[发明专利]具有pH敏感特性的抗酸纳米口服DNA抗肿瘤疫苗及制备方法

摘要

一种具有pH敏感特性的抗酸纳米颗粒口服DNA抗肿瘤疫苗及制备方法。所述的DNA口服疫苗是一种由海藻酸进行表面修饰的壳聚糖结合编码肿瘤特异性抗原Legumain蛋白DNA质粒的纳米颗粒，能够高效在小肠派氏淋巴结中被树突状细胞及巨噬细胞吞噬，并表达编码的肿瘤抗原，激活宿主对肿瘤细胞的免疫杀伤。本发明所构建的纳米颗粒毒副作用小，且具有强烈的抗原呈递作用。具体说是将DNA质粒与壳聚糖进行静电负交联，后利用海藻酸对壳聚糖纳米颗粒的表面进行修饰。借助免疫荧光染色及流式细胞检测，对小鼠乳腺癌的生长及转移情况进行评估，并对小鼠的免疫应答进行分析，确定pH敏感特性的抗酸纳米颗粒口服DNA疫苗的抗原呈递能力及抗肿瘤效果。

主权项

具有pH敏感特性的抗酸纳米颗粒口服DNA抗肿瘤疫苗，其特征在于该疫苗是通过利用海藻酸对壳聚糖纳米颗粒进行修饰，使壳聚糖纳米颗粒具有pH敏感性，然后将编码肿瘤特异性抗原Legumain蛋白的DNA质粒装载到修饰后的壳聚糖纳米颗粒而制成；在疫苗通过胃液时保护DNA质粒不被降解，并在肠道中形成松散的结构，利于树突细胞及巨噬细胞吞噬，高效表达编码的基因；同时有效激发CD8+T细胞介导的免疫反应，降低调节T细胞对免疫系统的抑制作用，对肿瘤细胞进行杀伤，延缓肿瘤细胞的生长与转移。