[发明专利]改进的多核苷酸序列检测方法有效

申请号：	201980048406.8	申请日：	2019-07-19
公开（公告）号：	CN112424379B	公开（公告）日：	2022-07-15
发明（设计）人：	巴纳比·巴姆福思;卡梅伦·弗雷林;安娜·席尔瓦-韦瑟利;马格达莱纳·斯托拉雷克-雅努什凯维奇	申请（专利权）人：	生物保真有限公司
主分类号：	C12Q1/6858	分类号：	C12Q1/6858
代理公司：	北京安信方达知识产权代理有限公司 11262	代理人：	王玮玮;郑霞
地址：	英国剑***	国省代码：	暂无信息
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摘要：	一种检测给定核酸分析物中的靶多核苷酸序列的方法，其特征在于以下步骤：a.将分析物退火至单链探针寡核苷酸A0，以产生为至少部分双链并且其中A0的3’末端与分析物靶序列形成双链复合物的第一中间产物；b.使用焦磷酸解酶从A0的3’末端在3’‑5’方向上焦磷酸解第一中间产物，以产生部分消化的链A1和分析物；c.(i)将A1退火至单链触发寡核苷酸B，并在5’‑3’方向上针对B延伸A1链；或者(ii)通过连接A1的3’和5’末端使其环化；或者(iii)将A1的3’末端连接到连接探针寡核苷酸C的5’末端；在每种情况下产生寡核苷酸A2；d.用至少一种单链引物寡核苷酸引发A2，并产生A2或A2的区域的多于一个拷贝；和e.检测来源于多于一个拷贝的信号，并从其推断分析物中存在或不存在多核苷酸靶序列。
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摘要：一种检测给定核酸分析物中的靶多核苷酸序列的方法，其特征在于以下步骤：a.将分析物退火至单链探针寡核苷酸A0，以产生为至少部分双链并且其中A0的3’末端与分析物靶序列形成双链复合物的第一中间产物；b.使用焦磷酸解酶从A0的3’末端在3’‑5’方向上焦磷酸解第一中间产物，以产生部分消化的链A1和分析物；c.(i)将A1退火至单链触发寡核苷酸B，并在5’‑3’方向上针对B延伸A1链；或者(ii)通过连接A1的3’和5’末端使其环化；或者(iii)将A1的3’末端连接到连接探针寡核苷酸C的5’末端；在每种情况下产生寡核苷酸A2；d.用至少一种单链引物寡核苷酸引发A2，并产生A2或A2的区域的多于一个拷贝；和e.检测来源于多于一个拷贝的信号，并从其推断分析物中存在或不存在多核苷酸靶序列。

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专利分类

C 化学；冶金

C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程
C12Q 包含酶或微生物的测定或检验方法
C12Q1-00 包含酶或微生物的测定或检验方法
C12Q1-02 .包含活的微生物
C12Q1-25 .包括无法分入C12Q 1/26至C12Q 1/70组中的酶
C12Q1-26 .包括氧化还原酶
C12Q1-34 .包括水解酶
C12Q1-48 .包括转移酶

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