一种酸性磷酸酶突变体、其应用及其制备烟酰胺核糖的方法,本发明涉及分子生物学与生物工程技术领域,为解决野生型酸性磷酸酶活力较低导致酶法工业化生产烟酰胺核糖的成本较高的技术问题,本发明首先提供了一种酸性磷酸酶突变体,为如下(a)、(b)或(c)的蛋白质:(a)氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示的蛋白质;(b)在如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸并且以烟酰胺单核苷酸为底物具有比氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的酸性磷酸酶亲本高的催化活性的由(a)衍生的蛋白质;本发明提供的烟酰胺核糖的制备方法可使底物烟酰胺单核苷酸的转化率高达99%,制备得到的烟酰胺核糖的纯度可达99%以上。
本发明提供了一种丙谷二肽的制备方法,包括在α‑氨基酸酯酰基转移酶存在下,以L‑丙氨酸甲酯盐酸盐和L‑谷氨酰胺为底物配制反应液,调节所述反应液的pH为7.0‑9.0,在恒定温度20‑40℃下反应后,收集得到丙谷二肽;所述α‑氨基酸酯酰基转移酶来源于脑膜败血伊丽莎白菌;所述α‑氨基酸酯酰基转移酶的氨基酸序列包括如SEQ ID NO:1‑SEQ ID NO:6中任意一项所示的氨基酸序列。该制备方法高效简便,成本低,转化率高,绿色环保,可以广泛适用于工业化规模生产。本发明还提供了丙谷二肽制备用酶及应用。