[发明专利]一种DNA甲基化程度的定量方法及应用在审
| 申请号： | 201810997175.2 | 申请日： | 2018-08-29 |
| 公开（公告）号： | CN109022556A | 公开（公告）日： | 2018-12-18 |
| 发明（设计）人： | 罗敏;赵勇娟;韩玥斌;刘焕 | 申请（专利权）人： | 天津智鱼生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人： | 巩克栋 |
| 地址： | 300382 天津市西青区李*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种DNA甲基化程度的定量方法及应用，所述方法包括以下步骤：(1)将亚硫酸盐修饰的DNA加入PCR体系，进行数字PCR；(2)根据DNA的甲基化拷贝数和非甲基化拷贝数，得到DNA的甲基化程度；其中，步骤(1)所述PCR体系包括Taqman探针，所述Taqman探针包括甲基化Taqman探针或非甲基化Taqman探针。本发明的方法将亚硫酸盐修饰的目的基因分别采用甲基化探针和非甲基化探针进行检测，基于数字PCR准确定量出待检测基因的甲基化拷贝数和非甲基化拷贝数，实现了对目的基因甲基化程度的绝对定量，适用于血液样本中微量ctDNA的检测，灵敏度高、特异性强、精准快捷，有利于在液体活检技术领域中的推广。 | ||
| 搜索关键词： | 甲基化 非甲基化 拷贝数 目的基因 亚硫酸盐 数字PCR 修饰 检测 甲基化探针 特异性强 血液样本 准确定量 灵敏度 探针 应用 基因 | ||
【主权项】：
1.一种DNA甲基化程度的定量方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)将亚硫酸盐修饰的DNA加入PCR体系，进行数字PCR；(2)根据DNA的甲基化拷贝数和非甲基化拷贝数，得到DNA的甲基化程度；其中，步骤(1)所述PCR体系包括Taqman探针，所述Taqman探针包括甲基化Taqman探针或非甲基化Taqman探针。
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