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[发明专利]一种MS抗原基因重组痘苗病毒的构建方法-CN202110709020.6在审
发明人：徐婧祎;何生虎;杨萌萌;郭磊;魏晓明;陈秀红;司朵朵;安于;闫背背;孙佳琳;李明哲;黄伟;张小梅;高玲子 -专利权人：宁夏大学;宁夏晓鸣农牧股份有限公司
申请日： 2021-06-25 - 公布日： 2021-10-08 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本申请提供一种MS抗原基因重组痘苗病毒的构建方法，包括以下步骤：根据NCBI基因库中启动子p7.5、启动子p11和TK基因序列构建质粒，得到TKF，TKR基因片段，根据原始质粒全基因序列设计引物，将原始质粒的PTKF基因进行PCR扩增，将扩增后的产物进行双酶切，与TKR基因片段根据酶切位点进行链接后培养，得到PTKF‑TKR质粒；根据PTKF‑TKR质粒全基因序列设计引物，将PTKR基因进行PCR扩增，将扩增后的产物进行双酶切，与TKF基因片段根据酶切位点进行链接后培养，之后进行表达载体构建得到PTKF‑TK‑PTKR质粒；构建重组转移质粒；重组病毒的转染与纯化。
一种 ms 抗原基因重组痘苗病毒构建方法

[发明专利]一种微生物单细胞基因组学测序文库的构建方法-CN202310801273.5在审
发明人：郑文山;李璐瑶;余先红;张孝瑾 -专利权人：墨卓生物科技（浙江）有限公司
申请日： 2023-07-03 - 公布日： 2023-10-17 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明属于单细胞测序领域，公开了一种微生物单细胞基因组学测序文库的构建方法，其包括以下步骤：1)对微生物单细胞进行裂解；2)加入扩增反应混合物，进行全基因组扩增；3)加入片段化试剂，获得片段化扩增产物；4)加入微珠和扩增反应混合物，对片段化反应产物进行条形码化标记，以此获得构建微生物单细胞全基因组测序文库的原材料。
一种微生物单细胞基因组序文构建方法

[发明专利]中药粉萆薢主要混淆基原叉蕊薯蓣鉴定ISSR－SCARs标记-CN200810021446.7无效
发明人：杭悦宇;郑玉红;吴宝成;周义锋;高兴;顾子霞 -专利权人：江苏省中国科学院植物研究所
申请日： 2008-08-02 - 公布日： 2009-02-04 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及中药粉萆薢主要混淆基原叉蕊薯蓣的分子鉴别方法，该方法在对叉蕊薯蓣和中药粉萆薢正宗基原粉背薯蓣在进行总DNA提取、PCR扩增、引物筛选、ISSR－SCARs扩增与检测、分析等过程的基础上，找到了鉴定叉蕊薯蓣的使用本发明公开的引物进行PCR反应可以从叉蕊薯蓣中获得长度为960bp扩增片段，而在粉背薯蓣中无此片段。根据这个ISSR－PCR扩增片段的差异，设计出可鉴别中药粉萆薢不同基原植物的高特异性鉴别引物，并能成功进行叉蕊薯蓣的高特异性PCR鉴别。
药粉萆薢主要混淆基原叉蕊薯蓣鉴定 issr scars 标记

[发明专利]一种检测DNA中的单链断裂的方法-CN201910837092.1有效
发明人：菲利普·卡帕诺夫;曹慧芬;洛雷娜·萨拉萨尔-加西亚;高帆;徐冬旸;蔡烨;韩雪儿;王芳;唐露 -专利权人：华侨大学
申请日： 2019-09-05 - 公布日： 2022-09-30 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测DNA中的单链断裂的方法，包括如下步骤：1)对待测DNA进行片段化，由此产生的片段的3’末端不能被加尾；2)对片段化的待测DNA的3’末端进行第一次加尾；3)对第一次加尾后的样品通过以下步骤捕获和识别全基因组中DNA单链断裂(single strand breaks,SSBs)的位置：首先，使用嵌合5’‑DNA‑RNA‑3’引物对加尾后的片段进行线性扩增；其次，对扩增产物的3’末端进行第二次加尾；最后，目标产物通过包含接头序列的寡核苷酸进行PCR扩增建库并进行二代测序。
一种检测 dna 中的断裂方法

[发明专利]一种限制性扩增方法-CN02115322.1无效
发明人：马文丽;郑文岭;李凌 -专利权人：中国人民解放军基因工程研究所
申请日： 2002-05-31 - 公布日： 2003-12-17 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本发明公开了一种限制性扩增方法，该方法依次包括以下步骤：(1)限制性核酸内切酶消化DNA或cDNA；(2)设计接头，与上述限制性酶切片段连接；(3)根据限制性内切酶位点与接头序列设计通用引物，并针对目标核苷酸序列在通用引物的3′末端延伸一个或一个以上的碱基设计选择性引物进行PCR分组扩增；(4)分离纯化步骤(3)扩增的基因片段作模板，进行二次PCR，纯化产物，重悬于溶液中。本发明可快速、经济、自动化获取大量序列已知、甚至未知的基因片段，用于制备DNA微集芯片(DNAmicrochip)上固化的靶基因片段。
一种限制性扩增方法

