[发明专利]一种测定原料和制剂中阿氏假囊酵母菌相对含量的方法

摘要

本发明涉及原料和制剂中阿氏假囊酵母菌相对含量的方法，属于分子生物学技术领域。原料主要是以黄豆为原料，经阿氏假囊酵母菌发酵后的产物；其制剂是以该产物为原料，精制加工而成的制剂。本发明设计了针对阿氏假囊酵母菌核糖体RNA亚基内26S rDNA的引物，提取原料及其制剂内DNA为模板，聚合酶链反应进行DNA扩增，用电泳检测法检测阿氏假囊酵母菌。之后通过凝胶成像仪上检视和图像分析软件分析凝胶片显示的亮度，以无菌双蒸水为阴性对照，已知含量的DNA梯度标记物内不同分子量梯度DNA为基准值，计算出阿氏假囊酵母菌DNA经聚合酶链反应扩增后DNA特异产物含量，间接推算出原料和制剂中阿氏假囊酵母菌的相对含量。

主权项

1.一种测定原料和制剂中阿氏假囊酵母菌相对含量的方法，其特征在于采用已知含量的DNA分子量标记物内不同分子量梯度DNA为基准值，检测阿氏假囊酵母菌DNA经聚合酶链反应扩增后DNA特异产物含量，间接推算出原料和制剂中阿氏假囊酵母菌的相对含量；所述DNA特异产物为阿氏假囊酵母菌核糖体RNA亚基内26S rDNA序列片段；所采用引物序列如下：上游引物：5’‑TTTACCCTACTGATGAATGT，下游引物：5’‑TTGTCAGCCTGCTATGGTTC；所述间接推算出原料和制剂中阿氏假囊酵母菌的相对含量的方法为依据阿氏假囊酵母菌DNA经聚合酶链反应扩增后DNA特异产物条带亮度相对值进行推算；所述原料是指以黄豆为主要原料，经阿氏假囊酵母菌固体发酵后的产物，药品名称为维酶素；所述的制剂是其主要原料为维酶素的制剂。