本发明提供一种衍生自猪肝脏的抗菌肽TJH及其制备方法和应用,属于农业畜牧兽医应用领域,其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。通过截取猪肝脏抗菌肽LEAP‑2氨基末端的23个氨基酸,得到一条多肽;将带负电氨基酸Asp和Glu均替换为疏水性氨基酸Leu,使其净正电荷含量为6、疏水值为0.519,最后,将C端酰胺化,N端乙酰化,进一步提高净正电荷和稳定性,得到净正电荷含量为7、疏水性为0.519的第二条多肽,命名为抗菌肽TJH。本发明的抗菌肽TJH对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都具有高效的杀菌作用,而且具有较低的溶血活性和真核细胞毒性,使其具备成为抗生素替代物的发展潜力。