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[发明专利]一种果糖基转移酶及其编码基因-CN202211067015.0在审
发明人： 安迎锋;刘霞;高嵩;阚国仕;陈红漫;高何瑞;梁瑶崑;杨帅;王睿;王艺婷;滕政蓉 -专利权人：沈阳农业大学
申请日： 2022-09-01 - 公布日： 2023-05-26 - 主分类号： C12N9/88 文献下载
摘要：本发明涉及酶工程领域，具体的说就是果糖基转移酶及其编码基因，该酶对高温、强酸、强碱和有机溶剂有很高耐受性，催化菊糖产生双果糖苷III。现有已经表征的果糖基转移酶数量较少，活性不高，而且在高温、强酸、强碱及有机溶剂存在等特殊环境下活性很低，甚至完全失活，从而影响到酶的应用范围。本发明提供一个可以在大肠杆菌中高效表达的果糖基转移酶基因，不仅活性高，而且对高温、强酸、强碱及有机溶剂有较高的耐受性，展现出良好的生产应用前景。
一种果糖转移酶及其编码基因

[发明专利]一种高产levan聚糖的耐碱性levan合成酶的编码基因-CN202211085989.1在审
发明人： 安迎锋;高嵩;阚国仕;陈红漫;高何瑞;梁瑶崑;杨帅;王睿;王艺婷;滕政蓉 -专利权人：沈阳农业大学
申请日： 2022-09-06 - 公布日： 2023-04-11 - 主分类号： C12N15/54 文献下载
摘要：本发明涉及酶工程领域，具体的说就是一种高产levan聚糖的耐碱性levan合成酶的编码基因。现有的levan合成酶存在活性不高的问题，并且在强碱等特殊条件下催化效率尤其不佳，从而影响到该酶的应用范围。本发明提供一个可以在大肠杆菌中高效表达的levan合成酶基因，不仅活性高﹑底物转化率高，而且对强碱性有较高的耐受性，展现出良好的生产应用前景。
一种高产 levan 聚糖碱性合成编码基因

[发明专利]一种高稳定性耐乙醇型甘露糖异构酶及其编码基因-CN202211066863.X在审
发明人： 安迎锋;陆冉;高嵩;阚国仕;陈红漫;邵一伦;高何瑞;梁瑶崑;杨帅;王睿;王艺婷;滕政蓉 -专利权人：沈阳农业大学
申请日： 2022-09-01 - 公布日： 2023-03-03 - 主分类号： C12N9/90 文献下载
摘要：本发明涉及酶工程领域，具体的说就是一种高稳定性耐乙醇型甘露糖异构酶及其编码基因。现有已经表征的甘露糖异构酶数量有限，活性不高，而且在高温、强碱性及有机溶剂乙醇存在等特殊条件下催化效率尤其不佳，从而影响到该酶的应用范围。本发明提供一个可以在大肠杆菌中高效表达的甘露糖异构酶基因，不仅活性高，而且对高温、强碱性及乙醇有较高的耐受性，展现出良好的生产应用前景。
一种稳定性乙醇甘露糖异构酶及其编码基因

[发明专利]一种热凝胶辅助介孔氧化硅交联酶聚集载体及其包埋的DFA合成酶-CN202211060915.2在审
发明人： 安迎锋;刘霞;高嵩;阚国仕;陈红漫;高何瑞;梁瑶崑;杨帅;王睿;王艺婷;滕政蓉 -专利权人：沈阳农业大学
申请日： 2022-09-01 - 公布日： 2022-10-25 - 主分类号： C12N11/04 文献下载
摘要：本发明涉及酶工程技术领域，具体的说就是一种热凝胶辅助介氧化硅交联酶聚集载体固定化方法。用该方法获得的DFA合成酶固定化酶在pH稳定性、热稳定性、机械稳定性、耐储存性等方面都优于游离酶，对有机溶剂的耐受力增强。热凝胶的使用，显著增加了介孔氧化硅交联酶聚集载体固定化酶的性能。本发明对于改善介孔氧化硅交联酶聚集载体的固定化策略提供了更高效的方法，也是对DFA合成酶固定化酶的新思路。
一种凝胶辅助氧化交联聚集载体及其包埋 dfa 合成

