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[发明专利]缺失组合物基因簇在降低大肠杆菌对抗生素的耐药性中的应用-CN202110469213.9有效
发明人： 王建莉;王小元;马文渐;梁浩;秦晓龙 -专利权人：江南大学
申请日： 2021-04-28 - 公布日： 2023-10-03 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了缺失组合物基因簇在降低大肠杆菌对抗生素的耐药性中的应用，属于基因工程和生物医药领域。本发明敲除大肠杆菌W3110的核心糖基因簇gmhD‑waaQ，O‑抗原基因簇wbbL‑rmlB，胞外多糖基因簇galF‑wza，4型荚膜多糖合成基因簇yccC‑ymcD，三个鞭毛基因簇flhE‑motA、fliY‑fliR、flgN‑flgL，最终得到菌株WJW07，该菌株在LB培养基中对克林霉素和新生霉素的MIC分别为20mg/L和3mg/L，较野生对照菌W3110降低65倍和250倍，并且对一系列膜壁结构相关合成和转运基因簇的删除，使得重组菌株WJW07的生物量增加，有利于工业生产应用。
缺失组合基因降低大肠杆菌抗生素耐药性中的应用

[发明专利]一种副溶血弧菌CRISPRi的双质粒构建方法-CN202210235334.1有效
发明人：王小元;孟祥宇;王建莉;周晴;黄丹阳 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-03-11 - 公布日： 2023-10-03 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明公开了一种副溶血弧菌CRISPRi的双质粒构建方法，属于分子生物学和生物技术领域。本发明公开了CRISPRi工具质粒包括pSg132与pBAD33T‑d9质粒的构建方法。本发明提供了一种副溶血弧菌CRISPRi的2种质粒构建方法，经过重叠PCR与一步克隆方法构建CRISPRi工具质粒。同时也提供了双质粒在副溶血弧菌基因功能研究中的应用，可更快捷地研究基因尤其是关键基因的功能，或同时干扰多个基因对副溶血弧菌的影响。为副溶血弧菌基因功能研究提供了新的方法和技术，推动副溶血弧菌功能基因的研究发展。
一种溶血弧菌 crispri 质粒构建方法

[发明专利]一种改善大肠杆菌耐药性的方法及其应用-CN202110468047.0有效
发明人： 王建莉;王小元;马文渐;梁浩;朱怡炫 -专利权人：江南大学
申请日： 2021-04-28 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： C12N15/52 文献下载
摘要：本发明公开了一种改善大肠杆菌耐药性的方法及其应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除大肠杆菌基因组上三个鞭毛基因簇flhE‑motA，fliY‑fliR和flgN‑flgL得到鞭毛精简菌株WJW010，敲除菌毛基因簇fimB‑fimH得到菌毛精简菌株WJW011。鞭毛或菌毛合成基因簇的敲除可以降低对头孢西丁的耐药性，WJW010和WJW011对头孢西丁的MIC分别是8mg/L、8mg/L，较野生对照菌W3110降低1倍；并且，敲除鞭毛基因簇或菌毛基因簇能够提升合成乙酰辅酶A和ATP水平；实验表明，WJW010和WJW011合成乙酰辅酶A和ATP水平较野生对照W3110提高。
一种改善大肠杆菌耐药性方法及其应用

[发明专利]一种降低万古霉素耐药性的方法及其在辅因子生产的应用-CN202110469210.5有效
发明人： 王建莉;王小元;马文渐;陈闪闪 -专利权人：江南大学
申请日： 2021-04-28 - 公布日： 2023-09-08 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种降低万古霉素耐药性的方法及其在辅因子生产的应用，属于基因工程和医药工程领域。本发明敲除大肠杆菌W3110基因组上脂多糖的核心糖基因簇gmhD‑waaQ和O‑抗原基因簇wbbL‑rmlB，胞外多糖基因簇galF‑wza和4型荚膜多糖合成基因簇yccC‑ymcD，得到重组菌株WJW04；通过敲除大肠杆菌W3110的胞外多糖基因簇galF‑wza得到菌株WJW09；WJW09和WJW04对万古霉素的最小抑制浓度MIC分别为600mg/L和76.8mg/L，低于野生型菌株W3110对万古霉素的最小抑制浓度MIC为1000mg/L，因此，本发明的技术方案在医药行业有广泛的应用。
一种降低万古霉素耐药性方法及其因子生产应用

[发明专利]一种副溶血弧菌基因高效敲除质粒的构建方法-CN202210235371.2有效
发明人：王小元;孟祥宇;王建莉;檀昕;周晴;黄丹阳;季帆 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-03-11 - 公布日： 2023-08-25 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明公开了一种副溶血弧菌基因高效敲除质粒的构建方法，属于分子生物学和生物技术领域。本发明优化了敲除过程，引入Cre/loxP系统。在敲除同源臂之间加入了带有loxP位点的庆大霉素抗性片段，后该抗性片段通过Cre酶去除。第二次同源重组时加入庆大霉素，只有正确进行同源重组的菌株可以存活于10％蔗糖庆大抗性平板上，以此提高敲除菌株的筛选效率。再进行第二次结合转导，将带有cre基因的pOTC质粒导入副溶血弧菌。cre基因在细胞中表达Cre酶，识别loxP位点，并去除loxL与loxR之间的基因片段，即去除庆大抗性片段，在含有10％蔗糖的试管中去除pOTC质粒，本发明的方法提高正确菌株的筛选效率。
一种溶血弧菌基因高效质粒构建方法

