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[发明专利]一种重组人酸性成纤维细胞生长因子凝胶剂及其制备工艺-CN202310760678.9在审
发明人：朱国兴;付栋君;唐芳;关录凡;李郑武;赫佳鑫 -专利权人：上海腾瑞制药股份有限公司
申请日： 2023-06-27 - 公布日： 2023-10-17 - 主分类号： A61K9/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组人酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)凝胶剂，所述的凝胶剂包含凝胶基质、增稠剂和保护剂，且所述的凝胶剂基质选自羧甲基纤维素钠、羟丙甲纤维素、海藻酸钠、聚丙烯酸钠、透明质酸钠、聚乙二醇、明胶中的一种或多种，所述的凝胶剂增稠剂选自聚乙烯醇，所述保护剂选自组氨酸和低分子量肝素钠的组合。本发明选用凝胶基质和增稠剂聚乙烯醇的组合，在此基础之上选用组氨酸和低分子量肝素钠作为蛋白保护剂，以上辅料协同提高了重组人酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)凝胶剂的稳定性。研究发现组氨酸和肝素钠的组合可作为人血白蛋白可替代的蛋白保护剂，在较低的浓度条件下依然可以获得较高的保护效果，有效的降低了生产成本。
一种重组酸性纤维细胞生长因子凝胶及其制备工艺

[发明专利]一种重组巴曲酶的糖蛋白的定量分析方法-CN202310400017.5在审
发明人：唐芳;李郑武;李晴;张燕;关录凡;唐丽平;王凯;赫佳鑫;高欣 -专利权人：上海腾瑞制药股份有限公司
申请日： 2023-04-14 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： C12Q1/37 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组巴曲酶的糖蛋白定量分析方法，通过选择合适的溶解缓冲液，保证检测标准品以及检测样品的良好的线性关系，利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物，通过比色建立标准曲线来测定样品中糖蛋白的含量。重复性实验表明，采用所述溶液对于不同浓度的重组巴曲酶均具有较好的重复性。通过对样品中的巴曲酶进行定量分析，测定结果与市面上常用的测定糖蛋白的试剂盒结果近似，表明本发明的方法具有较高的准确性。
一种重组巴曲酶糖蛋白定量分析方法

[发明专利]一种药物凝胶剂中活性蛋白及多肽生物学活性的检测方法-CN202310431418.7在审
发明人：朱国兴;付栋君;唐芳;关录凡;李郑武;王凯 -专利权人：上海腾瑞制药股份有限公司
申请日： 2023-04-21 - 公布日： 2023-07-21 - 主分类号： G01N1/28 文献下载
摘要：本发明公开了一种卡波姆型凝胶剂中活性蛋白及多肽药物的生物学活性的检测方法，所述的方法包括使用包含胎牛血清和肝素钠的DMEM测试培养液稀释凝胶剂的步骤和使用钙离子使得所述活性蛋白从凝胶剂中释放并检测其生物学活性的步骤。胎牛血清和肝素钠可以对稀释后的凝胶剂中的活性蛋白进行保护，可以对加入钙离子后从卡波姆骨架中释放出来的活性蛋白进行短期保护，避免因稀释、蛋白释放至检测等待时间过长导致的蛋白失活，提高检测准确性。
一种药物凝胶活性蛋白多肽生物学检测方法

[发明专利]一种酸性成纤维细胞生长因子滴眼液制剂-CN202310431075.4在审
发明人：付栋君;朱国兴;唐芳;赫佳鑫;王凯;李郑武;关录凡 -专利权人：上海腾瑞制药股份有限公司
申请日： 2023-04-21 - 公布日： 2023-07-07 - 主分类号： A61K9/08 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组人酸性成纤维细胞生长因子制剂，尤其涉及一种酸性成纤维细胞生长因子滴眼剂，本发明的滴眼剂使用选自组氨酸、吐温80和肝素钠的组合作为蛋白保护剂，无需使用人血白蛋白作为蛋白保护剂，不仅降低了成本，而且有效的提高了产品的稳定性，在(25±2)℃、相对湿度(60±5)％的条件下9个月依然保持较高的生物活性。
一种酸性纤维细胞生长因子滴眼液制剂

