[发明专利]一种基于G‑四链体的DNA探针在DNA序列检测中的应用在审
| 申请号： | 201711022553.7 | 申请日： | 2017-10-27 |
| 公开（公告）号： | CN107841534A | 公开（公告）日： | 2018-03-27 |
| 发明（设计）人： | 王公轲;王双莉;侯慧敏;李丹;闫长领;陈得军 | 申请（专利权）人： | 河南师范大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6825 | 分类号： | C12Q1/6825;C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 新乡市平原智汇知识产权代理事务所(普通合伙)41139 | 代理人： | 路宽 |
| 地址： | 453007 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明属于DNA传感器技术领域，具体涉及一种基于G‑四链体的DNA探针在DNA序列检测中的应用。本发明与现有技术相比具有以下显著优点首先，这个DNA探针没有复杂的修饰过程；其次，相对于其它有酶参与的传感器来说，虽然在检测限方面有较大差异，但是相比之下设计简单，能够免于复杂的操作，也不用严格控制实验条件来保持酶的活性；而最大的特点在于相当的经济实用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 四链体 dna 探针 序列 检测 中的 应用 | ||
【主权项】：
一种基于G‑四链体的DNA探针在DNA序列检测中的应用，其特征在于包括以下步骤：①首先配制a、b、c、d、e五组含有探针DNA的混合液；含有探针DNA的混合液包括50mM pH 7.4的Tris‑HCl缓冲溶液，100mM的KCl ，10mM的MgCl2， 1μM探针DNA ，5‑2000nM XDNA ；在95℃的水浴中加热10分钟，之后冷却至室温；其中，a组的XDNA 为目标DNA，b组的XDNA 为目标DNA替换一个碱基、c组的XDNA 为目标DNA替换两个碱基、d组的XDNA 为目标DNA替换三个碱基、e组的XDNA 为待测DNA；②向不同组含有探针DNA的混合液中加入等体积的1μM PPIX溶液，在暗处反应1h，最后用微量荧光比色皿在荧光光度计中测得其荧光光谱，激发波长设定为410nm，扫描范围为550nm‑750nm，测定在632nm处的荧光强度值；PPIX的结构式如下：；③将e组的荧光强度值与a、b、c、d组进行比较。
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