[发明专利]使用AFLP的高通量物理作图-CN200780025146.X有效
发明人： M·J·T·范艾克;T·P·耶瑟 -专利权人：凯津公司
申请日： 2007-07-10 - 公布日： 2009-07-15 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及鉴定和检测分子标记的高通量方法，其中产生限制性片段并连接适当的包含(样品特异性的)鉴定因子的接头。该接头连接的限制性片段可用在其3’端带有选择性核苷酸的与接头相容的引物选择性扩增。扩增的接头连接的限制性片段至少部分地通过高通量测序方法进行测序，该限制性片段的序列部分和样品特异性鉴定因子一起用作分子标记。
使用 aflp 通量物理作图

[发明专利]水稻稻瘟病抗性基因Pita、Pib分子标记方法-CN201610658208.1在审
发明人：裴柏平;陈玲;韦平;陈志华;丁红梅 -专利权人：江苏焦点农业科技有限公司
申请日： 2016-08-11 - 公布日： 2016-11-30 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及水稻稻瘟病抗性基因Pita、Pib分子标记方法，包括抗稻瘟病种子资源的筛选、PCR引物制备、DNA材料提取、PCR扩增和琼脂糖胶电泳标记等操作，将稻瘟病抗性基因Pita、Pib提取并进行标记。上述标记方法利用PCR引物扩增技术，分别将Pita和Pib基因分别扩增至YL155/YL87、YL183/YL87、Pibdom F/Pibdom R和Lys145 F/Lys145 R扩增片段上，然后采用凝胶成像仪进行分析确认，以明确区别Pita和Pib基因最终扩增至哪一片段上，过程简单、成功率高。
水稻稻瘟病抗性基因 pita pib 分子标记方法

[发明专利]一种核酸测序文库及其构建方法-CN201810176919.4有效
发明人：朱修锐;袁国红;孟凡琳;郭永;王勇斗 -专利权人：清华大学;北京羿赛生物科技有限公司
申请日： 2018-03-04 - 公布日： 2020-10-02 - 主分类号： C40B40/06 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于核酸测序的文库及其构建方法，所述构建方法包括对待测序的核酸进行片段化，片段化核酸进行转录扩增，扩增产物与接头连接，和对连接后的产物进行扩增。通过该方法构建的测序文库能够在测序结果处理的过程中使用文库构建过程中加上的已知序列和随机序列对测序过程中每一个由核酸合成或扩增的反应产生的错误进行分类和修正，并精确确定待测序核酸序列中每种序列的分子数量和用于测序的扩增反应之前每种序列的分子数量或比例
一种核酸序文及其构建方法

[发明专利]细菌微量快速同步检测方法-CN200410045432.0无效
发明人：彭宣宪;纪念念;彭博;王三英 -专利权人：厦门大学
申请日： 2004-05-19 - 公布日： 2005-11-23 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：步骤为制备模板；PCR扩增：扩增引物为细菌核糖体核糖核酸基因通用引物；变性梯度凝胶电泳：取扩增产物进行变性梯度凝胶电泳，确定种类。采用UPPCR技术扩增细菌的16S rRNA基因片段，获得培养基中所有细菌相应基因片段序列的信息，再采用DGGE鉴定混合细菌的扩增产物，以确定检测的细菌。
细菌微量快速同步检测方法

[发明专利]一种基于新冠病毒的全基因组全长扩增的三代建库测序方法-CN202010536120.9在审
发明人：方涛 -专利权人：武汉菲沙基因信息有限公司
申请日： 2020-06-12 - 公布日： 2020-09-04 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于新冠病毒的全基因组全长扩增的三代建库测序方法，步骤包括：1)根据新冠病毒基因组一致性序列设计与合成引物；2)新冠病毒基因组全长扩增；3)全基因组扩增子样本混样；4)文库构建；5)三代测序本发明通过结合奇数、偶数引物分别扩增，然后将奇数和偶数扩增片段进行混合，可获得覆盖整个新冠病毒基因组的扩增子片段，从而仅需要2个扩增反应，极大地提高了实验效率。另外通过PacBio建库流程，在扩增子的两端添加带有barcode的测序接头，即可进行PacBio测序，通过拆分与数据校正后获得准确率在99％以上的HiFiReads。
一种基于病毒基因组全长扩增三代建库测序方法

[发明专利]一种HLA基因扩增、基因分型的引物组、试剂盒和方法-CN201810331958.7有效
发明人：康颖 -专利权人：北京诺诗康瀛基因技术股份有限公司
申请日： 2018-04-13 - 公布日： 2020-02-07 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：本发明提供的用于HLA基因扩增、基因分型的引物组、试剂盒和方法，属于基因检测领域。所述的用于HLA基因扩增的引物组，分别根据HLA‑A基因的8个外显子区、HLA‑B基因的8个外显子区和HLA‑DRB1基因的外显子2和外显子3设计引物，利用所述引物对所述HLA基因进行PCR扩增，得到基因片段长度大于400bp，小于1.5kb的产物；通过上述引物PCR扩增HLA基因，使得扩增产物的基因片段长度大于400bp，小于1.5kb，对模板的完整性要求降低，扩增效率高，扩增反应时间短，成本降低，可以满足大规模样本HLA基因的扩增或基因分型的需求。
扩增基因分型引物组基因片段外显子区试剂盒外显子引物完整性要求基因检测扩增产物扩增反应扩增效率设计引物样本

