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[发明专利]一种从骨髓中分离血管内皮前体细胞并在体外培养的方法-CN200510028994.9无效
发明人：林昕 -专利权人：上海市上海中学
申请日： 2005-08-22 - 公布日： 2007-02-28 - 主分类号： C12N5/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种从骨髓中分离血管内皮前体细胞并在体外培养的方法，其特征在于以下步骤：1).收获骨髓细胞；2).收集单个核细胞；3).制备EBM－2细胞培养液；4).细胞原代培养；5).细胞传代培养。在步骤3)的制备EBM－2细胞培养液中加入bFGF和VEGF生长因子促进了血管内皮前体细胞的增殖。因此本发明能够在短时间内获得大量的血管内皮前体细胞。
一种骨髓分离血管内皮体细胞体外培养方法

[发明专利]一种油杉体细胞胚发生体系的建立方法及其应用-CN202210983857.4有效
发明人：韩学敏;曾庆银;王丹;金宇霆 -专利权人：中国林业科学研究院
申请日： 2022-08-17 - 公布日： 2023-05-09 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种油杉体细胞胚发生体系的建立方法及其应用，属于林业中细胞工程种苗繁殖领域。本发明所述油杉体细胞胚发生体系的建立方法包括：以未成熟合子胚为外植体进行诱导培养、增殖培养、调整培养和成熟培养，分化形成体细胞胚。本发明所述方法成功建立了油杉体细胞胚胎发生体系，突破了油杉营养繁殖困难，生长周期长，发芽率低等瓶颈，成为林木快速繁殖、优异性状保持和品种改良的一条新兴途径。
一种体细胞发生体系建立方法及其应用

[发明专利]褐色脂肪细胞的制备方法-CN202080081325.0在审
发明人：戴平;武田行正;原田义规;松本润一 -专利权人：株式会社片冈制作所;京都府公立大学法人
申请日： 2020-11-18 - 公布日： 2022-07-08 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明的课题在于提供能够在不进行基因导入的情况下利用低分子化合物进行从体细胞向褐色脂肪细胞的直接转变或诱导的新的制造方法。作为本发明，例如，可以举出褐色脂肪细胞的制备方法，其是通过直接分化诱导从体细胞制备褐色脂肪细胞的方法，该方法包括：在选择性PPARγ激动剂及cAMP诱导剂的存在下，在无血清的分化诱导用培养基中对体细胞进行培养的工序根据本发明，可以在不进行基因导入的情况下有效地进行从体细胞向褐色脂肪细胞的直接转变或诱导。利用本发明得到的褐色脂肪细胞作为再生医疗、人褐色脂肪细胞及人米色细胞模型等是有用的。
褐色脂肪细胞制备方法

[发明专利]从血液中分离、培养细胞的方法及进行克隆非人动物的方法-CN201310461790.9有效
发明人：杨珍珍;徐颖;林木飞;杜玉涛 -专利权人：深圳华大方舟生物技术有限公司;深圳华大基因科技有限公司
申请日： 2013-09-29 - 公布日： 2018-01-12 - 主分类号： C12N5/078 文献下载
摘要：本发明提供了一种从血液中分离、培养细胞的方法以及一种对非人动物进行克隆的方法。所述从血液中分离、培养细胞的方法包括以下步骤将所述血液加入到分离液上层后利用密度梯度离心的方式进行离心，以便获得单个核细胞；将所述单个核细胞接种于含有贴壁细胞培养基的体外培养设备，以便获得贴壁细胞；以及将所述贴壁细胞进行传代培养，以便获得体细胞核移植的供体细胞。该方法获得的体细胞核移植的供体细胞可以直接用于手工克隆非人动物，不仅操作过程简单、易于实现、成本较低，且该方法对动物应激刺激少、伤害小，可以保证动物的完整外观、改善动物福利。
血液分离培养细胞方法进行克隆非人动物

[发明专利]视网膜节细胞的制备方法-CN201810490491.0在审
发明人：陈舒怡;郝莉莉;王静 -专利权人：中山大学中山眼科中心
申请日： 2018-05-21 - 公布日： 2019-10-08 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明提供一种视网膜节细胞的制备方法，包括如下步骤：获取体细胞；构建慢病毒颗粒，用所述慢病毒颗粒转染所述体细胞，从而将Ascl1基因、Islet1基因、Brn3b基因整合到体细胞染色体上；诱导培养，获得视网膜节细胞所得到的视网膜节细胞，通过将外源Ascl1基因、Islet1基因、Brn3b基因整合到小鼠成纤维细胞染色体上过表达制备获得。与现有技术相比，本发明创造性地挑选Ascl1基因、Brn3b基因和Islet1基因的组合，通过慢病毒介导的方式使这三个转录因子在体细胞中过表达，能够在诱导培养7天的情况下，实现超过10％的体细胞转分化为Brn3a阳性、Tuj1阳性的视网膜神经节样细胞，效率高。
视网膜节细胞基因体细胞制备慢病毒颗粒基因整合诱导培养小鼠成纤维细胞体细胞染色体视网膜神经转录因子慢病毒染色体构建介导外源转染分化细胞

