本发明公开了一种面包乳杆菌来源的乳酸脱氢酶，其乳酸脱氢酶的基因序列如SEQ ID No.1所示，乳酸脱氢酶的蛋白质序列如SEQ ID No.2所示。所述乳酸脱氢酶的来源是面包乳杆菌。所述乳酸脱氢酶具有将酮酸转化为乳酸的活性，可用于乳酸的制备、体外诊断试剂盒的开发。本发明得到的一种面包乳杆菌来源的乳酸脱氢酶，可通过大肠杆菌原核表达和真核表达系统获得，并制备纯酶或粗酶液或用于生物催化反应。利用制得的乳酸脱氢酶，在磷酸盐缓冲液体系中，在25℃条件下，可将丙酮酸转化为乳酸，其转化率达到了94%以上。
本发明公开了一种坎德勒氏乳杆菌来源的乳酸脱氢酶，其乳酸脱氢酶的基因序列如SEQ ID No.1所示，乳酸脱氢酶的蛋白质序列如SEQ ID No.2所示。所述乳酸脱氢酶的来源是坎德勒氏乳杆菌。所述乳酸脱氢酶具有将酮酸转化为乳酸的活性，可用于D‑乳酸的制备、体外诊断试剂盒的开发。本发明得到的一种坎德勒氏乳杆菌来源的乳酸脱氢酶，可通过大肠杆菌原核表达和真核表达系统获得，并制备纯酶或粗酶液或用于生物催化反应。利用制得的乳酸脱氢酶，在磷酸盐缓冲液体系中，在25℃条件下，可将丙酮酸转化为乳酸，其转化率达到了93%以上。
本发明公开了一种弓形虫基因敲除虫株的构建方法，该方法敲除了弓形虫乳酸脱氢酶1和乳酸脱氢酶2两个基因，所述乳酸脱氢酶1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述乳酸脱氢酶2基因的核苷酸序列如SEQID NO：2所示，所述弓形虫基因敲除虫株在乳酸脱氢酶1和乳酸脱氢酶2位点分别具有如SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：3所示核苷酸序列。
本发明公开了一种L－乳酸脱氢酶基因、包括该基因的重组载体及其宿主细胞，L－乳酸脱氢酶基因具有序列表中SEQ ID No.5所述的核苷酸序列；一种包括L－乳酸脱氢酶基因的重组载体，通过PCR扩增出的L－乳酸脱氢酶的开放阅读框架，回收得到951bpDNA片段，与pGEM－T Easy或pET－28a(+)加入T4连接酶，进行连接反应，制成重组载体pLZD3084，或pLOD3083，将重组载体转化到宿主大肠杆菌的细胞中，得到重组微生物，在本发明的基础上，可进一步研究L－乳酸脱氢酶基因的缺失，缺失L－乳酸脱氢酶基因的乳杆菌将可以发酵生产高光学纯度的D－乳酸，从而可以大大降低D－乳酸的生产成本。
