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[发明专利]一种基于DNA马达的检测赫曲霉毒素A的方法-CN202110497822.5在审
发明人：杨丽珠;李煜婷;许亚玲;张佳枫;吴戈 -专利权人：温州医科大学
申请日： 2021-05-08 - 公布日： 2022-11-08 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于DNA马达的检测赭曲霉毒素A的方法。该方法基于自主运行的DNA马达，提供了一种一步扩增的程序化自动检测赭曲霉毒素A的方法。赭曲霉毒素A可与适体结合并诱导分子发夹结构的打开。然后，镁离子特异的DNA酶可以在金纳米颗粒上循环剪切荧光团标记的DNA，从而引起DNA马达的自主性和过程性运动。最后，切割的荧光团标记的DNA片段可以从金纳米颗粒表面离开，从而导致荧光信号的显著恢复。
一种基于 dna 马达检测曲霉毒素方法

[发明专利]一种高效便捷的转基因小鼠基因型鉴定方法-CN202310640318.5在审
发明人：李博 -专利权人：四川大学
申请日： 2023-06-01 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：步骤一：提取组织DNA，作为DNA模板；步骤二：PCR扩增目的基因，利用引物对DNA进行扩增；步骤三：琼脂糖凝胶电泳，在水平电泳仪中放入配制好的2％琼脂糖凝胶；步骤四：成像分析，观察电泳结果，记录小鼠基因型本申请对提取组织DNA和PCR扩增目的基因环节进行了大幅优化。DNA提取过程仅需要2种易于配制的试剂，即碱性裂解液和酸性中和液，且仅需要设定一组温度和时间，即95℃加热20min。同时，PCR采用了一套通用的循环参数，能够兼容各种引物，对各种转基因鼠DNA目的片段进行扩增。综上所述，本方法所用试剂少、耗时短、成本低、步骤简便，具有高效便捷的显著特点。
一种高效便捷转基因小鼠基因型鉴定方法

[发明专利]一种苹果花叶病毒检测试剂盒及其制备方法-CN201510171742.5有效
发明人：兰伟;纪秀翠;徐慧 -专利权人：鲁东大学
申请日： 2015-04-13 - 公布日： 2018-08-03 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明一种苹果病毒检测试纸条及其制备方法，其特点是运用靶向引发的、ExonucleaseⅢ辅助的放大策略进行检测，经靶向苹果病毒引发、ExonucleaseⅢ切割循环后产生的大量单链DNA作为样品垫上的待测试液，其一部分序列与玻璃纤维结合垫上的DNA探针1互补配对、另一部分序列与硝酸纤维素膜上的DNA探针2互补配对；且DNA探针1‑纳米金复合物上的DNA与DNA探针3互补配对。
一种苹果病毒检测试纸及其制备方法

[发明专利]一种基于耐热DNA聚合酶和连接酶的体外快速无缝组装DNA的方法-CN201610214900.5有效
发明人：康振;陈坚;金鹏;堵国成;丁雯雯 -专利权人：江南大学
申请日： 2016-04-07 - 公布日： 2020-12-01 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于耐热DNA聚合酶和连接酶的体外快速无缝组装DNA的方法，属于基因工程技术领域。本发明在需要组装构建的目标片段两末端引入同源臂序列，采用热循环进行变性‑退火‑切割‑连接的方式，实现快速体外DNA组装构建。在2h内一次可以实现2‑6个片段的高效快速的无缝组装。此外，可通过在引物中引入兼并突变序列实现PCR扩增后获得含有不同突变区域的DNA片段，进而通过本组装方法实现对基因DNA的组装突变构建。本发明可用于常规的DNA重组构建，并实现高通量操作，特别适合于对酶基因和合成途径的体外高效进化改造上，引入丰富的组合突变多样性，进行快速定向进化和合成生物学操作。
一种基于耐热 dna 聚合连接酶体外快速无缝组装方法

[发明专利]一种检测DNA甲基化转移酶的纳米金生物传感器、其检测方法及应用-CN202010831729.9有效
发明人：张春阳;王黎娟;韩笑 -专利权人：山东师范大学
申请日： 2020-08-18 - 公布日： 2023-05-05 - 主分类号： C12Q1/48 文献下载
摘要：本发明属于DNA甲基化转移酶检测技术领域，具体涉及一种检测DNA甲基化转移酶的纳米金生物传感器、其检测方法及应用。本发明的方法可以同时检测多种DNA甲基化转移酶，并且该方法特异性好，灵敏度高。本发明使用甲基介导的核酸内切酶GlaI来切割的5‑甲基胞嘧啶(5‑mC)的特异性位点，并且将单分子检测与信号探针的循环裂解相结合，可用于单分子水平上同时检测多种DNA甲基化转移酶；进一步还可以用于区分不同种类的DNA甲基化转移酶，筛选潜在的抑制剂，并可测量人血清样品中DNA甲基化转移酶的活性，在生物医学研究，临床诊断，药物发现和癌症治疗方面具有巨大的潜力。
一种检测 dna 甲基化转移酶纳米生物传感器方法应用

