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[发明专利]一种适用于发现僵蚕药材差异蛋白质的简便方法-CN202110286852.1有效
发明人： 闻崇炜;刘莹;张林松;周林辉;李孟喜;徐卫东;裴丹 -专利权人：江苏大学
申请日： 2021-03-17 - 公布日： 2023-05-09 - 主分类号： G01N27/447 文献下载
摘要：本发明属于中药材分析及质量评价技术领域，具体涉及一种适用于发现僵蚕药材差异蛋白质的简便方法。本发明对不同僵蚕药材醇提蛋白质经蛋白质分级沉淀试剂丙酮分级处理后对各沉淀部分进行十二烷基硫酸钠‑聚丙烯酰胺凝胶电泳，并对凝胶各对应沉淀部分的电泳结果进行比对分析，可发现不同僵蚕药材的差异蛋白质。本发明设计方法简便易行、无需特殊设备及试剂、分辨率高、结果准确度高，常规实验室即可操作，利用常规的十二烷基硫酸钠‑聚丙烯酰胺凝胶电泳可发现不同僵蚕药材的差异蛋白质，适用于不同等级或不同产地的僵蚕药材研究，为其品质鉴定及优质优价提供分析依据。
一种适用于发现僵蚕药材差异蛋白质简便方法

[发明专利]一种共制备卵白蛋白与卵铁传递蛋白的方法-CN201610300962.8有效
发明人： 闻崇炜;葛藤;赵烨清;周慧莲;石莉 -专利权人：江苏大学
申请日： 2016-05-09 - 公布日： 2019-08-02 - 主分类号： C07K14/77 文献下载
摘要：本发明公开了一种共制备卵白蛋白与卵铁传递蛋白的方法，涉及生物、医药及食品工业技术领域。步骤如下：室温下收集鸡蛋清，按照鸡蛋清与新鲜去离子水体积比为1：2的比例进行稀释，调节pH至5.0左右，均匀搅拌后离心；向离心所得上清液A中加入分子量介于200～20000的聚乙二醇，均匀搅拌后离心，收集沉淀B；溶解沉淀B后再向其中加入分子量介于200～20000的聚乙二醇，离心，收集上清液C及沉淀D。上清C中含有高纯度卵白蛋白，沉淀D中含有较高纯度卵铁传递蛋白。本发明简便快速，成本低廉，条件温和安全，适用于大规模工业化生产卵白蛋白与卵铁传递蛋白。
一种制备卵白蛋白传递方法

[发明专利]一种适用于大规模制备食品级卵白蛋白的提纯方法-CN201510342990.1有效
发明人： 闻崇炜;赵烨清;周慧莲;欧阳臻;陈溶溶 -专利权人：江苏大学
申请日： 2015-06-19 - 公布日： 2019-05-31 - 主分类号： C07K14/77 文献下载
摘要：本发明公开了一种适用于大规模制备食品级卵白蛋白的提纯方法，步骤如下：室温下收集鸡蛋清，按照鸡蛋清与新鲜去离子水体积比为1：2的比例进行稀释，不需调节pH，均匀搅拌后离心；向离心所得上清液中加入分子量介于200～20000的聚乙二醇，均匀搅拌后离心，即可得到含有聚乙二醇的高纯度卵白蛋白溶液；对所得含有聚乙二醇的高纯度卵白蛋白溶液进行超滤处理，可以继续制得不含有聚乙二醇的高纯度卵白蛋白。本发明简便快速，成本低廉，条件温和安全，适用于大规模工业化生产，所得卵白蛋白品质很高，方便后续直接加工为各种食品、保健品及医药用品。
一种适用于大规模制备食品级卵白蛋白提纯方法

