[发明专利]用于检测基因突变的方法在审
| 申请号： | 201780025043.7 | 申请日： | 2017-03-29 |
| 公开（公告）号： | CN109072290A | 公开（公告）日： | 2018-12-21 |
| 发明（设计）人： | 海老沼宏幸;内田桂;塚本百合子 | 申请（专利权）人： | 积水医疗株式会社 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858;C12N15/00;C12N15/09 |
| 代理公司： | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人： | 吴小明 |
| 地址： | 日本国*** | 国省代码： | 日本;JP |
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| 摘要： | 本发明的一个目的是提供一种用于设计引物的新方法，该引物确保了在基于ASP‑PCR方法检测单碱基置换的方法中的反应性和鉴别力，并且提供一种用于容易地检测重叠扩增子内的多个点突变(特别是两个相邻单碱基置换)的方法。通过使用其中始自3’末端的第三个核苷酸的碱基对应于核酸样品中含有的单碱基置换的突变核苷酸的碱基、其中始自3’末端的第二个核苷酸的碱基不与所述核酸的相应核苷酸的碱基互补、并且其中其他核苷酸的碱基与所述核酸的相应核苷酸的碱基互补的突变引物，可以容易地检测单碱基置换。 | ||
| 搜索关键词： | 核苷酸 单碱基 碱基 置换 检测 碱基互补 核酸 突变核苷酸 核酸样品 基因突变 设计引物 突变引物 点突变 反应性 扩增子 引物 | ||
【主权项】：
1.一种通过利用核酸扩增反应来检测单碱基置换的方法，所述单碱基置换是核酸样品中含有的单核苷酸多态性位点处的单碱基置换，所述方法将以下步骤结合：(a)突变引物与所述核酸杂交，在所述突变引物中，始自3’末端的第三个核苷酸的碱基对应于所述单核苷酸多态性的突变核苷酸的碱基，其中始自3’末端的第二个核苷酸的碱基不与所述核酸的相应核苷酸的碱基互补，并且其中其他核苷酸的碱基与所述核酸的相应核苷酸的碱基互补；(b)用DNA聚合酶和作为其底物的脱氧核糖核苷三磷酸延伸所述突变引物；和(c)基于所述突变引物是否被延伸来检测所述核酸样品中含有的所述单碱基置换。
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