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[发明专利]瞬时表达方式制备重组牛FSH的方法-CN202310750787.2在审
发明人：郑小娥;刘庆喜;郭春明;赵明礼 -专利权人：天津力牧生物科技有限公司
申请日： 2023-06-25 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C07K14/59 文献下载
摘要：本发明涉及瞬时表达方式制备重组牛FSH的方法。具体地说，本发明提供了牛FSH的核苷酸序列，其包含一个基因，该基因可以编码与含有α亚单位和β亚单位的天然牛FSH相同的蛋白序列，经过串联表达和融合表达设计及密码子优化，可显著提高其表达水平。本发明所述重组表达载体为pcDNA3.4，为瞬时表达使用载体。瞬时表达所用细胞株为CHOK1‑Hi，其最高密度可达到2*107个/ml。采用电转化的方式将带有目标基因的表达载体转入目标细胞株中，无血清培养重组高蛋白表达。纯化后的蛋白可用于同期发情、超数排卵、牛胚胎移植等领域。
瞬时表达方式制备重组 fsh 方法

[发明专利]绒促性素特征多肽组及其应用-CN202310723687.0在审
发明人：石峰;咸瑞卿;巩丽萍;王聪聪;张迅杰;陈晓;杭宝建 -专利权人：山东省食品药品检验研究院
申请日： 2023-06-19 - 公布日： 2023-09-01 - 主分类号： C07K14/59 文献下载
摘要：本发明涉及化学分析定性检测技术领域，尤其涉及一种绒促性素特征多肽组及其应用。所述特征多肽组由特征多肽1和特征多肽2组成，具体的氨基酸序列为：特征多肽1氨基酸序列为VLQGVLPALPQVVCNYR，特征多肽2氨基酸序列DHPLTCDDPR。该特征多肽组可用于检测待测样品中绒促性素特征多肽种属来源，检测准确度高，填补了绒促性素质量标准的空白，可以显著提高绒促性素的质量控制水平，确保绒促性素产品临床用药的有效性和安全性。
绒促性素特征多肽及其应用

[发明专利]人绒毛膜促性腺激素的纯化方法-CN202310725263.8在审
发明人：任爱君;杨静;霍栋栋 -专利权人：苏州赛分科技股份有限公司
申请日： 2023-06-19 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C07K14/59 文献下载
摘要：本发明公开了一种人绒毛膜促性腺激素的纯化方法，该方法只经过一步层析，包括如下步骤：(1)溶解人绒毛膜促性腺激素粗品；(2)将上述样品加载到层析柱上，所述层析柱中的填料为阳离子复合疏水填料；(3)用溶液进行洗脱。本发明所述纯化方法相较于现有技术大大缩短了工艺流程并降低了生产成本，并且获得的纯化样品的生物效价更高，可达8000iu/mg以上，在实际生产过程中具有良好的应用前景。
绒毛促性腺激素纯化方法

[发明专利]一种hCGβ亚基突变体及其在PDRN提取中的应用-CN202310521439.8有效
发明人：董书萍;王绪敏;王鑫磊 -专利权人：瑞吉明（山东）生物科技有限公司
申请日： 2023-05-10 - 公布日： 2023-07-28 - 主分类号： C07K14/59 文献下载
摘要：本发明提供一种hCGβ亚基突变体及其在PDRN提取中的应用，属于生物技术领域。采用本发明所述的hCGβ亚基突变体处理鱼类精巢，可获得纯度、产量更高的多聚脱氧核糖核苷酸（PDRN），为PDRN的大规模制备或工业化生产提供了一种新的思路或方法，具有广泛的应用前景。
一种 hcg 突变体及其 pdrn 提取中的应用

[发明专利]一种具有促进大菱鲆卵巢发育功能的重组蛋白-CN202210352546.8有效
发明人：贾玉东;李明月;张家荣 -专利权人：中国水产科学研究院黄海水产研究所
申请日： 2022-04-05 - 公布日： 2023-07-14 - 主分类号： C07K14/59 文献下载
摘要：本发明提供一种具有促进大菱鲆卵巢发育的重组蛋白，所提供的重组蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2；改造后的重组蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:8。本发明所提供的重组蛋白可用于促进大菱鲆性腺发育。本发明采用重叠PCR技术将大菱鲆重组促性腺激素α亚基与β亚基进行拼接，采用毕赤酵母表达体系进行重组促性腺激素的表达，真核表达体系能进行复杂的翻译后修饰，有益于重组蛋白的活性。本发明成功表达的大菱鲆重组促性腺激素融合蛋白经过卵母细胞体外培养，可明显促进大菱鲆卵母细胞的成熟。
一种具有促进大菱鲆卵巢发育功能重组蛋白

[发明专利]一种人绒毛膜促性腺激素的多步纯化工艺-CN202310089531.1在审
发明人：顾京;唐维;熊心磊;王德军;李争;徐来红;丁旭东;李成元 -专利权人：江苏尤里卡生物科技有限公司
申请日： 2023-02-09 - 公布日： 2023-06-27 - 主分类号： C07K14/59 文献下载
摘要：本发明公开了了一种人绒毛膜促性腺激素的多步纯化工艺，发明人不仅对纯化的工艺步骤进行了优化，还对纯化所需的层析柱进行重新设计。具体地，发明人利用交联微球‑凝胶层析柱与亲和层析柱依次对人绒毛膜促性腺激素原液进行分离纯化，同时将交联‑凝胶层析柱的填料设计为由60～70％的磺酸交联微球和30～40％的氯化硅胶构成，将亲和层析柱的配体设计为由突变后的HCG受体构成。纯化得到的人绒毛膜促性腺激素纯品的效价在9000U/mg左右，甚至能达到10000U/mg。本发明方法实现了从重组CHO细胞中分离制备医药级人绒毛膜促性腺激素的工业目标。
一种绒毛促性腺激素纯化工艺