[发明专利]一种提高大肠杆菌中可溶性重组原动蛋白2β表达水平的方法-CN201510516845.0有效
发明人： 闻崇炜;赵烨清;周慧莲;欧阳臻;王晓燕 -专利权人：江苏大学
申请日： 2015-08-21 - 公布日： 2019-04-02 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种有效提高大肠杆菌中可溶性重组蛋白质表达水平的工艺方法，其步骤如下：将表达重组蛋白质的工程菌冻存液按0.1%比例接种到表达用新鲜LB液体培养基中，37℃振荡培养过夜获得种子液，随后将种子液按照1%比例接种到表达用新鲜LB液体培养基中，37℃继续振荡培养至培养液OD₆₀₀达到预设诱导起点的75%～90%，然后将培养温度升高至40℃继续培养0.5～1.5hr，待培养液OD₆₀₀达预设诱导起点后，向培养液中添加诱导物，继续以37℃或者40℃振荡培养6hr，菌体内可以产生显著的可溶性重组蛋白质。本发明简便有效，成本低廉，易于放大，适用于生物工程及基因工程中用大肠杆菌表达各种可溶性异源重组蛋白质。
一种提高大肠杆菌可溶性重组蛋白质表达水平方法

[发明专利]一种温和高效破碎大肠杆菌细胞的方法-CN201310429369.X有效
发明人： 闻崇炜;宁德刚 -专利权人：江苏大学
申请日： 2013-09-22 - 公布日： 2014-03-26 - 主分类号： C12N1/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种温和高效破碎大肠杆菌细胞的方法，步骤如下：大肠杆菌细胞悬浮于重悬缓冲液中，并且用10～50mMEDTA溶液于4℃处理过夜，离心收集菌体沉淀，再利用高渗缓冲液与低渗缓冲液重复处理三次，可以使大肠杆菌细胞总体破碎率达到99.2%以上。本发明细胞破碎工艺操作简便，设备要求低，易于放大生产，对大肠杆菌破碎率高，并且同时得到细胞内可溶性及不溶性成分。
一种温和高效破碎大肠杆菌细胞方法

[实用新型]一种可充分利用铅笔头的铅笔加长套-CN201320590636.7有效
发明人：闻歆玥;闻崇炜 -专利权人： 闻崇炜
申请日： 2013-09-25 - 公布日： 2014-03-12 - 主分类号： B43K23/00 文献下载
摘要：实用新型涉及一种可充分利用铅笔头的铅笔加长套。它包括套身、与套身连接的套头、套在套头上的笔帽和设在套身内腔中的弹簧，其特征在于：所述的套身是一个圆柱形的筒，其一端封闭，另一端为开口，开口端设有外螺纹，其内腔是一个直径与铅笔笔杆相匹配的圆柱形孔；所述的套头是一个外部形状为一端是圆柱形，另一端是锥形的连接体，内部形状是一个直径与卷笔刀削出的铅笔头端部形状相匹配的空心体，其一端设有与套身上外螺纹配套的内螺纹，另一端设有通过铅笔笔芯的孔。本实用新型的有益效果是：充分利用铅笔头，节约资源；并且在使用铅笔头时有较好手感而不至于手指酸痛。
一种充分利用铅笔加长

[发明专利]一种从大肠杆菌细胞中区分可溶性及不溶性蛋白质的方法-CN201310431724.7有效
发明人： 闻崇炜;王亚丽 -专利权人：江苏大学
申请日： 2013-09-22 - 公布日： 2013-12-25 - 主分类号： C07K1/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种从大肠杆菌细胞中制备可溶性蛋白质及不溶性蛋白质的方法，步骤如下：大肠杆菌细胞悬浮于重悬缓冲液中，并且用0.5%～5%TritonX-100于4℃处理过夜，离心收集菌体沉淀，再利用渗透压法重复处理三次，可以使大肠杆菌细胞总体破碎率达到98.9%以上，本工艺中所得上清液为大肠杆菌细胞内可溶性蛋白质，所得沉淀为大肠杆菌细胞内不溶性蛋白质。本发明所述工艺操作简便易行，无特殊设备要求，易于放大规模，破碎率高。
一种大肠杆菌细胞区分可溶性不溶性蛋白质方法