[发明专利]可循环检测痕量铀酰离子的生物传感芯片及其制备方法、应用方法-CN201910483414.7在审
发明人：何璇;刘渝 -专利权人：中国工程物理研究院化工材料研究所
申请日： 2019-06-04 - 公布日： 2019-08-09 - 主分类号： C12Q1/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种可循环检测痕量铀酰离子的生物传感芯片及其制备方法、应用方法，该芯片由ZnO‑Ag复合材料基底、核苷酸序列，5’端偶联巯基、3’端偶联荧光染料RhB的序列片段组成。所述芯片由复合材料与生物传感探针构成，共价连接在芯片上的DNAzyme可以对铀酰离子有特异性响应，生物活性被激活，使得底物链断裂成两段自由的DNA，修饰于一段DNA上的荧光分子，由于DNA序列的断裂，坠落到同时，通过修补断裂后的序列，该生物传感探针可以循环使用，达到高效检测、降低成本的目的。
离子生物传感芯片断裂生物传感芯片复合材料可循环痕量偶联探针制备核苷酸序列特异性响应高效检测共价连接基底表面可重现性生物活性序列片段荧光分子荧光染料底物链可检测灵敏度检测基底两段巯基修饰应用坠落修补激活自由

[发明专利]一种基于加尾引物设计的Sanger测序方法-CN202210358213.6在审
发明人：陈志宏;吴水英;陈琰 -专利权人：厦门飞朔生物技术有限公司
申请日： 2022-04-06 - 公布日： 2022-07-05 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明涉及基因测序的技术领域，特别是一种基于加尾引物设计的Sanger测序方法，包括如下步骤：(1)根据样本DNA选择特异性引物序列，之后在特异性引物序列的5’端加上通用引物序列得到加尾引物序列，根据加尾引物序列合成加尾引物；(2)使用加尾引物配制PCR扩增反应液，加入样本DNA，执行PCR扩增程序，得到PCR扩增产物；(3)PCR扩增产物进行纯化；(4)选择通用引物作为测序引物,对纯化的PCR扩增产物进行循环测序反应；(5)循环测序反应产物经过纯化、变性、上机测序得到样本DNA的序列，本发明通过通用序列和特异性序列引物的结合不仅可以节省Sanger测序的工作量，也可以降低引物加错的可能性。
一种基于引物设计 sanger 方法

[发明专利]一种利用SCAR技术鉴别金龙胆草及其混淆品的SCAR引物及其方法-CN201310373522.1无效
发明人：陈惠;刘姗;孙荣;唐自钟;高静雷;李成磊;韩学易;吴琦;黄晓燕 -专利权人：四川农业大学
申请日： 2013-08-23 - 公布日： 2014-02-19 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用SCAR技术鉴别金龙胆草及其混淆品的SCAR引物及其方法，提取混淆品植物的基因组DNA，将样品的基因组DNA进行SCAR-PCR扩增，其SCAR-PCR扩增体系为：25μL体系中含有Mg2+2.5mmol/L，dNTPs4.5mmol/L，引物SC1、引物SC2各1.5μmol/L，DNA模板60ng，Taq酶1.5U；扩增程序为：94℃预变性4min，然后进行40个循环：94℃变性1min、36℃复性1min、72℃延伸2min，循环结束后72℃延伸10min，4℃保存；扩增结果有目的条带的即为金龙胆草真品。
一种利用 scar 技术鉴别龙胆及其混淆引物方法

[发明专利]多重PCR定量检测仪-CN200410066294.4无效
发明人：聂智明 -专利权人：聂智明
申请日： 2004-09-10 - 公布日： 2006-03-15 - 主分类号： G01N33/50 文献下载
摘要：多重PCR定量检测仪，包括荧光检测装置、热循环仪、控制系统、开关电源、PC机、应用软件包。其特点在于在DNA模板在热循环仪的温度环境下，DNA扩增过程中利用荧光染料在光刺激下释放的荧光能量的变化反映出DNA扩增产物量的变化，荧光信号变量和扩增产物变量成正比，并通过足够灵敏的光电检测器件实现对荧光的采集
多重 pcr 定量检测

[实用新型]多重PCR定量检测仪-CN200420090020.4无效
发明人：聂智明 -专利权人：聂智明
申请日： 2004-09-14 - 公布日： 2006-04-26 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：多重PCR定量检测仪，包括荧光检测装置、热循环仪、控制系统、开关电源、PC机、应用软件包。其特点在于在DNA模板在热循环仪的温度环境下，DNA扩增过程中利用荧光染料在光刺激下释放的荧光能量的变化反映出DNA扩增产物量的变化，荧光信号变量和扩增产物变量成正比，并通过足够灵敏的光电检测器件实现对荧光的采集
多重 pcr 定量检测