[发明专利]一种巴曲酶的发酵培养基及发酵方法-CN202310399752.9在审
发明人：李晴;陈维;张燕;唐芳;关录凡;李郑武 -专利权人：上海腾瑞制药股份有限公司
申请日： 2023-04-14 - 公布日： 2023-06-27 - 主分类号： C12N9/64 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组巴曲酶的酵母发酵方法及使用的培养基，包括优化后基础发酵培养基，优化后甘油补料培养基以及优化后诱导培养基，发酵步骤主要包括一级种子培养、二级种子培养以及发酵培养，在发酵培养阶段，通过在培养基中补加多种营养成分，如甘油、casamino acids以及PTM1无机盐等，并调节合适的发酵培养基的pH值，通过甲醇诱导培养，极大的提高了发酵的重组蛋白的活性。本发明通过casamino acids的加入对发酵产物中蛋白酶的抑制作用，山梨醇与甲醇作为共用碳源提高目的蛋白表达的活性，经过后期的纯制备较高的巴曲酶重组蛋白，其活性基本能够达到与市售的天然巴曲酶类似的活性。
一种巴曲酶发酵培养基方法

[发明专利]一种巴曲酶的表达纯化方法及应用-CN202310399963.2在审
发明人：张燕;李晴;唐芳;郭森林;关录凡;李郑武 -专利权人：上海腾瑞制药股份有限公司
申请日： 2023-04-14 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12N9/64 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组巴曲酶的表达纯化方法，通过对培养基上清的pH值以及电导率的调整优化，使目的蛋白能很好地结合在层析填料上，而大部分杂蛋白无法和填料结合而流穿，提高收集液纯度，既能抑制发酵上清液中的水解酶活性，又能保证目的蛋白不流穿，保证高收率。进一步将阳离子层析、阴离子层析以及单向切向流过滤浓缩和凝胶过滤层析配套使用，纯化获得了高纯度有活性的巴曲酶蛋白。洗脱模式由简单的盐梯度改为盐梯度和pH梯度复合洗脱方式，极大提高了蛋白的纯度。本发明的纯化方法采用连续流纯化工艺，中间体无需调节pH值、电导、稀释、换液等操作，降低工艺时间，提高酶活性，减少储罐、人员、厂房面积等优点。体外以及体内的验证表明，采用本发明方法纯化的巴曲酶具有与市售的天然巴曲酶类似的凝血效果，具有广泛的应用前景。
一种巴曲酶表达纯化方法应用

[发明专利]一种重组蛋白的纯化方法-CN202211707611.0在审
发明人： 关录凡;王书生;颜丹燕 -专利权人：上海腾瑞制药股份有限公司
申请日： 2022-12-27 - 公布日： 2023-06-13 - 主分类号： C07K14/59 文献下载
摘要：本发明涉及一种重组蛋白的纯化方法，所述重组蛋白为重组人促卵泡激素，步骤包括：对收集获得的细胞培养液进行微滤处理，并依次进行亲和层析处理、疏水层析处理、分子筛层析处理、羟基磷灰石层析处理以及阴离子交换层析处理后，进行纳滤处理，即得纯化后的重组人促卵泡激素。本发明的纯化方法通过多种层析方式依次处理，各种层析处理之间相互补充，以去除细胞培养液中的宿主蛋白、外源性DNA以及内毒素等杂质，最终得到的重组人促卵泡激素纯度高于99.98％，在未引入任何有机溶剂的基础上，工艺简单而快速，易于大规模生产。
一种重组蛋白纯化方法

[发明专利]一种高密度长期培养动物细胞表达重组蛋白的方法-CN202211686063.8在审
发明人： 关录凡;王书生;颜丹燕 -专利权人：上海腾瑞制药股份有限公司
申请日： 2022-12-27 - 公布日： 2023-03-31 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种高密度长期培养动物细胞表达重组蛋白的方法，使用微载体培养动物细胞，并使之处于悬浮、不间断的流动状态，使用连续灌注的培养方式，避免了细胞代谢废物的积累，达到细胞高密度、长时间生长的目的，并且重组蛋白的产量也得到了较高的提升；并在细胞截留换液操作中每隔一段时间对中空纤维柱进行一次反向冲洗操作，然后继续进行悬浮细胞的截留浓缩，截留浓缩的过程结束后，补充新鲜培养基的同时对中空纤维柱再一次进行由膜外向膜内的反向冲洗操作，使中空纤维柱内部的培养液体始终处于流动状态，有效防止细胞碎片对膜的堵塞。
一种高密度长期培养动物细胞表达重组蛋白方法