[发明专利]一种共分离制备鸡蛋清溶菌酶与活性蛋白的方法-CN201310080459.2有效
发明人： 闻崇炜;宁德刚;徐卫东 -专利权人：江苏大学
申请日： 2013-03-14 - 公布日： 2013-06-19 - 主分类号： C12N9/36 文献下载
摘要：本发明公开了一种共分离制备鸡蛋清溶菌酶与活性蛋白的方法，步骤如下：在室温下收集鸡蛋清，并调节pH至5.5左右，搅拌均匀后离心；向离心后得到的上清液中加入分子量介于200-20000的聚乙二醇，搅拌均匀后离心；向离心后得到的上清液中加入饱和硫酸铵溶液，混匀后离心；分别收集离心得到的上层清液和下层清液；对上层清液进行超滤或者透析处理可以得到高纯度的鸡蛋清溶菌酶；对下层清液进行超滤或者透析处理可以得到卵白蛋白与卵转铁蛋白为主的较高纯度的其它活性蛋白。本发明简单易行，成本低廉，条件温和，可以很好地保持溶菌酶品质，适用于大规模工业化生产，同时还可以得到其它活性蛋白，进一步提高生产效益。
一种分离制备鸡蛋清溶菌酶活性蛋白方法

[发明专利]红藤活性部位、在制备抗炎免疫和抗衰老药物中的应用-CN201210180781.8有效
发明人：汤建;马瑞丽;欧阳臻;张蓉;徐秀泉;于小凤;闻崇炜;赵神洲;许辉 -专利权人：江苏大学
申请日： 2012-06-04 - 公布日： 2012-10-03 - 主分类号： A61K36/185 文献下载
摘要：本发明红藤活性部位、在制备抗炎免疫和抗衰老药物中的应用，属于医药技术领域。本发明中红藤用水回流提取，经乙醇沉淀得红藤多糖和水溶性部位。红藤50%-80%乙醇回流提取液依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯分级萃取，制得石油醚部位、二氯甲烷部位和乙酸乙酯部位，剩余水相经大孔吸附树脂HP-20处理，得水溶性部位。经药效学实验研究表明，四个部位对二甲苯致小鼠耳肿胀和角叉菜胶致大鼠足肿胀具有显著的抑制作用，并且能够降低足跖炎症组织中MDA和PGE2含量。上述四种部位具有较好的体外抗氧化活性，能够有效降低血清和肝脏组织中MDA含量，增强SOD活性。因此可以用于制备抗炎免疫药物和抗衰老药物。
红藤活性部位制备免疫衰老药物中的应用

[发明专利]青藤碱4-羟基醚化和酯化衍生物、制备方法及用途-CN201210056982.7无效
发明人：汤建;张蓉;马瑞丽;欧阳臻;徐秀泉;李培志;闻崇炜;苏兆亮;蒋鹏 -专利权人：江苏大学
申请日： 2012-03-07 - 公布日： 2012-08-01 - 主分类号： C07D221/28 文献下载
摘要：本发明提供了青藤碱4-羟基醚化和酯化衍生物、制备方法及用途，涉及药物化学领域。具体涉及青藤碱4-羟基醚化和酯化衍生物。同时公开了青藤碱4-OH醚化和酯化衍生物的制备方法。本发明选用ICR小鼠，SD大鼠模型测试抗炎免疫活性，转染pNF-κB-luc的293细胞测试化合物对NF-κB信号通路的抑制作用，结果显示部分化合物具有显著抗炎免疫活性和抑制NF-κB作用。可以用于制备抗炎免疫药物。
青藤碱羟基酯化衍生物制备方法用途

[发明专利]表面展示具有催化活性的脂肪酶的重组芽孢的制备方法-CN200810243646.7无效
发明人：宁德刚;闻崇炜;许小红 -专利权人：江苏大学
申请日： 2008-12-05 - 公布日： 2009-07-08 - 主分类号： C12N15/62 文献下载
摘要：本发明涉及一种枯草芽孢杆菌芽孢表面展示具有催化活性的脂肪酶的重组芽孢制备方法。该方法是利用枯草芽孢杆菌芽孢衣壳蛋白基因为分子载体，与具有三酰甘油脂水解和转酯功能的脂肪酶基因重组后，构建融合表达的整合性重组质粒，并转化枯草芽孢杆菌得到重组菌株，诱导重组菌株产生的芽孢表面展示脂肪酶的重组芽孢。与本领域已知的方法相比，本发明方法将不同来源的具有三酰甘油脂水解功能的脂肪酶展示于Bacillus subtilis芽孢的表面，利用芽孢所具有的独特抗逆性，能提高脂肪酶的催化活性和稳定性。
表面展示具有催化活性脂肪酶重组芽孢制备方法

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