[发明专利]一种用于稳定保存外周血中循环游离DNA的溶剂-CN201710059736.X在审
发明人：梁建国 -专利权人：梁建国
申请日： 2017-01-24 - 公布日： 2018-07-31 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开一种用于稳定保存外周血中循环游离DNA的溶剂。本发明的溶剂可以确保将外周血中游离DNA在常温下稳定保存9天，在37℃环境下可达15天，避免受外来微生物的污染，并且能够抑制血液中细胞基因组DNA的释放，保证游离DNA的量在此期间内不会发生明显变化。
游离DNA 溶剂外周血保存缓冲剂蛋白酶抑制剂核酸酶抑制剂代谢抑制剂体积百分比细胞基因组防腐剂常温下抗凝剂无菌水微生物血液释放污染保证

[发明专利]一种体外快速组装非磷酸化DNA片段的方法-CN201610543258.5有效
发明人：康振;陈坚;堵国成;丁雯雯;金鹏 -专利权人：江南大学
申请日： 2016-07-11 - 公布日： 2020-06-09 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种体外快速组装非磷酸化DNA片段的方法，属于基因工程技术领域。本发明在需要组装构建的目标片段两末端引入同源臂序列，采用热循环进行变性‑退火‑切割‑连接的方式，实现快速体外DNA组装构建。在1.5h内一次可以实现2‑4个非磷酸化DNA片段的高效快速的无缝组装。本发明可用于常规的DNA重组构建，并实现高通量操作，特别适合于对酶基因和合成途径的体外高效组装上，可引入丰富的组合突变多样性，进行快速定向进化和合成生物学操作。
一种体外快速组装磷酸化 dna 片段方法

[发明专利]一种基于无酶催化自组装的单个量子点荧光纳米传感器及其制备方法和应用-CN201910677378.8有效
发明人：张春阳;马飞;张倩 -专利权人：山东师范大学
申请日： 2019-07-25 - 公布日： 2022-05-27 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于无酶催化自组装的单个量子点荧光纳米传感器及其制备方法和应用，由两个发夹DNA探针、链霉亲和素蛋白修饰的量子点组成，其中一个发夹DNA探针为生物素标记的捕获探针，另一个发夹DNA探针为荧光团花菁5标记的信号探针，两个发夹DNA探针组装在链霉亲和素蛋白修饰的量子点(SA‑QDs)表面，形成单个量子点荧光纳米传感器。在检测癌细胞中的内源性microRNA和患者血液样本中的循环microRNA中具有应用，具有高选择性。
一种基于催化组装单个量子荧光纳米传感器及其制备方法应用

[发明专利]一种光致电化学生物传感器及其制备方法和应用-CN202010549247.4有效
发明人：接贵霞;接贵芬 -专利权人：青岛科技大学
申请日： 2020-06-16 - 公布日： 2022-11-15 - 主分类号： C12Q1/682 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于DNA纳米树枝放大信号的光致电化学生物传感器及其制法和应用；本发明的技术方案是利用痕量DNA引发外切酶III辅助循环放大反应，从而产生大量产物链，将DNA滚环放大与链式杂交相结合形成纳米树枝，利用大量卟啉锰嵌入纳米树枝从而淬灭硫化铋光电信号，制备了一种简便、实用的光致电化学(PEC)传感器，实现了对痕量DNA的超灵敏检测，该研究在临床诊断、基因治疗、环境监测、食品安全等领域具有很好的应用潜力
一种致电化学生物传感器及其制备方法应用

[发明专利]一种定量检测产2-甲基异莰醇菌株的方法及装置-CN201810724287.0在审
发明人：陈蕾;姜蕾 -专利权人：上海城市水资源开发利用国家工程中心有限公司
申请日： 2018-07-04 - 公布日： 2018-11-13 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本发明公开了一种定量检测产2‑甲基异莰醇菌株的方法及装置，该方法包括：取地表水水样，经过微孔过滤后，将滤膜进行总DNA提取纯化，得到DNA样本；以获得的DNA样本为模板进行PCR扩增；对PCR扩增产物进行纯化；将纯化后的DNA进行质粒转化过程，获得转化了质粒的白色菌落；选取饱满的单菌落接种于培养液中振荡培养过夜，以用于菌液PCR鉴定和测序分析；将经过鉴定分析的白色菌落提取质粒，测定质粒浓度后梯度稀释，将稀释后的质粒作为标准样品，建立标准样品浓度与临界循环数对应的标准曲线；取之前得到的DNA样本作为模板，进行定量PCR测定获得待测样本，根据所述标准曲线确定待测样本中产2‑甲基异莰醇菌株的浓度。
质粒菌株白色菌落标准样品待测样本定量检测培养液标准曲线确定临界循环数总DNA提取标准曲线测序分析鉴定分析梯度稀释微孔过滤振荡培养质粒转化定量PCR 单菌落菌液滤膜水样稀释地表水接种转化