[发明专利]一种检测ZNF9致病基因突变的方法-CN202310810501.5在审
发明人：李生斌;李小明 -专利权人：西安华壹健康医学检验实验室有限公司
申请日： 2023-07-04 - 公布日： 2023-09-19 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：S1、对被检测者的静脉采血进行基因组DNA提取；S2、提取靶向目标区域前后1kb的序列，使用工具Primer3进行引物序列设计，挑选出横跨靶向目标区域ZNF9基因中包含CCTG拷贝区域的引物序列对，得到扩增引物；S3、通过琼脂糖凝胶电泳，对扩增片段的大小进行比对，区分ZNF9基因是否发生突变；S4、使用LabChip GXTouch生物分析仪验证扩增片段大小。本发明利用ZNF9基因序列中不稳定的CCTG拷贝，在适当位置设计扩增引物，将包含CCTG重复序列的片段扩增出来，直接通过扩增产物的大小区分ZNF9基因是否发生突变；本发明操作简单方便，能高效区分ZNF9
一种检测 znf9 致病基因突变方法

[发明专利]一种斑重唇鱼线粒体基因组全序列扩增方法-CN201611067861.7有效
发明人：杨天燕;孟玮;高天翔;刘云国;韩志强;蔡珊珊 -专利权人：浙江海洋大学
申请日： 2016-11-29 - 公布日： 2019-06-28 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开一种斑重唇鱼线粒体基因组全序列扩增方法，具体步骤如下：（1）斑重唇鱼线粒体Cyt b、COI、ND4和16S rRNA四个基因片段的扩增；（2）斑重唇鱼线粒体基因组的LA‑PCR扩增。本发明扩增了斑重唇鱼线粒体Cyt b、COI、ND4和16S rRNA四个基因片段，根据获得序列设计了4对LA‑PCR引物进行大片段序列扩增，然后通过引物步移的方法，用28条测序引物对斑重唇鱼线粒体基因组其余部分进行PCR扩增从而获得斑重唇鱼长度为16895 bp的线粒体全基因组序列。
重唇鱼线粒体基因组扩增基因片段全序列线粒体线粒体全基因组序列分子水平研究群体遗传结构测序引物分子标记基础资料技术支持物种鉴定序列扩增序列设计步移引物进化遗传大片研究

[发明专利]二次DNA片段化的基因组单倍型高通量测序方法-CN201410606732.5在审
发明人：涂景;陆祖宏;高珅;郭靖;段梦沁;乔祎 -专利权人：东南大学
申请日： 2014-10-30 - 公布日： 2015-02-18 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种二次DNA片段化的基因组单倍型高通量测序方法，分两次对基因组DNA进行片段化后测序以获得单倍型信息：第一次DNA片段化将基因组DNA分割成为一系列较长的核酸片段，在较长的核酸片段中构建一组片段文库，对每个片段文库进行扩增；将扩增后的较长的核酸片段进行第二次DNA片段化，第二次DNA片段化后得到较短的核酸片段，每个片段文库独立构建测序文库并分别进行高通量测序，测序的结果首先在每个片段文库内部进行序列比对或拼接，获得较长的核酸序列后进行跨片段文库的序列比对和拼接，从而实现利用高通量测序获得基因组单倍型信息。
二次 dna 片段基因组单倍型高通量方法

[发明专利]一种利用流式细胞分选筛选纳米抗体的方法-CN201810143471.6在审
发明人：宋海鹏;刘原源;于建立;周宇杭;李飞;古一 -专利权人：深圳市国创纳米抗体技术有限公司
申请日： 2018-02-12 - 公布日： 2018-07-24 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：)收集被免疫靶抗原的骆驼科动物的外周血B淋巴细胞；(2)应用靶抗原通过流式细胞术分选所述B淋巴细胞为单细胞；(3)将分选好的单个B淋巴细胞直接进行逆转录反应生成cDNA；(4)以cDNA为模板，PCR扩增抗体重链序列并回收扩增产物；(5)以步骤(4)扩增产物为模板，PCR扩增抗体的CH1与CH2序列编码基因；(6)以步骤(5)扩增为阴性的步骤(4)扩增产物为模板，PCR扩增抗体的VHH片段编码基因；(7)将步骤(6)获得的VHH片段克隆入表达载体，并在宿主菌中表达所述VHH片段；(8)鉴定步骤(7)表达的纳米抗体。
筛选扩增产物纳米抗体流式细胞分选靶抗原分选抗体流式细胞术骆驼科动物逆转录反应噬菌体污染表达载体经济成本抗体重链片段编码片段克隆序列编码宿主菌外周血基因扩增阴性工作量回收应用