[发明专利]一种利用酶膜反应器制备燕麦抗氧化肽的方法

摘要

本发明公开了一种制备燕麦抗氧化肽的方法。通过考察不同蛋白酶酶解燕麦麸蛋白所得产物的抗氧化活性和产物得率，确定Alcalase作为制备用酶；并通过考察Alcalase对燕麦麸蛋白的酶解速度，可知Alcalase酶解燕麦麸蛋白速度的降低主要是由于底物消耗和酶活损失共同造成的。同时，通过研究酶膜反应器系统对酶活的影响，可知酶膜反应器系统对Alcalase具有很好的保留效果，其中蠕动泵运转过程对酶造成的破坏和超滤膜对酶的吸附是导致Alcalase酶活损失的主要原因。通过利用DesignExpert 6.0.5设计四因素三水平的响应面分析试验，求得酶膜反应器制备燕麦抗氧化肽的最佳工艺条件为底物浓度3％、加酶量3.2％、料液流量45L/h、操作压力0.07MPa、温度55℃、pH值＝7.3，经过验证，在该条件下产物的DPPH清除率可达57.39％。

主权项

一种制备燕麦抗氧化肽的方法，是在酶膜反应器中进行制备的，包括下述步骤：1)将燕麦麸蛋白溶液加入到所述酶膜反应器的酶解罐中，调节所述燕麦麸蛋白溶液的pH值为7.0～7.5，并加热至55℃～60℃；然后再将碱性蛋白酶加入到所述酶解罐中，使燕麦麸蛋白与碱性蛋白酶在搅拌状态下反应2～4min；其中，所述燕麦麸蛋白溶液的质量浓度为2.5％‑3％，所加入的碱性蛋白酶与所述燕麦麸蛋白溶液中燕麦麸蛋白的配比为(17000‑18000)U/g燕麦麸蛋白；2)关闭所述酶膜反应器中超滤循环装置的超滤膜透过液出口，同时打开蠕动泵，使酶解液以45～50L/h的料液流量常压循环2～4min；3)开启所述超滤膜透过液出口，酶解液仍以45～50L/h的料液流量循环，调节超滤膜的操作压力为0.06～0.07MPa，进行酶解‑膜分离耦联反应，反应过程中每隔一定时间向所述酶解罐中补加燕麦蛋白溶液和碱性蛋白酶维持反应体系体积恒定以及蛋白浓度、酶量恒定，同时保持反应体系的pH值为7.0～7.5、温度为55℃～60℃，反应结束将收集的超滤膜透过液干燥，即得到所述燕麦抗氧化肽。