[发明专利]一种负载BMSCs的胶原-柞蚕丝素蛋白复合支架的制备方法在审

专利信息
申请号: 201810344414.4 申请日: 2018-04-17
公开(公告)号: CN108619573A 公开(公告)日: 2018-10-09
发明(设计)人: 周艳芳;彭新生;崔碧玲;刘雯恩;范志强;李玉玲 申请(专利权)人: 广东医科大学
主分类号: A61L27/48 分类号: A61L27/48;A61L27/38;A61L27/60
代理公司: 东莞市华南专利商标事务所有限公司 44215 代理人: 王雪镅
地址: 523000 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明涉及医疗制剂技术领域,具体涉及一种负载BMSCs的胶原‑柞蚕丝素蛋白复合支架的制备方法。该负载BMSCs的胶原‑柞蚕丝素蛋白复合支架的制备方法包括:步骤一、胶原蛋白溶液的制备;步骤二、柞蚕丝素蛋白溶液的制备;步骤三、BMSCs悬液的制备;步骤四、复合支架的制备。本发明所制得的负载BMSCs的胶原‑柞蚕丝素蛋白复合支架具有良好的生物相容性,无炎症反应、毒性反应、免疫排斥反应等,细胞黏附力强,可促进皮肤创面修复。同时该复合支架能保持创面的湿度,防止体液与水分的流失;可提供生物屏障,防止创面感染、细菌侵入;并且具备一定的柔韧性和拉伸性能,在组织愈合期间保持其功能和形态。
搜索关键词: 复合支架 制备 柞蚕丝素蛋白 胶原 胶原蛋白溶液 免疫排斥反应 皮肤创面修复 生物相容性 创面感染 生物屏障 细胞黏附 炎症反应 医疗制剂 组织愈合 柔韧性 体液 拉伸 悬液 侵入 细菌
【主权项】:
1.一种负载BMSCs的胶原‑柞蚕丝素蛋白复合支架的制备方法,其特征在于:它包括以下步骤:步骤一、胶原蛋白溶液的制备:对富含胶原蛋白的动物组织进行提取胶原蛋白,得到粗提取液,然后将粗提取液进行纯化处理,得到纯胶原蛋白溶液;步骤二、柞蚕丝素蛋白溶液的制备:将柞蚕丝进行脱胶处理,再将处理后的柞蚕丝放入溶解液中加热溶解,得到柞蚕丝素蛋白粗提取液,然后将柞蚕丝素蛋白粗提取液进行过滤、透析处理,制得柞蚕丝素蛋白溶液;步骤三、BMSCs悬液的制备:用DMEM培养基反复冲洗来源于动物的骨髓腔,得到骨髓组织冲洗液,随后将骨髓组织冲洗液进行离心,然后弃去上清液后在培养液中重悬细胞,接种,然后置于培养箱中进行原代培养,一定时间后进行首次全量换液,保留贴壁细胞,之后隔一定时间换液,当保留的贴壁细胞达到一定百分比融合时,用胰酶消化,并进行离心后按一定比例进行细胞传代培养,然后选取BMSCs,进行消化和离心后,用培养基重悬,得到BMSCs悬液;步骤四、复合支架的制备:将步骤一制得的纯胶原蛋白溶液与步骤二制得的柞蚕丝素蛋白溶液分别用水稀释至一定的浓度,然后按比例进行混合,将混合液冷冻干燥,制得胶原‑柞蚕丝素蛋白复合支架,然后将制得的胶原‑柞蚕丝素蛋白复合支架进行消毒,再将步骤三得到的BMSCs悬液在胶原‑柞蚕丝素蛋白复合支架中培养一定时间,即制得所述负载BMSCs的胶原‑柞蚕丝素蛋白复合支架。
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  • 本发明公开了一种用于股骨修复的牡蛎壳生物相容仿生材料以及制备方法,其包括由下列重量份的原料:牡蛎壳超微粉40‑50、生物活性陶瓷颗粒20‑24、压电相陶瓷颗粒22‑28、聚乙烯吡咯烷酮5‑7、碳酸氢铵6‑7、纤维内钙10‑14、骨胶原50‑54、正硅酸溶液20‑22、聚丙烯氯化铵离子液15‑19、多壁钛酸盐纳米纤维21‑25、适量的乙醇、适量的磁活化水。本发明采用与人体骨成分接近的牡蛎壳开发用于股骨修复生物相容仿生材料,与骨组织具有良好的生物相容性,能够与骨形成牢固键合,能够有效地促进股骨修复,同时节省了成本。牡蛎壳经过高温煅烧的处理,克服了病害细菌的携带,具有环保可降解的优势。
  • 用于骨组织工程的多孔复合支架及其制备方法-201710956743.X
