[发明专利]一种增加多重PCR引物兼容性的方法在审
| 申请号： | 201811597559.1 | 申请日： | 2018-12-26 |
| 公开（公告）号： | CN109486921A | 公开（公告）日： | 2019-03-19 |
| 发明（设计）人： | 李艳艳;张通;靖相密 | 申请（专利权）人： | 山东艾克韦生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686 |
| 代理公司： | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人： | 张贵宾 |
| 地址： | 250000 山东省济南市高新*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种增加多重PCR引物兼容性的方法，属于生物检测领域。本发明针对每个靶基因设计一对特异性引物Fs、Rs以及通用引物Fg、Rg；先采用带有通用引物标签的特异性引物Fg+Fs、Rg+Rs进行富集扩增；然后采用通用引物标签Fg、Rg进行指数扩增；最后根据检测平台采取探针杂交或非探针杂交方式进行检测。此方法通过控制每一步PCR扩增使用的各反应组分浓度，如引物浓度、Mg2+浓度等，控制PCR扩增的反应条件，如：退火温度、退火时间等来实现多靶标基因的特异、灵敏扩增。本发明特异性强，可以保证不同病原体核酸的扩增效率相似，避免了传统多重PCR扩增的偏斜性；在进行检测时就不需要进行变性以解链。 | ||
| 搜索关键词： | 扩增 通用引物 退火 多重PCR引物 特异性引物 探针杂交 兼容性 检测 标签 生物检测领域 多重PCR扩增 病原体核酸 靶标基因 反应条件 扩增效率 特异性强 一步PCR 靶基因 变性 富集 解链 偏斜 引物 灵敏 保证 | ||
【主权项】：
1.一种增加多重PCR引物兼容性的方法，其特征在于：针对每个靶基因设计一对特异性引物Fs、Rs以及通用引物Fg、Rg；先采用带有通用引物标签的特异性引物Fg+Fs、Rg+Rs进行富集扩增；然后采用通用引物标签Fg、Rg进行指数扩增。
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