[发明专利]利用牛体细胞核移植克隆胚胎的方法-CN200810115821.4无效
发明人：于孟飞;易建明;高国龙;杨利国 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2008-06-27 - 公布日： 2008-11-12 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明属于哺乳动物繁殖技术领域，具体涉及一种利用牛体细胞获得克隆胚胎的方法。公开了一种简单高效生产牛克隆胚胎的方法。根据猪体细胞膜在注入卵胞质内会在30min后自动溶解消失的研究成果，在牛中提出采用不破膜的全细胞为供体进行全细胞胞质内直接注射构建牛克隆胚胎；从而简化了体细胞核移植的操作流程。发明特征是：(1)牛卵丘－卵母细胞复合体的采集与培养；(2)卵母细胞的去核；(3)供体细胞的制备；(4)共培养细胞单层的制备；(5)重构胚的构建；(6)重构胚的激活；(7)重构胚的培养等。本发明最大的特点是易于操作、步骤简单、结果稳定，为牛体细胞核移植技术的推广以及进一步研究提供了一种新的思路和方法。
利用体细胞移植克隆胚胎方法

[发明专利]制备多能干细胞的材料和方法-CN200980162975.1有效
发明人：郭礼和;刘天津 -专利权人：中美赛傲（上海）生物技术有限公司;中美国联（上海）生物技术研究有限公司
申请日： 2009-12-18 - 公布日： 2012-10-10 - 主分类号： C12N5/07 文献下载
摘要：本发明公开一种将体细胞重编程，制备诱导多能干（iPS）细胞的方法，得到的iPS细胞可以分化为外胚层、中胚层和内胚层的体细胞。此外本发明提供所述iPS细胞，制备和维持iPS细胞的方法，以及iPS细胞应用的方法。
制备多能干细胞材料方法

[发明专利]利用多能干细胞制备神经前体细胞的方法-CN201410625288.1有效
发明人：乐卫东;杨娟;唐宇 -专利权人：中国科学院上海生命科学研究院
申请日： 2014-11-07 - 公布日： 2020-04-07 - 主分类号： C12N5/0797 文献下载
摘要：本发明涉及利用多能干细胞制备神经前体细胞的方法。首次揭示一种可显著提高多能干细胞向神经前体细胞分化效率的方法，通过采用组蛋白去乙酰化酶抑制剂作为诱导剂来提高多能干细胞分化为神经前体细胞的效率。此外，还揭示了通过在多能干细胞中下调HDAC3或SMRT的表达或活性的方式来提高分化效率的方法。
利用多能干细胞制备神经体细胞方法

[发明专利]肝星状细胞前体及其分离方法-CN200780026863.4有效
发明人： H·库伯塔;洛拉·M·里德 -专利权人：北卡罗来纳大学教堂山分校
申请日： 2007-05-24 - 公布日： 2009-10-07 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明涉及肝星状细胞的前体细胞、包含所述前体细胞的组合物以及分离所述前体细胞的方法。除了这些表面标志物的表达外，细胞还表达细胞内标志物结蛋白、波形蛋白、平滑肌α-肌动蛋白、巢蛋白、肝细胞生长因子、间质衍生因子-1α和Hlx同源异形框转录因子。
星状细胞及其分离方法

[发明专利]造血干细胞和/或造血前体细胞的增殖和/或分化促进剂-CN02807279.0无效
发明人：三浦健寿;春山宗忠;児玉志保 -专利权人：第一三得利制药株式会社;株式会社第一三得利生物医学研究所
申请日： 2002-12-27 - 公布日： 2004-05-26 - 主分类号： A61K38/17 文献下载
摘要：本发明提供造血干细胞和/或者造血前体细胞的增殖和/或者分化促进剂，此促进剂可作为药物用于治疗因造血干细胞和/或者造血前体细胞的增殖和/或者分化不足引发的疾病，尤其用于各型造血细胞减少症和/或造血功能低下相关疾病的治疗本发明提供了含Cofilin为活性成分的造血干细胞和/或者造血前体细胞的增殖和/或者分化促进剂。
造血干细胞体细胞增殖分化促进剂