[发明专利]生物基水性聚氨酯树脂及其制备方法和应用-CN202110805537.5有效
发明人： 王建莉;徐荣归;黄静静;刘文杰;邱贵森 -专利权人：广安摩珈生物科技有限公司
申请日： 2021-07-16 - 公布日： 2023-08-18 - 主分类号： C08G59/04 文献下载
摘要：本发明涉及生物基水性聚氨酯树脂及其制备方法和应用，其中生物基水性聚氨酯树脂，以重量份计，主要由以下原料制备而成：多元醇50‑70份、生物基二异氰酸酯25‑35份、生物基环氧树脂5‑10份、生物基亲水扩链剂2‑8份、生物基二元胺扩链剂2‑6份、小分子醇扩链剂2‑6份、中和剂2‑6份、催化剂0‑0.1份。其中，所述生物基环氧树脂具有式(I)所示结构：该生物基水性聚氨酯树脂中生物基比例较高，且树脂本身具有抗菌作用，能够避免抗菌剂物理混合所导致的弊端，且该生物基水性聚氨酯树脂具有优异强度和硬度，能够满足相应涂料或粘胶剂的需求。
生物水性聚氨酯树脂及其制备方法应用

[发明专利]一种四氢嘧啶产量提高的大肠杆菌的构建与应用-CN202310399252.5在审
发明人：王小元;李莹;张淑嫣;胡晓清;王建莉 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-04-13 - 公布日： 2023-06-30 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种四氢嘧啶产量提高的大肠杆菌的构建与应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除大肠杆菌基因组上基因aroG,poxB,pflB,adhE,mscS得到突变菌E.coli MWL009/pFT28‑ectABC‑EclysC*‑aspDH‑ppc3，该菌株在发酵培养基中分批发酵36h后，四氢嘧啶产量为18.28g/L，相比于E.coli MWZ003/pFT28‑ectABC‑EclysC*‑aspDH‑ppc3的四氢嘧啶产量提升了28％；在发酵培养基中补料分批发酵60h后，四氢嘧啶产量为34.27g/L，葡萄糖转化率达到0.34g/g。该研究提供了一种提高大肠杆菌中高产四氢嘧啶的新策略。
一种嘧啶产量提高大肠杆菌构建应用

[发明专利]一种L-谷氨酸产量提高的谷氨酸棒杆菌的构建与应用-CN202210851934.0在审
发明人：王小元;李贺丹;胡晓清;王建莉 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-07-19 - 公布日： 2023-06-30 - 主分类号： C12N15/54 文献下载
摘要：本发明公开了一种L‑谷氨酸产量提高的谷氨酸棒杆菌的构建与应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除谷氨酸棒杆菌基因组上海藻糖合成基因treS,treY和otsA基因，得到了L‑谷氨酸产量提升的重组菌株C.glutamicum△SYA，该菌株在发酵培养基中发酵60h的L‑谷氨酸产量为14.75g/L，是出发菌株C.glutamicum ATCC13869的12.5倍，有助于实现L‑谷氨酸的工业化生产。
一种谷氨酸产量提高杆菌构建应用

[发明专利]一种用于治疗炎症性肠病的药物-CN202211680195.X在审
发明人：蔡志坚;沈颖颖;王建莉;马泽宇 -专利权人：浙江大学
申请日： 2022-12-26 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： A61K39/395 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于治疗炎症性肠病的药物，所述药物为装载靶向药物和Trim21蛋白结构域的胞外囊泡，所述靶向药物为能够将所述胞外囊泡靶向CD4+T细胞的靶向药物，所述Trim21蛋白结构域为缺失泛素化功能的Trim21蛋白结构域。本申请通过把能够将胞外囊泡靶向CD4+T细胞的靶向药物和缺失泛素化功能的Trim21蛋白结构域装载到胞外囊泡中，由靶向药物将整个载药的胞外囊泡靶向运输到CD4+T细胞，再由缺失泛素化功能的Trim21蛋白结构域与细胞内宿主Trim21竞争性结合FBXW7，从而拮抗肠道菌群促进Th17细胞分化的作用，起到治疗炎症性肠病的目的。
一种用于治疗炎症性肠病药物