[发明专利]一种高效表达人促卵泡激素的CHO细胞的培养方法-CN201511030146.1有效
发明人：李国军;杨新春;张道旭;张雪亭;吕中华;王莹;孟庆勇;张磊;高红梅;姜媛媛;刘珊珊;张译文;刘宇庭;葛京城;黄炎;丁辉;刘佳吉;张新岩;袁淑杰;李郑武;王锐;关录凡;高晶;赵华南;袁媛 -专利权人：哈药集团技术中心
申请日： 2015-12-31 - 公布日： 2019-09-27 - 主分类号： C12N5/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种高效表达人促卵泡激素的CHO细胞的培养方法，属于生物制药技术领域。本发明所提供的培养方法是将种子细胞配制成细胞悬液，在利用无血清基础培养基重悬后进行传代培养，获得种子悬液，再将所得的种子悬液接种到生物反应器中进行培养，培养过程中定期流加无血清补充培养基，并监测细胞生长情况并补充葡萄糖溶液，培养结束后收获细胞。本发明所提供的方法全程采用无血清悬浮培养，摇瓶复苏、扩增后转入发酵罐培养，工艺流程简单，并且细胞培养密度大，可达到4×10⁷个/mL，细胞活率达到98％以上，在高密度和高活率下维持时间长，终产物收率可达到40mg/L，适合工业化生产。
一种高效表达卵泡激素 cho 细胞培养方法

[发明专利]一种甲磺酸达比加群酯微丸及制备方法-CN201611223287.X有效
发明人：袁淑杰;李郑武;孙照英;张珊珊;户巧芬;曹翊婕;高晶;李金花;丁辉;王立东;赵华南;王晓颖;关录凡;韩志福;刘勇 -专利权人：哈药集团技术中心
申请日： 2016-12-27 - 公布日： 2019-06-07 - 主分类号： A61K9/48 文献下载
摘要：本发明公开了一种甲磺酸达比加群酯微丸及制备方法，属于医药技术领域。该微丸的结构包括丸芯、包裹在丸芯外层的隔离层，包裹在隔离层外层的含药层；其中丸芯含有甘氨酸和羟丙甲纤维素；隔离层含有羟丙甲纤维素酞酸酯和滑石粉；含药层含有甲磺酸达比加群酯、甲基丙烯酸甲酯和滑石粉。本发明制备的微丸隔离层表面圆整，没有所谓的卫星颗粒，不影响隔离层的完整性，从而使得活性成分和甘氨酸在空间上的有效隔离，保证制剂在储存过程中的活性成分的稳定性。本发明制备的甲磺酸达比加群酯微丸具有预防和治疗脑缺血和全身性栓塞疾病的作用。
一种甲磺酸达加群酯微丸制备方法

[发明专利]一种盐酸美金刚缓释微丸及其制备方法-CN201611223235.2在审
发明人：袁淑杰;李郑武;韩志福;刘铁成;徐岩;王淼;曹翊婕;户巧芬;高晶;曲学伟;赵乐;李宇;关录凡 -专利权人：哈药集团技术中心
申请日： 2016-12-27 - 公布日： 2017-03-08 - 主分类号： A61K9/52 文献下载
摘要：本发明公开了一种盐酸美金刚缓释微丸及其制备方法，微丸从内到外包括丸芯、含药层、缓释层和包衣层四层结构；制备方法包括(1)将聚维酮K30、聚维酮K25或羟丙基纤维素溶于乙醇水溶液中，加入盐酸美金刚，将得到的溶液喷雾到丸芯表面，干燥后得到含药微丸；(2)将乙基纤维素水分散体喷雾到含药微丸表面，干燥后得到缓释微丸；(3)将羟丙甲基纤维素E5、羟丙甲基纤维素E50、羟丙甲基纤维素K100、聚乙二醇6000、聚乙二醇400、聚乙二醇8000、滑石粉、微粉硅胶、二氧化硅中的一种或二种以上溶于纯化水中，搅拌至颜色均一，将得到的溶液喷雾到缓释微丸表面，干燥。制得的缓释微丸稳定性好、释放度佳。
一种盐酸金刚缓释微丸及其制备方法