[发明专利]一种从广泛物种和土壤中提取基因组DNA的方法-CN202211083237.1在审
发明人： 安迎锋;陆冉;高嵩;阚国仕;陈红漫;高何瑞;梁瑶崑;杨帅;王睿;王艺婷;滕政蓉 -专利权人：沈阳农业大学
申请日： 2022-09-06 - 公布日： 2022-10-21 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及分子生物学技术领域，具体的说就是一种从广泛物种和土壤中提取基因组DNA的方法。现有的基因组DNA提取方法只适用于一个或几个物种，并且从土壤等特殊材料中提取DNA难以去除腐殖质﹑色素等污染物，影响基因组DNA质量。本发明设计的二氧化硅颗粒机械研磨和琼脂糖凝胶电泳相结合的DNA提取方法同时适用于从动物细胞﹑植物植物﹑微生物﹑土壤等广泛的材料中提取基因组DNA。该方法提取的基因组DNA质量高，没有降解现象发生，也没有腐殖质和色素等污染物。因此，本发明所涉及的方法将在分子生物学﹑遗传学等领域具有广泛的应用前景。
一种广泛物种土壤提取基因组 dna 方法

[发明专利]一种皮脂酸修饰的磁性纳米颗粒的制备及其固定化β-葡萄糖苷酶-CN202211077119.X在审
发明人： 安迎锋;陆冉;高嵩;阚国仕;陈红漫;高何瑞;梁瑶崑;杨帅;王睿;王艺婷;滕政蓉 -专利权人：沈阳农业大学
申请日： 2022-09-02 - 公布日： 2022-10-18 - 主分类号： C12N11/14 文献下载
摘要：本发明涉及酶工程技术领域，具体的说就是一种皮脂酸修饰的磁性纳米颗粒的制备及其固定化β‑葡萄糖苷酶。对氧化铁磁性纳米颗粒进行表面皮脂酸修饰，并吸附酶进行固定化。用该方法获得的β‑葡萄糖苷酶固定化酶在pH稳定性、热稳定性、机械稳定性、耐储存性等方面都优于游离酶，对有机溶剂的耐受力增强，并可以被重复用于稻壳粉和玉米芯粉等天然材料的分解。基于皮脂酸修饰氧化铁磁性纳米颗粒的固定化策略为固定化酶提供了更高效的方法。
一种皮脂修饰磁性纳米颗粒制备及其固定葡萄糖苷酶

[发明专利]一种基于ELP-Intein和ccdB的高效质粒载体及其使用方法-CN202110185156.1在审
发明人： 安迎锋;高何瑞;高嵩;王虹玲;张艺峰;许淑敏;邵一伦;杨尧;王潘;汤静怡;李少荣 -专利权人：沈阳农业大学
申请日： 2021-02-10 - 公布日： 2021-05-28 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程领域，具体的说是一种基于ELP‑Intein和ccdB的高效质粒载体及其使用方法。质粒载体为闭合环状的双链DNA，含有ccdB基因做作为负筛选标记，因此该载体能够灵活地进行无背景克隆。同时，该质粒载体含有T7启动子和终止子，并具有ELP‑Intein表达盒，可以高效地表达外源蛋白，还可用基于Intein自我切割的ELP标签和His‑tag标签双纯化法进行蛋白纯化。同时，将基于尿素的变性‑复性循环与基于ELP标签的纯化步骤相结合，可以有效的实现不溶性蛋白的纯化。本质粒载体的灵活克隆功能、高效表达功能、双纯化功能，特别是对于不溶性蛋白包涵体的纯化功能，将使得该载体及相应使用方法在基因工程领域具有广泛的应用前景。
一种基于 elp intein ccdb 高效质粒载体及其使用方法

[发明专利]一种严格厌氧菌来源的菌果聚糖合成酶-CN202011144665.1在审
发明人： 安迎锋;高嵩;王虹玲;张艺峰;许淑敏;高何瑞;邵一伦;杨尧;王潘;汤静怡;李少荣 -专利权人：沈阳农业大学
申请日： 2020-10-23 - 公布日： 2021-01-22 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明属于酶工程技术领域，具体的说就是一种严格厌氧菌来源的菌果聚糖合成酶。近年来，虽然有一些菌果聚糖合成酶基因被克隆和表征，但是这些酶主要来源于兼性厌氧菌或者好氧菌，而严格厌氧菌种来源的菌果聚糖合成酶仍未被研究和开发，并且在产物专一性、热稳定性和有机溶剂耐受性等方面仍有待提高。本实验首次筛选获得一种严格厌氧的梭菌属微生物，并从中克隆获得一个菌果聚糖合成酶CA‑SacB基因，将该基因在大肠杆菌中进行高效异源表达和酶学性质分析，结果表明该酶有428个氨基酸，具有耐热、耐有机溶剂、产物专一性高等特点，有望用于规模化生产高聚合度的菌果聚糖，因此具有重要的应用潜力。
一种严格厌氧菌来源聚糖合成