  • 郭瑞;刘玉;毛宇;蓝咏 - 广州贝奥吉因生物科技有限公司
  • 2017-10-12 - 2018-04-06 - A61L27/48
  • 本发明公开了一种用于骨组织工程的多孔复合支架,其制备原料包含以下重量份的组分100份的葡聚糖,1~7份的纳米微晶纤维素和11~33份的三偏磷酸钠。本发明多孔复合支架由葡聚糖和纳米微晶纤维素制得,纳米微晶纤维素均匀分布于支架中,使得支架力学性能优良,而且该支架具有良好的生物相容性,能够支持和促进髓间充质干细胞的软骨分化;(2)该复合多孔支架具有孔隙率高、孔径均匀的优点,并且可以在人体中及时完全降解,不会长期残留在人体中;(3)本发明将葡聚糖、纳米微晶纤维素通过多糖交联以及冷冻干燥的方法,形成葡聚糖/纳米微晶纤维素多孔支架,制备工艺简单、材料来源广泛,生产效率高,成本低,可应用于工业化大生产。
  • 一种氧化纳米纤维素/胶原蛋白复合海绵的制备方法-201510581018.X
  • 贺金梅;刘长瑜;黄玉东;尉枫;李纪伟;程风 - 哈尔滨工业大学
  • 2015-09-14 - 2017-11-24 - A61L27/48
  • 一种氧化纳米纤维素/胶原蛋白复合海绵的制备方法,属于生物医用复合材料技术领域。所述方法步骤如下一、胶原蛋白海绵的制备;二、纳米纤维素的制备;三、氧化纳米纤维素的制备;四、氧化纳米纤维素/胶原蛋白复合海绵的制备。本发明利用纤维素与胶原蛋白之间的氢键作用使纤维素在胶原溶液中较好的相容,最终使得胶原蛋白的物理机械性能提高,解决了胶原蛋白在单独使用过程中力学性能差、降解速度过快的问题。本发明制备的氧化纳米纤维素/胶原蛋白复合海绵吸水率下降50~60%,溶失率下降了30~40%,最大承受力增加了2~3倍。
  • 一种以取向纳米纤维毡为骨架的纳米软骨修复材料及其制备方法-201510545411.3
  • 何建新;谭卫琳;韩啟明;杨勇;王利丹;连艳平;崔世忠;丁彬 - 中原工学院
  • 2015-08-31 - 2017-11-24 - A61L27/48
  • 本发明涉及一种以取向纳米纤维毡为骨架的纳米软骨修复材料及其制备方法。通过静电纺丝技术制备含有石墨烯的取向纳米纤维毡为骨架,浇注含有丝素、透明质酸、硫酸软骨素、羟基磷灰石粒子的混合溶液,并通过交联技术和冷冻干燥制备而成。具体制备方法为配制含有石墨烯的丝素/透明质酸的混合溶液作为纺丝溶液,并通过静电纺丝得到取向的纳米纤维毡作为骨架,经戊二醛蒸汽交联稳定后;浇注丝素、透明质酸、硫酸软骨素、羟基磷灰石粒子混合溶液,然后利用交联剂在‑20℃~‑40℃进行交联反应,并在‑54℃条件下冷冻干燥制备而成。本发明制得的以取向纳米纤维毡为骨架的纳米软骨修复材料在成分和结构上仿生天然骨,具有很好的力学性能、合理的孔隙率以及良好的生物相容性和生物活性,可以作为软骨组织的修复或替代材料,具有广阔的应用前景。
  • 一种嵌合型组织工程牛心包片-201610021779.4
  • 李温斌;辛志飞;万居易;李殿坤;马小龙;龚达;张燕;许秀芳;辛毅;周子凡;徐志伟 - 李温斌
  • 2016-01-14 - 2017-07-21 - A61L27/48
  • 一种嵌合型组织工程牛心包片。牛心包中层是由细胞、基质、纤维三部分组成。纤维维持牛心包生物力学特性,细胞存在于纤维空隙中,通过基质成份与纤维形成连接。临床常用戊二醛处理的牛心包植入体内产生钙化、血栓形成和衰败的原因如下1.戊二醛固定方法能一定程度上降低免疫原性,但仍有异种细胞成分残留,具有细胞毒性,可诱发免疫排异反应,进一步引起组织钙化、衰败;2,中层空隙较小,机体细胞难以长入,并且诱发排斥反应的表位暴露;3,残留的醛基有细胞毒性,细胞很难存活,再生能力较低。为有效解决上述问题,在去细胞基础上再行类基质填充、交联,形成嵌合型组织工程牛心包片。
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