[发明专利]一种快速检测三种小麦根茎部病害的方法在审
申请号: | 201810950905.3 | 申请日: | 2018-08-21 |
公开(公告)号: | CN108893557A | 公开(公告)日: | 2018-11-27 |
发明(设计)人: | 于金凤;孙晓凤;李鹏昌;张德珍;徐娜娜;刘爱新 | 申请(专利权)人: | 山东农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04 |
代理公司: | 北京中济纬天专利代理有限公司 11429 | 代理人: | 张红军 |
地址: | 271018 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明属于植物保护领域,提供了一种快速检测三种小麦根茎部病害的方法。本发明在小麦苗期时对样本进行多重PCR检测,可以同时检测小麦纹枯病菌、小麦根腐病菌和小麦茎基腐病菌,为小麦根茎部病害的早期诊断和有效防治提供技术支持。该PCR检测方法具有特异、敏感、高效等优点,可应用于田间小麦样本根茎部病害的快速检测,具有较高的实际应用价值。 | ||
搜索关键词: | 根茎 病害 快速检测 小麦 样本 小麦根腐病菌 小麦纹枯病菌 植物保护领域 多重PCR检测 技术支持 小麦苗期 有效防治 早期诊断 小麦茎 病菌 应用 田间 敏感 检测 | ||
【主权项】:
1.一种快速检测三种小麦根茎部病害的方法,其特征在于,包括以下步骤:ST1 取样,田间取苗期植株;ST2 提取基因组DNA,采用改良的CTAB法提取基因组DNA;ST3 进行多重 PCR 反应,添加根据禾谷丝核菌rDNA‑ITS、麦根腐平脐蠕孢菌rDNA‑ITS、镰孢菌(Fusarium spp.)EF‑1α基因序列设计的引物各一对,添加Taq DNA聚合酶、d NTP,进行多重 PCR 反应,PCR扩增程序为:预变性 94℃,5 min;94℃变性30s,53.0‑63℃时退火30s,72℃延伸 1min,35个循环,72℃延伸 5 min;ST4 进行DNA电泳并分析。
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