[发明专利]一种质粒载体及其构建方法-CN201710656310.2有效
发明人： 安迎锋;高和瑞;高嵩;张艺锋;许淑敏;刘霞 -专利权人：沈阳农业大学
申请日： 2017-08-03 - 公布日： 2020-10-13 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程领域，具体的说是一种兼具定向TA克隆，无背景粘性末端克隆和表达功能的质粒载体及其构建方法。质粒载体为闭合环状的双链DNA，含有两个多克隆位点区，在两个多克隆位点区之间存在一个ccdB表达框，可在多数大肠杆菌菌株中组成型表达毒性蛋白ccdB，作为负筛选标记。基于质粒载体的多克隆位点的设计，该质粒可用于进行定向TA克隆和改进的无背景粘性末端克隆。另外，本质粒载体还可以直接用于蛋白表达和纯化。各功能均得到验证。本发明所涉及的质粒载体因其更方便和高效，将在基因工程领域发挥重要的作用。
一种质粒载体及其构建方法

[发明专利]一种双功能离子螯合磁性载体及其应用-CN201711323951.2有效
发明人： 安迎锋;张艺峰;高嵩;高何瑞;许淑敏;刘霞;刘一菲;张铮;泽哈基 -专利权人：沈阳农业大学
申请日： 2017-12-13 - 公布日： 2020-09-18 - 主分类号： C12N11/14 文献下载
摘要：本发明属于酶纯化和固定化技术领域，具体的说就是一种基于可得然胶的蛋白纯化/固定化双功能离子螯合磁性载体及其应用。双功能载体为磁性可得然微球经活化、螯合，得到具有固定化、纯化功能的双功能离子螯合磁性载体；其中，磁性可得然微球为以Fe3O4纳米颗粒为内核，可得然胶反向包埋为外壳，合成得双功能离子螯合磁性载体。本发明载体具有磁响应性，使用时不用上柱，在外加磁场下就能轻易地将载体从反应体系中分离出来，快速方便的完成一步洗脱和重复利用。本发明制备的载体因其更方便、高效，将在酶固定化及酶的纯化等方面发挥重要的作用。采用本发明载体固定化的木聚糖酶的稳定性和催化效率显著提高，生产成本降低，有望应用于大规模工业生产。
一种功能离子磁性载体及其应用

[实用新型]一种双向搅拌式微生物发酵罐-CN201920163726.5有效
发明人：邵一伦;王虹玲;张艺峰;刘霞;程一珊;安迎锋 -专利权人：沈阳农业大学
申请日： 2019-01-30 - 公布日： 2019-11-15 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种双向搅拌式微生物发酵罐，包括罐体和罐盖，其中在罐盖内设有电机，在罐体内设有搅拌轴，在搅拌轴上设有转向盒，转向盒的上端通过上轴承与搅拌轴连接，在转向盒上方的搅拌轴上设有正转盘，在转向盒内的搅拌轴上分别设有上锥齿轮和下锥齿轮，在上锥齿轮与下锥齿轮之间通过传动锥齿轮连接，在穿孔所对的搅拌轴上设有下轴承，下轴承的顶部与下锥齿轮连接，在下轴承的底部设有反向转盘，在正转盘与反转盘上均设有搅拌叶，搅拌轴在转动时，位于正转盘与反转盘上的搅拌叶转动方向是相反的，这就使得不同层次的物料转动方向不一致，从而增大了各层物料自己的相对运动，进而提高了物料之间混合的效率。
搅拌轴转向盒正转盘下锥上锥齿轮反转盘搅拌叶下轴承齿轮罐盖罐体转动微生物发酵罐本实用新型传动锥齿轮齿轮连接双向搅拌物料转动不一致上轴承穿孔上端转盘轴承电机

