本发明公开了一种提升蛋白翻译效率的基因及其编码产物与应用,其中,一种真核细胞多聚腺苷酸合成酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:4所示;编码上述的一种真核细胞多聚腺苷酸合成酶的一种提升蛋白翻译效率的CrePAPS基因,所述CrePAPS基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:3所示。本发明可以通过CrePAPS基因的导入,可以编码得到具有加尾活性的真核细胞多聚腺苷酸合成酶,其可以向菌株中pre‑mRNA的3’端添加多聚腺苷酸尾巴,进而显著提高mRNA的聚腺苷酸化,实现mRNA稳定性和翻译效率的提升
本发明公开了一种全基因组沉默子筛选系统,该系统包括MAS‑seq载体,该MAS‑seq载体包括强启动子、同源臂、标记基因、poly A位点,该MAS‑seq载体的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。该MAS‑seq载体在同源臂间插入沉默子序列时,可以大大降低标记基因mRNA的表达丰度,通过测序检测标记基因mRNA的表达量,表达量低的即表明插入序列为沉默子序列。由此可以用于大规模筛选基因组沉默子,该系统灵敏,且操作便捷,可大规模使用和广泛应用。
本发明提供了两个内参基因UIMC1和RNF25在检测外泌体mRNA表达水平中的应用。并且,本发明还提供了试剂盒,其包含UIMC1基因的正向引物SEQ ID NO:1和反向引物SEQ ID NO:2,以及RNF25基因的正向引物SEQ ID NO:4和反向引物SEQ ID NO:5。在相同个体的不同时间点以及在不同个体之间,这两个内参基因的表达比较稳定,尤其是这两个基因二者之间的相对表达水平更为稳定,可用于校正外泌体中mRNA的表达水平,还可以用于尿路系统癌症检测。
本发明公开了一种肺特异性X蛋白基因mRNA表达量的检测试剂盒及其专用引物与探针。该专用引物是由序列表中的SEQ ID No:1和SEQ ID No:2组成的引物对。试剂盒包括权利要求1和权利要求2所述的检测肺特异性X蛋白基因mRNA表达量的专用引物和探针。本发明提供了一种检测人外周血中肺特异性X蛋白(LUNX)基因mRNA表达量的试剂盒。本发明所提供的试剂盒可用于临床及科研中对肿瘤患者的外周血、骨髓中LUNX mRNA的表达情况进行定性及定量分析,对判断肺癌的发生、转移、复发,治疗效果评价及病情的动态观察具有重要意义。
本发明公开了一种用于预示和诊断胃肠肿瘤的检测方法及其试剂盒和基因芯片,该方法包括以下步骤:(1)获取待测样品;(2)检测选自下列编码mRNA基因在样品中是否过表达,所述基因为具有SEQ ID No:39的CST1基因;或特异性识别CST1基因的mRNA、CST1剪切子(SEQ ID No:43,SEQ ID No:44)、CST1基因的cDNA、CST1剪切子的cDNA的其中一种的引物或/和探针所识别的基因;或通过至少一种CST1引物对应的扩增子所鉴定的基因。