[发明专利]血小板形态扫描成像和血小板活化功能评估的方法有效

专利信息
申请号: 201210156850.1 申请日: 2012-05-18
公开(公告)号: CN102662088A 公开(公告)日: 2012-09-12
发明(设计)人: 张彦军;张建宁;董京飞 申请(专利权)人: 天津医科大学总医院
主分类号: G01Q60/44 分类号: G01Q60/44
代理公司: 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 代理人: 陆艺
地址: 300052 *** 国省代码: 天津;12
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摘要: 发明公开了一种血小板形态扫描成像和血小板活化功能评估的方法,血小板形态扫描成像方法的步骤为:(1)血小板样品的制备;(2)将连接在扫描离子电导显微镜的参比电极和探测电极放置在步骤(1)获得的细胞培养皿中;(3)用扫描离子电导显微镜监控流入探测电极电流的变化,通过负反馈控制使得跳跃的探测电极与血小板间保持设定的距离,记录下所述探测电极的位置,通过计算机绘制得到血小板表面形貌的三维拓扑结构图。本发明的方法,能实时直观地观察在添加激活剂前后血小板的形态学表现,不仅可简便快捷地精准测定扫描范围内血小板数量和平均血小板体积等参数,还可评估血小板的活化功能。本发明的方法操作简便,成本低。
搜索关键词: 血小板 形态 扫描 成像 活化 功能 评估 方法
【主权项】:
一种血小板形态扫描成像的方法,其特征是包括如下步骤:(1)血小板样品的制备取2毫升静脉血放入柠檬酸钠抗凝管中,离心后得到富血小板血浆;取200μL所述富血小板血浆放置于涂覆有200μL浓度为2mg/mL的纤维蛋白原的35mm细胞培养皿中室温下孵育20‑30分钟,用PBS缓冲液洗脱未粘附在所述细胞培养皿底部的血小板后,加入1.5‑2mLPBS缓冲液后备用;(2)将连接在扫描离子电导显微镜的Ag/AgCl参比电极放置在步骤(1)获得的细胞培养皿中;将连接在扫描离子电导显微镜的探测电极放置在步骤(1)获得的细胞培养皿中,所述探测电极是一设置在充灌有PBS缓冲液的纳米吸管内的Ag/AgCl电极;(3)用扫描离子电导显微镜监控流入探测电极电流的变化,通过负反馈控制使得跳跃的探测电极与血小板间保持设定的距离,记录下所述探测电极的位置,通过计算机绘制得到血小板表面形貌的三维拓扑结构图。
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