[发明专利]一种能高效克隆和温度诱导表达的质粒载体及其构建方法-CN201810104595.3在审
发明人： 安迎锋;高何瑞;高嵩;王虹玲;许淑敏;张艺峰;刘霞;刘一菲;张铮;泽哈基;李秀通;廉兴隆 -专利权人：沈阳农业大学
申请日： 2018-02-02 - 公布日： 2018-08-03 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程领域，具体的说是一种能够灵活地进行无背景TA克隆、粘性末端克隆和平末端克隆，并且可以进行温度诱导型蛋白表达的质粒载体及其构建方法。质粒载体为闭合环状的双链DNA，含有能编码毒性蛋白ccdB的基因做作为负筛选标记。本质粒的灵活克隆功能和温度诱导表达功能均得到验证。由于更方便和高效，本发明所涉及的质粒将在基因工程领域发挥重要的作用。
质粒载体基因工程领域温度诱导构建克隆温度诱导型闭合环状编码毒性蛋白表达高效克隆末端克隆筛选标记粘性末端双链DNA 灵活质粒蛋白验证基因

[发明专利]一种用于多种克隆策略并具有表达功能的质粒载体及其构建方法-CN201710446471.9有效
发明人： 安迎锋;刘霞;高嵩;高和瑞;张艺锋;许淑敏 -专利权人：沈阳农业大学
申请日： 2017-06-14 - 公布日： 2017-10-17 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程领域，具体的说是一种具有广泛的应用的适用于多种克隆策略并具有表达功能的质粒载体及其构建方法。载体为闭合环状双链DNA，含有两个能够识别多种克隆策略的多克隆位点区，两个多克隆位点区之间为毒性蛋白标记ccdB 基因。本发明质粒载体在分子克隆、蛋白表达和纯化方面的功能得到了验证。本发明质粒载体既可以应用各种不同的克隆要求，而且可方便高效地进行蛋白表达和纯化，而不需要亚克隆步骤，因此本发明质粒载体因其更方便、高效，将在基因工程领域发挥重要的作用。
一种用于多种克隆策略具有表达功能质粒载体及其构建方法

[发明专利]一种改进的重叠延伸PCR方法及其所获得的突变基因-CN200510046414.9无效
发明人：吴文芳;安迎锋;吕安国 -专利权人：中国科学院沈阳应用生态研究所
申请日： 2005-05-13 - 公布日： 2006-11-15 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本发明涉及基因定点突变的方法，具体的说是一种改进的重叠延伸PCR方法及其所获得的突变基因，本方法分为如下步骤：片段合成；双混合；预延伸；全长DNA合成；后延伸。以来自于酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的腺苷蛋氨酸(SAM)合成酶基因sam1为起始基因验证了该方法的有效性，并获得了经稀有密码子改造的突变基因，该基因编码的SAM合成酶能在酿酒酵母中高效表达，并且能提高胞内SAM的积累量。本发明在原有重叠延伸PCR的基础上，进行了一系列重要的改进，使得在一个反应过程中实现多点定位突变。
一种改进重叠延伸 pcr 方法及其获得突变基因

[发明专利]一种综合的基因改组方法及所获得的重组基因和编码蛋白-CN200510046413.4无效
发明人：吴文芳;安迎锋;吕安国 -专利权人：中国科学院沈阳应用生态研究所
申请日： 2005-05-13 - 公布日： 2006-11-15 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本发明涉及基因的指导进化，是一种综合的基因改组方法，首先选取待突变/改组的线性双链基因，采用易错PCR方法扩增15个循环，所得到的产物用80％酒精沉淀，清洗去除反应体系中的可溶性组分；然后在上述沉淀物中加入DNA聚合酶、dNTP、缓冲液和超纯水，组成StEP反应体系，并扩增得到改组基因，通过琼脂糖凝胶电泳，并对目的大小的DNA片段进行特异性扩增，然后进行表达与筛选，获得具有目的特征的改组基因。本发明可以有效的实现在一个反应过程中同时实现基因的随机突变和改组，并用合成酶基因sam1为起始基因验证了本发明的有效性，获得了能促进胞内SAM积累量提高的重组酶。
一种综合基因改组方法获得重组编码蛋白

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