[发明专利]一种启动子组合控制的动态调控系统有效

专利信息
申请号: 201811493330.3 申请日: 2018-12-07
公开(公告)号: CN109576199B 公开(公告)日: 2020-09-04
发明(设计)人: 刘立明;高聪;侯建屾;叶超;陈修来;罗秋玲;刘佳 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: C12N1/21 分类号: C12N1/21;C12P7/42;C12R1/19
代理公司: 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 代理人: 张勇
地址: 214000 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种启动子组合控制的动态调控系统,具体公开了一种启动子组合控制的涉及动态调控系统及其在莽草酸生产中的应用,属于生物工程技术领域。本发明通过分子生物学手段,筛选出两类转录特征完全不同的启动子,即生长期关联启动子和稳定期启动子。利用蛋白酶特异性识别切割特定短肽的性质,设计构建出不需要借助人为控制和外源添加诱导剂的蛋白丰度调控系统。通过在工程大肠杆菌中引入靶向莽草酸激酶的动态调控基因线路,实现了在无机盐培养基中,不外源添加芳香族氨基酸和诱导剂生产莽草酸的能力。通过本发明生产的莽草酸产量可达21.2g/L,转化率达0.24g/g葡萄糖。
搜索关键词: 一种 启动子 组合 控制 动态 调控 系统
【主权项】:
1.一种基因工程菌,其特征在于,含有生长期关联启动子和稳定期关联启动子;所述生长期关联启动子连有添加了N末端切割短肽或N末端降解子的靶蛋白;所述稳定期关联启动子连有蛋白酶;所述N末端切割短肽或N末端降解子可被所述蛋白酶识别;所述蛋白酶包括TEV、TVMV、SuMMV或HICV;所述生长期关联启动子包括rpsM、rrnB P1、rpsT P2或rpsJ;所述稳定期关联启动子包括fic、bolA、S4或S60;所述rpsM、rrnB P1、rpsT P2、rpsJ、fic、bolA、S4、S60的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.8所示。
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