[发明专利]利用DNA条形码进行珍稀木材鉴定的方法

摘要

本发明公开了一种利用DNA条形码进行珍稀木材鉴定的方法。本发明建立了一种木材基因组DNA提取方法，该方法操作简单、产物质量较高，更适合木材类样本基因组DNA的提取，基本可以满足后续实验对DNA质量的要求；操作过程中所需的仪器和试剂都是实验室已有的，可以在不同DNA实验室间推广；同时本发明通过对DNA条形码序列的综合研判与分析，筛选出适用于降香黄檀的DNA条形码，综合建立了一套降香黄檀鉴定方法。本发明可以应用于快速准确的鉴别降香黄檀，而且应用于刑事案件也具有十分重要的意义。

主权项

1.一种鉴定待测木材是否为降香黄檀的方法，包括如下步骤：以待测木材基因组DNA为模板，分别采用特异引物组中的每个引物对进行如下步骤：依次进行PCR扩增、测序和序列比对；如果采用每个引物对进行上述步骤得到的同源性最高的序列中均含有降香黄檀来源的序列、待测木材为降香黄檀；所述特异引物对组为如下(b1)或(b2)或(b3)：(b1)由引物对Ⅰ、引物对Ⅱ、引物对Ⅲ、引物对Ⅳ和引物对Ⅴ中的任意3个引物对组成；(b2)由引物对Ⅰ、引物对Ⅱ、引物对Ⅲ、引物对Ⅳ和引物对Ⅴ中的任意4个引物对组成；(b3)由引物对Ⅰ、引物对Ⅱ、引物对Ⅲ、引物对Ⅳ和引物对Ⅴ组成；(b1)或(b2)或(b3)中，所述引物对Ⅰ由引物F1和引物R1组成；所述引物对Ⅰ由引物F1和引物R1组成；所述引物F1为如下(a1)或(a2)：(a1)序列表的序列1所示的单链DNA分子；(a2)将序列1经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列1具有相同功能的DNA分子；所述引物R1为如下(a3)或(a4)：(a3)序列表的序列2所示的单链DNA分子；(a4)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的DNA分子；(b1)或(b2)或(b3)中，所述引物对Ⅱ由引物F2和引物R2组成；所述引物F2为如下(a5)或(a6)：(a5)序列表的序列3所示的单链DNA分子；(a6)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同功能的DNA分子；所述引物R2为如下(a7)或(a8)：(a7)序列表的序列4所示的单链DNA分子；(a8)将序列4经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列4具有相同功能的DNA分子；(b1)或(b2)或(b3)中，所述引物对Ⅲ由引物F3和引物R3组成；所述引物F3为如下(a9)或(a10)：(a9)序列表的序列5所示的单链DNA分子；(a10)将序列5经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列5具有相同功能的DNA分子；所述引物R3为如下(a11)或(a12)：(a11)序列表的序列6所示的单链DNA分子；(a12)将序列6经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列6具有相同功能的DNA分子；(b1)或(b2)或(b3)中，所述引物对Ⅳ由引物F4和引物R4组成；所述引物F4为如下(a11)或(a12)：(a11)序列表的序列7所示的单链DNA分子；(a12)将序列7经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列7具有相同功能的DNA分子；所述引物R4为如下(a13)或(a14)：(a13)序列表的序列8所示的单链DNA分子；(a14)将序列8经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列8具有相同功能的DNA分子；(b1)或(b2)或(b3)中，所述引物对Ⅴ由引物F5和引物R5组成；所述引物F5为如下(a15)或(a16)：(a15)序列表的序列9所示的单链DNA分子；(a16)将序列9经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列9具有相同功能的DNA分子；所述引物R5为如下(a17)或(a18)：(a17)序列表的序列10所示的单链DNA分子；(a18)将序列10经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列10具有相同功能的DNA分子。