[发明专利]miR-125b在红细胞成熟化中的用途-CN201210479480.5有效
发明人：裴雪涛;岳文;谢小燕;李艳华;姚海雷;习佳飞;周军年;曾泉;房芳 -专利权人：中国人民解放军军事医学科学院野战输血研究所
申请日： 2012-11-22 - 公布日： 2013-05-01 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明涉及miR-125b在红细胞成熟化中的用途。其中，制备成熟红细胞的方法包括：使红细胞前体细胞表达miR-125b，所述miR-125b具有SEQ IDNO：1所示的核苷酸序列；以及培养所述表达miR-125b的红细胞前体细胞，以便获得成熟红细胞，其中，所述红细胞前体细胞为选自原成红细胞、嗜碱性成红细胞、多染性成红细胞、正染性成红细胞和网织红细胞的至少一种。利用该方法能够有效地制备成熟红细胞。
mir 125 红细胞成熟中的用途

[发明专利]一种检测肿瘤异质性程度的方法及系统-CN202010231560.3在审
发明人：金皓玄;方文峰;陈龙昀;苏小凡;廖裕威 -专利权人：深圳裕策生物科技有限公司
申请日： 2020-03-27 - 公布日： 2020-07-10 - 主分类号： G16B20/30 文献下载
摘要：本发明提供一种检测肿瘤异质性程度的方法及系统，该方法包括：获取肿瘤组织样本和对照样本的测序数据，进行体细胞变异检测，获得体细胞变异位点；将体细胞变异位点按簇进行聚类；根据聚类结果，判断主克隆突变簇和亚克隆突变簇；计算肿瘤组织样本中亚克隆突变簇中的体细胞变异数量占所有体细胞变异数量的比值，该比值即为肿瘤异质性数值。本发明充分利用样本各突变位点检测的突变频率，估算出对应肿瘤克隆的细胞占比，从而推算出肿瘤异质性程度的具体数值，为后续预测免疫治疗疗效提供了一个数值上可以参考的依据。
一种检测肿瘤异质性程度方法系统

[发明专利]L-plastin蛋白抑制剂在抑制破骨前体细胞融合中的应用-CN202010872565.4在审
发明人：苏佳灿;陈啸飞;陈晓;李啸群;王立鹏;顾妍秋 -专利权人：中国人民解放军海军军医大学第一附属医院
申请日： 2020-08-26 - 公布日： 2020-11-20 - 主分类号： A61K45/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种L‑plastin蛋白抑制剂在抑制破骨前体细胞融合中的应用。本发明首先发现了L‑plastin对破骨前体细胞融合的影响，并进一步验证了PI3K‑AKT‑SP1信号通路通过调节L‑plastin调节破骨前体细胞融合，并促进了H型血管的生成，抑制破骨前体细胞融合成成熟破骨细胞，同时，破骨前体细胞可促进H型血管(CD31hiEMCNhi内皮血管)的生成，促进成骨。
plastin 蛋白抑制剂抑制破骨前体细胞融合中的应用

[发明专利]一种剔除β2-微球蛋白基因片段的方法-CN201510023650.2有效
发明人：王朔;朱海宝 -专利权人：深圳市科晖瑞生物医药有限公司
申请日： 2015-01-16 - 公布日： 2015-05-13 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本发明公开一种剔除β2-微球蛋白基因片段的方法，包括如下步骤:(1)构建CRISPR/Cas9载体系统；(2)利用构建的CRISPR/Cas9载体系统将目的基因导入受体细胞,剔除β2-微球蛋白基因片段；(3)对转染后的受体细胞进行检测和鉴定。本发明公开的方法是一个新的靶向剔除人体细胞基因的遗传工程方法。此方法利用杆状病毒载体作为传递系统，在人体细胞内高效表达剔除B2M基因的特异性CRISPR/Cas9组件，有效阻断B2M基因表达，降低细胞表面第一型HLA分子的表达，从而产生低免疫源性的人体细胞。
一种剔除球蛋白基因片段方法

[发明专利]一种哺乳动物体细胞核移植方法-CN200510023872.0无效
发明人：曾溢滔;杨晓煜;黄淑帧 -专利权人：上海交通大学附属儿童医院;上海滔滔转基因工程股份有限公司
申请日： 2005-02-04 - 公布日： 2006-08-09 - 主分类号： C12N5/06 文献下载
摘要：本发明提供了一种哺乳动物体细胞核移植方法，其主要特点在于以哺乳动物的杂交F1代的卵母细胞作为受体细胞进行核移植。本发明的方法能够显著地提高哺乳动物核移植受体胞质的重编程能力，改善重构胚的发育，从而提高体细胞克隆效率。
一种哺乳物体细胞核移植方法