[发明专利]一种妥布霉素单克隆抗体及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 201410510516.0 | 申请日： | 2014-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN104312978B | 公开（公告）日： | 2017-03-01 |
| 发明（设计）人： | 匡华;曹珊珊;胥传来;徐丽广;马伟;刘丽强;宋珊珊;吴晓玲 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N5/20 | 分类号： | C12N5/20;C07K16/44;C07K16/02;G01N33/577;C12R1/91 |
| 代理公司： | 无锡市大为专利商标事务所(普通合伙)32104 | 代理人： | 时旭丹,刘品超 |
| 地址： | 214122 江苏省无锡市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 一种妥布霉素单克隆抗体及其制备方法与应用，属于食品安全免疫检测领域。该单克隆抗体是由保藏编号为CGMCC No.9307的小鼠杂交瘤细胞株G号（1A10）产生的。其制备方法为（1）用戊二醛法将妥布霉素上的氨基活化后再与载体蛋白上的氨基偶联，得到的偶联物用硼氢化钠将戊二醛与氨基形成的西弗氏碱的C=N还原成稳定的C‑N结构，即最终稳定的偶联物，作完全抗原。（2）将步骤（1）的完全抗原经免疫、融合、筛选；扩大培养、小鼠腹腔诱导产腹水，得到用于特异性检测妥布霉素的单克隆抗体。（3）用DCC法活化丁二酸的羧基，将活化液与卵清蛋白氨基反应得到卵清蛋白‑丁二酸的羧基化蛋白，透析后再应用EDC法将妥布霉素与蛋白上的羧基缩合制备筛选抗体的包被。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 霉素 单克隆抗体 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
一株单克隆细胞株G号，即能分泌抗妥布霉素单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞株 G号，又命名1A10，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.9307。
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- 周勇;程金平;黄烯茜;张佳琪;廖浩祥;付双;张哲;胡雪;梁珊 - 上海交通大学
- 2019-04-15 - 2019-09-24 - C12N5/20
- 本发明提供一种抗邻苯二甲酸二乙酯单克隆抗体杂交瘤细胞株及其构建方法；所述构建方法包括人工抗原的合成、小鼠免疫、杂交瘤细胞的筛选及建株、单克隆抗体的制备纯化及效价测定。所述人工抗原的合成包括免疫抗原、检测抗原的合成，所述杂交瘤细胞的筛选及建株包括SP2/0细胞的收集、脾细胞的收集、细胞融合、融合板的检测等步骤。本发明的制备方法简单，免疫效果好；能获得稳定分泌抗邻苯二甲酸二乙酯单克隆抗体的杂交瘤细胞株，为水环境中邻苯二甲酸二乙酯的免疫学快速检测方法的建立提供研究基础。
- 一株吉他霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株SML及其应用-201910565378.9
- 胥传来;郭玲玲;匡华;徐丽广;马伟;刘丽强;吴晓玲;宋珊珊;胡拥明 - 江南大学
- 2019-06-27 - 2019-09-20 - C12N5/20
- 本发明涉及一株吉他霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株SML及其应用，属于食品安全免疫检测领域。杂交瘤细胞株SML，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC No.17392。本发明将吉他霉素的完全抗原与等量弗氏佐剂混合乳化，免疫BALB/c小鼠。首次免疫用完全弗氏佐剂，多次加强免疫用不完全弗氏佐剂，最后用吉他霉素完全抗原冲刺免疫。将高效价，低IC50小鼠的脾细胞，通过PEG方法与小鼠骨髓瘤细胞融合，培养，筛选；再经过间接竞争酶联免疫法筛选细胞并三次亚克隆，最终得到一株单克隆抗体杂交瘤细胞株。此细胞株分泌的单克隆抗体，对吉他霉素具有较好的特异性和检测灵敏度，可实现对水产品中吉他霉素残留量的检测，具有实际应用价值。
- 一种鸭坦布苏病毒NS1蛋白单克隆抗体及其识别的B细胞表位及其应用-201610394584.4
- 刁有祥;提金凤;陈浩;唐熠;李志杰 - 山东农业大学
- 2016-06-03 - 2019-09-20 - C12N5/20
- 本发明提供了一株分泌鸭坦布苏病毒NS1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株、其分泌的单克隆抗体及其鉴定的TMUV‑NS1蛋白的TMUV特异性细胞表位。本发明利用TMUV NS1蛋白制备了单克隆抗体，利用单克隆抗体筛选鉴定了1个NS1蛋白的B细胞表位269DEKEIV313，该表位具有高度的保守性和特异性，可用于TMUV多肽疫苗的研制及特异性血清学方法的建立等方面。
- 抗鹅CD8α链胞外区单克隆抗体及其在检测禽类外周血中CD8+T淋巴细胞中的应用-201610244264.0
- 马波;曹春秋;张雪莲;王君伟;张文龙;高明春;张文晶;崔嘉琦 - 东北农业大学
- 2016-04-19 - 2019-09-17 - C12N5/20
- 本发明公开了抗鹅CD8α链胞外区单克隆抗体及其在检测禽类外周血中CD8+T淋巴细胞中的应用。本发明以携带鹅CD8α链胞外区基因的原核表达载体为模板，设计1对特异性引物扩增得到鹅CD8α链胞外区238‑480bp基因，构建重组原核表达载体，采用大肠杆菌表达鹅CD8α链胞外区80‑160aa，得到重组蛋白rGopET‑30a‑CD8αex。以重组蛋白rGopET‑30a‑CD8αex为免疫原，免疫小鼠，经筛选获得1株稳定分泌抗鹅CD8α链胞外区80‑160aa单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为9E4，保藏号是：CGMCCNO.11194。研究表明，该单克隆抗体能与纯化的重组鹅CD8α链胞外区80‑160aa蛋白反应，同时也能够与分离的鹅、鸭以及鸡的外周血淋巴细胞发生特异性反应。因此，本发明的提出为检测禽类外周血中CD8+T淋巴细胞提供了一种新的、有效的技术手段。
- 一种分泌抗蓝舌病病毒NS3蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞-201810180525.6
- 高林;李乐;李华春;何于雯;朱建波;苗海生;肖雷;杨恒;谢佳芮;廖德芳;李楠;孟锦昕 - 云南省畜牧兽医科学院
- 2018-03-05 - 2019-09-13 - C12N5/20
- 本申请属于生物技术领域，涉及但不限于一种分泌抗蓝舌病病毒NS3蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞。本申请利用蓝舌病血清1型病毒作为免疫原，得到能够分泌对蓝舌病病毒具有群特异性的单克隆抗体的杂交瘤细胞株及由其分泌的单克隆抗体。本申请产生的单克隆抗体能够取代兔源蓝舌病病毒抗体与蓝舌病病毒NS3蛋白结合。
- 专利分类
