[发明专利]应用径向色谱从黑木耳中分离抗肿瘤多糖组分的方法

摘要

本发明公开了一种应用径向色谱从黑木耳中分离抗肿瘤多糖组分的方法，包括如下步骤：1）黑木耳热水浸提；2）将黑木耳多糖提取液浓缩后加入Savag试剂，震荡离心；3）在去除蛋白的多糖水溶液中加入体积浓度≥95%的乙醇进行醇沉，所得的沉淀进行清洗；4）将含有抗肿瘤活性的黑木耳粗多糖冷冻干燥；5）将冻干后的黑木耳粗多糖溶于蒸馏水中，得样品溶液；将样品溶液泵入径向色谱仪，选用DEAE-52纤维素作为填料；分别用蒸馏水以及浓度为0.2M的 NaCl溶液进行洗脱； 6）收集浓度为0.2M的 NaCl溶液所对应的洗脱液，依次经透析、浓缩、干燥，得到具有抗肿瘤活性的黑木耳多糖。

主权项

应用径向色谱从黑木耳中分离抗肿瘤多糖组分的方法，其特征是包括如下步骤：1）、将黑木耳放入65~70℃热水中保温浸提160~200 min，得黑木耳多糖提取液；2）、将所述黑木耳多糖提取液浓缩，得浓缩液；所述浓缩液中碳水化合物的含量为2.5~3.0mg/ml；在所述浓缩液中加入占浓缩液体积40~60%的Savag试剂，震荡离心后，所得的上清液为去除蛋白的多糖水溶液；3）、在所述去除蛋白的多糖水溶液中加入体积浓度≥95%的乙醇进行醇沉，得沉淀；所述体积浓度≥95%的乙醇是去除蛋白的多糖水溶液体积的1.8~2.2倍；将所述沉淀用体积浓度≥95%的乙醇进行清洗；得含有抗肿瘤活性的黑木耳粗多糖；4）、将所述含有抗肿瘤活性的黑木耳粗多糖冷冻干燥，得冻干后的黑木耳粗多糖；5）、将冻干后的黑木耳粗多糖按照1g/15~20ml的料液比溶于蒸馏水中，得样品溶液；将样品溶液泵入径向色谱仪，样品溶液的上样量为25~50ml；选用DEAE‑52纤维素作为填料；分别用以下2种洗脱剂进行洗脱：蒸馏水和浓度为0.2M的 NaCl溶液，流速均为7.5~8.5ml/min，每种洗脱剂的洗脱时间55~65min； 6）、收集浓度为0.2M的 NaCl溶液所对应的洗脱液，依次经透析、浓缩、干燥，得到具有抗肿瘤活性的黑木耳多糖。