本发明属于生物酶技术领域,具体涉及病毒来源的几丁质合成酶的表达纯化方法及其用途。一种病毒来源的几丁质合成酶的表达纯化方法,包括:对病毒来源的几丁质合成酶基因序列按照大肠杆菌密码子偏好性进行密码子优化,得到核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的基因序列;将优化后的基因序列全基因合成至表达载体上;含有表达载体的宿主经培养、诱导、裂解和离心,获得含病毒来源的几丁质合成酶的膜组分。本发明提供了一种病毒来源的几丁质合成酶的纯化方法,利用大肠杆菌异源表达与类生物膜体系分离纯化的策略,通过该策略可以获得高纯度的病毒来源的几丁质合成酶。并提供了一种合成低聚几丁寡糖的新方法,且反应体系组成简单,产物易于分离纯化。
本发明公开了盾叶薯蓣来源的薯蓣皂素合成相关蛋白及编码基因与应用。本发明提供的盾叶薯蓣来源的薯蓣皂素合成相关蛋白为SEQ ID No.9和SEQ ID No.7所示的两个蛋白质。利用本发明所提供的盾叶薯蓣来源的薯蓣皂素合成相关基因,与细胞色素P450还原酶编码基因一起导入能够合成胆固醇的酿酒酵母菌,能够得到能够合成薯蓣皂素的酿酒酵母工程菌株。本发明实现了酿酒酵母薯蓣皂素的生物合成。
本发明公开了一种α‑檀香烯合成酶、基因及应用。所述α‑檀香烯合成酶来源于温郁金(Curcuma wenyujin Y.H.Chen et C.Ling),氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示。本发明对温郁金来源的α‑檀香烯合成酶进行功能验证并在大肠杆菌中进行α‑檀香烯合成方法的发明与应用。发现温郁金来源的α‑檀香烯合成酶可在原核表达体系中催化FPP生成大量的α‑檀香烯、以及少量的β‑檀香烯和α‑法尼烯,根据峰面积计算α‑檀香烯的含量达到了90%以上,从而在大肠杆菌中快速,大量地制备所述的催化剂,并应用于α‑檀香烯的合成,进一步可应用于α‑檀香醇的合成,具有重要的意义。
本发明属于生物医药领域,具体涉及一种谷胱甘肽合成酶的制备方法及催化生产谷胱甘肽的方法。本发明所述方法对Listeria monocytogenes来源gshF基因序列进行优化后得到SEQ ID NO.1所示碱基序列,以此为模板构建工程菌;通过对发酵培养基的优化,最终获得了高活性的Listeriamonocytogenes来源的谷胱甘肽合成酶。本发明所述方法制备得到的Listeria monocytogenes来源的谷胱甘肽合成酶催化生产谷胱甘肽效率高。