[发明专利]一种猪饲料非淀粉多糖酶谱的快速筛选方法

摘要

一种猪饲料非淀粉多糖酶谱的快速筛选方法，包括如下步骤：饲料非淀粉多糖组分的分析、非淀粉多糖酶类型和剂量的设定、饲料胃肠道模拟消化、非淀粉多糖酶谱的优化。本发明采用非淀粉多糖酶组分分析技术和体外模拟消化法，使用饲料体外能值表征非淀粉多糖酶的作用效果，快速获取饲料中添加的最优非淀粉多糖酶谱。

主权项

1.一种猪饲料非淀粉多糖酶谱的快速筛选方法，其特征在于：该筛选方法依次包括以下步骤：饲料非淀粉多糖组分的分析、非淀粉多糖酶类型和剂量的设定、饲料胃肠道模拟消化、非淀粉多糖酶谱的优化，其中：(1)饲料非淀粉多糖组分的分析：选取猪饲料放入粉碎机中，其中所述的猪饲料包括配合饲料和组成配合饲料的原料；再将所述的粉碎机的转速控制在8000～10000转/分钟，粉碎时间为5～10分钟；将粉碎后的饲料过0.25～0.42毫米筛；置于-20℃储存备用；精确称取猪饲料，测定猪饲料样品的非淀粉多糖组分的含量；(2)非淀粉多糖酶类型和剂量的设定：根据所述的猪饲料样品非淀粉多糖组分，按照主成分分析结果，称取猪饲料，并在所述的猪饲料中添加3～7非淀粉多糖酶，每种非淀粉多糖酶的添加剂量设置0、100、200、300、400、500、600、700、800、900μg/g系列浓度梯度，制备出一系列添加了不同浓度非淀粉多糖酶猪饲料；(3)胃肠道模拟消化：将所述非淀粉多糖酶的猪饲料的样品置于三角瓶中，并在三角瓶中加入模拟胃消化缓冲液，所述的模拟胃消化缓冲液为pH 2.0，摩尔质量比为85：6～90：8的氯化钠：氯化钾溶液；同时加入800～1400U/mL胃蛋白酶液；其中非淀粉多糖酶猪饲料、模拟胃消化缓冲液和胃蛋白酶液按照2：10：1～4：12：1重量比混合均匀；将装有混合均匀的非淀粉多糖酶饲料、模拟胃消化缓冲液和胃蛋白酶液的三角瓶置于恒温水浴摇床中，设定恒温水浴摇床温度和摇床转速，进行2～6h模拟胃消化；待所述模拟胃消化结束后，在所述三角瓶中加入摩尔质量比为97：14：160～108：16：180的氯化钠：氯化钾：磷酸盐的模拟肠消化缓冲液；同时加入pH 6.2～6.5，单位酶活力比57：7：186：2～76：10：264：4＝胰蛋白酶：糜蛋白酶：淀粉酶：脂肪酶的模拟肠消化酶液；其中模拟肠消化缓冲液和模拟肠消化酶液的重量百分比范围是60：1～65：1；继续设定恒温水浴摇床温度和摇床转速，进行20～24h模拟肠的消化；(4)非淀粉多糖酶谱的优化：待模拟消化结束后，将消化残渣烘干至恒重，测定残渣体外消化能值，计算出添加每种非淀粉多糖酶的饲料体外消化能值，并根据非淀粉多糖酶和体外消化能值的回归关系，得出每种非淀粉多糖酶能提高目标的饲料体外消化能值的临界点；将每种非淀粉多糖酶依据所述临界点进行编码时，根据添加的多种非淀粉多糖酶的种类，设置对应数量的影响因子，每个影响因子设置5个水平，采用回归正交旋转组合设计分析体外消化能值，并利用体外消化能值与非淀粉多糖酶添加剂量关系，表征出最优的非淀粉多糖酶谱；所述步骤(1)中称取猪饲料样品量为100～250毫克。