[发明专利]一种福寿螺GK小干扰RNA表达载体及其构建方法和应用在审
| 申请号： | 201810208895.6 | 申请日： | 2018-03-14 |
| 公开（公告）号： | CN108588104A | 公开（公告）日： | 2018-09-28 |
| 发明（设计）人： | 刘光富;俞晓平;张鹏军;申屠旭萍 | 申请（专利权）人： | 中国计量大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/66;C12N15/85;C12N5/10 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 傅朝栋;张法高 |
| 地址： | 310018 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种福寿螺GK小干扰RNA表达载体及其构建方法和应用，包括以下步骤：(1)通过RACE技术克隆得到福寿螺GK基因全长cDNA序列；(2)根据载体的信息和靶序列设计并合成4对含9个核苷酸的loop环的siRNA引物；(3)siRNA引物退火；(4)RNAi表达载体的构建：siRNA引物退火后与双酶切的RNAi载体连接；(5)转化大肠杆菌，得到RNAi表达载体的重组质粒。福寿螺为重要的外来入侵物种，本发明构建的GK小干扰RNA表达载体对于GK基因在外来入侵生物福寿类耐逆机制的研究方面具有重要的理论及实际意义。 | ||
| 搜索关键词： | 福寿螺 构建 小干扰RNA 表达载体 引物退火 基因全长cDNA 外来入侵生物 大肠杆菌 外来入侵 重组质粒 靶序列 核苷酸 双酶切 福寿 引物 应用 合成 克隆 物种 基因 转化 研究 | ||
【主权项】：
1.一种福寿螺GK小干扰RNA表达载体的构建方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)通过RACE技术克隆得到福寿螺GK基因全长cDNA序列；(2)根据载体的信息和靶序列设计并合成4对含9个核苷酸的loop环的siRNA引物；(3)siRNA引物退火；(4)RNAi表达载体的构建：siRNA引物退火后与双酶切的RNAi载体连接；(5)转化大肠杆菌，得到RNAi表达载体的重组质粒。
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