胞放置在芯片表面，将各种质粒、其他转染载体及其组合添加到芯片上的缓冲液中，对放置在芯片表面顶部的细胞和芯片表面下方的质粒/载体缓冲溶液施加脉冲电场所述芯片表面上具有在其上形成的三维(3D)纳米通道电穿孔(NEP)生物芯片，能够处理大量供体细胞。所述缓冲液适用于接收质粒和其他转染载体。
一种利用纳米穿孔其他非内吞细胞转染制备治疗性外泌体方法

[发明专利]一种基于体液中细胞源性囊泡的多功能载体及制备方法和应用-CN201710556332.1有效
发明人：陈刚;张伟;庞代文;夏厚福;任建岗;余自力;杨解纲;赵怡芳 -专利权人：武汉大学
申请日： 2017-07-10 - 公布日： 2021-03-05 - 主分类号： A61K9/50 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于体液中细胞源性囊泡的多功能载体及制备方法和应用，步骤是：（1）收集人的体液，经梯度超速离心，弃上清，用无菌PBS重悬沉淀；（2）将体液来源细胞源性膜性囊泡、超小粒径发光材料和电穿孔缓冲液加入到电击杯中混匀，置于电穿孔仪上处理，电穿孔结束后室温放置修复，经超速离心后用PBS重悬沉淀，获取基于体液来源细胞源性膜性囊泡并经超小粒径发光材料标记的多功能载体。
一种基于体液细胞源性囊泡多功能载体制备方法应用

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