[发明专利]细胞培养方法在审
| 申请号： | 201610625651.9 | 申请日： | 2008-12-22 |
| 公开（公告）号： | CN106222220A | 公开（公告）日： | 2016-12-14 |
| 发明（设计）人： | 安德烈·乔万尼奥里;西维亚·罗伊;薇洛妮克·杜克洛;维吉妮·夏洛特;伊夫-奥利维耶·斯托弗 | 申请（专利权）人： | 百深有限责任公司;百深公司 |
| 主分类号： | C12P21/02 | 分类号： | C12P21/02 |
| 代理公司： | 上海市华诚律师事务所31210 | 代理人： | 王金英 |
| 地址： | 瑞士奥普*** | 国省代码： | 瑞士;CH |
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| 摘要： | 在35.1‑36.5℃和/或pH 7.15‑7.20和/或10％以下的溶解CO2浓度下，培养分泌异源蛋白质的哺乳动物细胞比如CHO或者BHK细胞。优选异源蛋白质是因子VIII、ADAMTS‑13、弗林蛋白酶或因子VII。 | ||
| 搜索关键词： | 细胞培养 方法 | ||
【主权项】：
一种方法，其包括在细胞培养上清液中培养分泌异源蛋白质的哺乳动物细胞，其特征在于，所述细胞培养上清液被保持在设定为36±0.5℃的温度，其中细胞培养是连续培养，且所述连续培养维持在细胞密度为1.6×106至2.6×106个细胞/ml，所述异源蛋白质是FVIII，并且其中哺乳动物细胞是CHO细胞。
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- 梁国斌;汪斌 - 江苏理工学院
- 2015-10-30 - 2019-03-19 - C12P21/02
- 本发明公开了一种从产朊假丝酵母发酵液中提取谷胱甘肽的方法，包括以下步骤：产朊假丝酵母种子培养和发酵；收集发酵培养完毕的发酵液，离心，收集的细胞冷冻；将冷冻后的产朊假丝酵母细胞加入硫酸溶液中，放置15～30分钟后离心分离，收集上清液；此时细胞内的还原型谷胱甘肽从胞内释放出来溶解在硫酸溶液中，完成提取。本发明将收集的细胞冷冻处理以增加细胞壁渗透性；将冷冻处理后的细胞加入强酸溶液中，在强酸溶液中胞内还原型谷胱甘肽完全释放出来，而胞内其他大分子物质如蛋白质、糖类、核酸等则基本留在胞内，简化了后续的纯化操作，降低了纯化成本，实现了高效、清洁化提取；同时在本发明的提取条件下还原型谷胱甘肽未被破坏。
- 一种糖基化胶原蛋白改性聚己内酯的酶促合成方法-201610938600.1
- 袁久刚;王平;王文达;范雪荣;王强 - 江南大学
- 2016-10-25 - 2019-03-19 - C12P21/02
- 本发明公开了一种糖基化胶原蛋白改性聚己内酯的酶促合成方法，属于聚己内酯改性技术领域。本发明首先利用还原胺化法将含有脂肪酶催化位点——伯羟基的小分子还原糖引入胶原蛋白表面，之后以此为引发剂，采用脂肪酶对ε‑己内酯单体进行开环聚合，反应完毕后通过除酶以及丙酮提纯，最终制得糖基化胶原蛋白改性聚己内酯。该方法具有反应条件温和，无金属离子残留等问题。聚己内酯的生物法改性对于提升材料的细胞亲和性能具有重要意义。
- 一种抗生素NVP018中间体的分离纯化方法-201610133971.2
- 王欣彤;胡志浩;蔡昌银;刘斌 - 苏州华赛生物工程技术有限公司;苏州汉酶生物技术有限公司
- 2016-03-10 - 2019-03-15 - C12P21/02
- 本发明公开了一种抗生素NVP018中间体的分离纯化方法，通过在链霉菌接种至发酵培养基中进行发酵培养24h后,加入底物FS45并分批加入非极性大孔吸附树脂，而后将抗生素NVP018中间体从树脂中解吸出来并浓缩，之后采用硅胶柱层析法进行分离纯化，其中所采用的洗脱液为二氯甲烷‑甲醇，并进行梯度洗脱。通过本发明的分离纯化方法，可分离得到纯度达92%以上的HS457，且其纯度在85%以上的收率可达70%，HS457的总回收率可达93%；同时采用该方法还可将HS496分离纯化，得到纯度最高达95%以上的HS496，其纯度在85%以上的收率可达70%，总回收率可达95%，且通过本发明的方法还可得到收率为50%的固体粉末状的HS496。
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