[发明专利]一种缓解体力疲劳的保健食品-CN201511030107.1在审
发明人：袁淑杰;张道旭;李郑武;李超;包丽昕;高晶;赵华南;关录凡;王锐;汪霖 -专利权人：哈药集团技术中心
申请日： 2015-12-31 - 公布日： 2016-06-08 - 主分类号： A23L33/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种缓解体力疲劳的保健食品，属于保健食品技术领域。该保健食品原料由以下组分组成：玛咖粉，西洋参粉，马鹿茸粉，其余为辅料。本发明缓解体力疲劳的保健品，无需提取工艺，利于工业化生产；本发明将玛咖与西洋参、马鹿茸科学配伍，具有明显提高抗疲劳的效果，无明显副作用。
一种缓解体力疲劳保健食品

[发明专利]一种达比加群酯甲磺酸盐的制备方法-CN201511030125.X在审
发明人：袁淑杰;杨新春;李郑武;齐岩;刘磊;张珊珊;刘佳吉;赵乐;曹翊婕;户巧芬;丁辉;于海涛;魏涛;曲学伟;高晶;赵华南;关录凡 -专利权人：哈药集团技术中心
申请日： 2015-12-31 - 公布日： 2016-05-11 - 主分类号： C07D401/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种达比加群酯甲磺酸盐的制备方法，属于医药技术领域。本发明方法包括以3-[(3-氨基-4-甲基氨基苯甲酰)吡啶-2-基氨基]丙酸乙酯与N-(4-氰基苯基)氨基乙酸为原料合成中间体S3；中间体S3经环合反应生成中间体S4；中间体S4先在氯化氢乙醇溶液的作用下酸解，然后在氨水的作用下氨化生成中间体S5；中间体S5与氯甲酸正己酯在碱性条件下反应生成中间体S6；中间体S6溶解后，与甲磺酸反应得到达比加群酯甲磺酸盐。该制备方法简单可控，条件温和，收率高，产物纯度高、性质稳定，适合工业化生产。
一种加群酯甲磺酸盐制备方法

[发明专利]一种辅助降血脂的保健食品-CN201511030083.X在审
发明人：袁淑杰;李超;张道旭;李金花;刘宇庭;李郑武;高晶;赵华南;关录凡;刘姗姗 -专利权人：哈药集团技术中心
申请日： 2015-12-31 - 公布日： 2016-05-04 - 主分类号： A23L33/105 文献下载
摘要：本发明公开了一种辅助降血糖的保健食品，属于保健食品技术领域。本发明所提供的保健食品包含质量分数为10-40％的植物甾醇，10-30％的红曲粉。本发明所提供的保健食品不仅用传统降血脂食品红曲粉结合新资源食品，安全可靠，功效明确，配方合理简洁、制备简单。不含中药材或者中药提取成分，避免了中药材存在的重金属超标、农药残留超标、产地质量不保证、炮制不规范、成分不明确、劣质药材以次充好，造假或冒充混充等现象。从根本上解决血脂高之根源。本发明所提供的保健食品具有辅助降血脂的功效。
一种辅助血脂保健食品

[发明专利]一种吉非替尼的制备方法-CN201511030095.2在审
发明人：袁淑杰;杨新春;王立东;刘佳吉;丁辉;齐岩;于海涛;魏涛;赵乐;刘勇;曹翊婕;户巧芬;李郑武;高晶;张译文;赵华南;关录凡 -专利权人：哈药集团技术中心
申请日： 2015-12-31 - 公布日： 2016-04-20 - 主分类号： C07D239/94 文献下载
摘要：本发明公开了一种吉非替尼的制备方法，属于化学制药技术领域。本发明所提供的方法的步骤如下：先将化合物I经过酯水解成化合物II，再将化合物II与N-(3-氯丙基)吗啉缩合反应得到化合物III。本发明避免高压加氢、氰化反应、硝基还原，反应条件温和可控，反应步骤较短，收率较高，成本较低，适合工业化生产。
一种吉非替尼制备方法

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