[实用新型]一种隔离饲养舍-CN202320610920.X有效
发明人：李焕阳;王建莉 -专利权人：李焕阳
申请日： 2023-03-22 - 公布日： 2023-06-16 - 主分类号： A01K1/00 文献下载
摘要：本申请涉及畜牧养殖技术领域，具体为一种隔离饲养舍，包括房体和储液箱，房体的内部设置有多个隔板，且房体的内部设置有消毒组件，消毒组件包括安装板，安装板固定连接在房体的内壁上，安装板的底端固定连接有滑框一，且在安装板的底端固定安装有水泵，滑框一的内部滑动连接有滑块一，且在滑框一的外壁上固定安装有电机，电机的输出端固定连接有螺杆，螺杆转动设置在滑框一的内部，且螺杆与滑块一螺装，滑块一的底端固定连接有安装块，安装块的底端固定安装有输水块，输水块的内部开设有输水槽，输水块的底端固定安装有多个与输水槽相连通的雾化喷头，该隔离饲养舍替代了人工消毒，能够大大提高消毒效率，便于实际推广使用。
一种隔离饲养

[发明专利]一种环卫设备维修评估方法、系统、设备及可读存储介质-CN202310214239.8有效
发明人：王驰;王伟;周晓;王建莉;关旭 -专利权人：中环洁集团股份有限公司
申请日： 2023-03-08 - 公布日： 2023-06-06 - 主分类号： G06F18/241 文献下载
摘要：本发明涉及一种环卫设备维修评估方法、系统、设备及可读存储介质，其方法包括获取历史设备数据和待预测数据，历史设备数据包括设备基础成本和设备维修成本；根据预设的分类规则，对历史设备数据进行分类；对于每一类的历史设备数据，根据预设的统计学分析规则，确定参数分析权重；根据预设的分数计算规则、参数分析权重和待预测数据，确定目标设备得分；根据预设的策略判断规则和目标设备得分，确定评估结果。本发明具有提高维修状况判断准确率的效果。
一种环卫设备维修评估方法系统设备可读存储介质

[发明专利]一株有效合成脂多糖的基因工程菌-CN202211537066.5在审
发明人： 王建莉;马文渐;王小元;陈姜铧;叶梓琪;奚能 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-12-01 - 公布日： 2023-05-30 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一株有效合成脂多糖的基因工程菌，具体涉及一种无抗性的脂多糖大肠杆菌生产菌，属于遗传工程和生物合成技术领域。本发明的基因工程菌，发生了npr、yhbJ和fabF的至少一个缺失突变失活。其中，本发明的发生三基因缺失突变的基因工程菌WOZF，其脂多糖合成量较野生型增加40.6％，生长状况良好，没有引入任何外源抗性基因序列，更有利于大规模工业化生产。
有效合成多糖基因工程

[发明专利]一种高产L-苏氨酸的大肠杆菌的构建及应用-CN202310286663.3在审
发明人：王小元;宫登科;乔君;胡晓清;王建莉 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-03-22 - 公布日： 2023-05-26 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种高产L‑苏氨酸的大肠杆菌的构建及应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明在大肠杆菌TWF001基因组中敲除菌毛合成基因簇Ycb，Yad，Yde，Yeh，Yqi，Yra，Yfc，Type1，Yhc和Sfm，得到突变菌TWK021，TWK021菌株在发酵培养基中L‑苏氨酸产量为15.75g/L，比TWF001产量提高了32.4％，并在分批补料发酵中获得了62.7g/L的L‑苏氨酸产量。本发明构建了一株稳定的高产L‑苏氨酸的大肠杆菌，发酵过程中全程不需要抗生素维持质粒存在，提供了一种提高大肠杆菌中L‑苏氨酸产量的新策略。
一种高产苏氨酸大肠杆菌构建应用

[发明专利]一种用于抗肿瘤的药物组合物-CN202211131589.X在审
发明人： 王建莉;蔡志坚;陈际名;杨洁;王文慧 -专利权人：浙江大学
申请日： 2022-09-15 - 公布日： 2023-04-25 - 主分类号： A61K39/395 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于抗肿瘤的药物组合物，包括培西达替尼和用于抑制PD‑L1活性的化合物。本发明研究发现培西达替尼与PD‑L1抗体联用对多种肿瘤细胞具有良好的抑制作用，能够用于制备抗肿瘤药物。培西达替尼作为一种抗肿瘤药物已经应用于临床，具有很好的应用前景，而且能够作为辅助药物，提高PD‑L1抗体药物的治疗效果。
一种用于肿瘤药物组合

[发明专利]载药的胞外囊泡在制备治疗病毒感染引起的炎症的药物中的应用-CN202211470703.1在审
发明人：蔡志坚;王建莉;孔祥辉;卢信良 -专利权人：浙江大学
申请日： 2022-11-22 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： A61K45/00 文献下载
摘要：本发明公开了载药的胞外囊泡在制备治疗病毒感染引起的炎症的药物中的应用，涉及生物医药技术领域。载药的胞外囊泡在制备治疗病毒感染引起的炎症的药物中的应用，所述药物的成分包含能够与Trim21基因表达的蛋白竞争性结合底物的蛋白片段。本发明体内外实验均证明，利用mEVs/TRIM21‑ΔRING可以实现肝脏、肺、肾组织中巨噬细胞的精准靶向，通过与TRIM21竞争性结合底物蛋白缓解病毒感染引发的炎症疾病、抑制病毒感染。
胞外囊泡制备治疗病毒感染引起炎症药物中的应用

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