[发明专利]一种人绒毛膜促性腺激素的纯化方法-CN202310050934.5在审
发明人：顾京;唐维;熊心磊;王德军;李争;徐来红;李成元 -专利权人：江苏尤里卡生物科技有限公司
申请日： 2023-02-02 - 公布日： 2023-06-27 - 主分类号： C07K14/59 文献下载
摘要：本发明公开了一种人绒毛膜促性腺激素的纯化方法,本发明将凝胶层析和亲和层析结合，从破碎的CHO重组细胞中分离纯化出HCG纯品的方法。本发明对凝胶层析柱的滤材的制备方法进行了改进，具体为对制备羧甲基化琼脂微球的步骤进行了重新组合和调整，每一步骤都易于控制，解决了通常制备交联羧甲基化琼脂凝胶微球时，羧甲基化反应对微球机械强度和孔径影响不易控制的缺点。最后制得的羧甲基化琼脂微球保持了对人绒毛膜促性腺激素较优的特异性吸附性能，同时保持了较优的机械强度。亲和层析柱对人绒毛膜促性腺激素具有高度特异性吸附作用，该步骤可除去残留的宿主细胞或培养基的蛋白质污染物、DNA以及内毒素。
一种绒毛促性腺激素纯化方法

[发明专利]一种重组蛋白的纯化方法-CN202211707611.0在审
发明人：关录凡;王书生;颜丹燕 -专利权人：上海腾瑞制药股份有限公司
申请日： 2022-12-27 - 公布日： 2023-06-13 - 主分类号： C07K14/59 文献下载
摘要：本发明涉及一种重组蛋白的纯化方法，所述重组蛋白为重组人促卵泡激素，步骤包括：对收集获得的细胞培养液进行微滤处理，并依次进行亲和层析处理、疏水层析处理、分子筛层析处理、羟基磷灰石层析处理以及阴离子交换层析处理后，进行纳滤处理，即得纯化后的重组人促卵泡激素。本发明的纯化方法通过多种层析方式依次处理，各种层析处理之间相互补充，以去除细胞培养液中的宿主蛋白、外源性DNA以及内毒素等杂质，最终得到的重组人促卵泡激素纯度高于99.98％，在未引入任何有机溶剂的基础上，工艺简单而快速，易于大规模生产。
一种重组蛋白纯化方法

[发明专利]一种血促性素提取纯化方法-CN202310311780.0在审
发明人：高伟;郑扶桑;赵文蒙;杜丽娟;宋祺;王萍;张富源;余彬 -专利权人：河南美森药业有限公司
申请日： 2023-03-28 - 公布日： 2023-06-06 - 主分类号： C07K14/59 文献下载
摘要：本发明涉及生物制品和兽药技术领域，公开了一种血促性素提取纯化方法，步骤为：1）采用偏磷酸调节孕马血清的pH为4.5～5.0，进行固液分离，收集上清液；2）采用第一沉淀剂对上清液进行沉淀处理，收集滤液；3）采用第二沉淀剂对滤液进行沉淀处理，收集沉淀物，沉淀物经干燥处理，得到血促性素粗品；4）将血促性素粗品溶解依次进行第一超滤、亲和层析、第二超滤、阳离子交换层析处理，得到血促性素粗品过滤液；采用第三沉淀剂对血促性素粗品过滤液进行沉淀处理，收集沉淀物，沉淀物经干燥得到血促性素纯品。本发明提取纯化方法制备的血促性素纯度能够达到99.9%以上，总收率能够达到88.9%，效价能够达到11000 IU/mg。
一种血促性素提取纯化方法

[发明专利]一种促卵泡激素的纯化方法-CN202211502215.4在审
发明人：唐德芳;彭红卫;李扬;严代才;朱遥;陈斌 -专利权人：景泽生物医药（合肥）股份有限公司;上海景泽生物技术有限公司;成都景泽生物制药有限公司
申请日： 2022-11-28 - 公布日： 2023-05-23 - 主分类号： C07K14/59 文献下载
摘要：本发明公开了一种促卵泡激素的纯化方法，它包括如下步骤：取含促卵泡激素的培养液进行亲和层析，亲和层析液低pH孵育后再进行复合阴离子交换层析，收集复合阴离子交换层析液，即得。本发明将去除细胞和细胞碎片等固体杂质的含有FSH或FSH‑CTP细胞培养液上清进行亲和层析，低pH病毒灭活，以及复合模式层析，收集得到的促卵泡激素收率高，SEC纯度单体峰含量高，解离亚基少。
一种卵泡激素纯化方法

[发明专利]一种孕马血清促性腺激素纯化生产方法-CN202211417222.4在审
发明人：季冲;王淑霞;刘根顺;刘军;戴美和;张欢;敬玥;沈光夫 -专利权人：赤峰博恩药业有限公司
申请日： 2022-11-14 - 公布日： 2023-05-09 - 主分类号： C07K14/59 文献下载
摘要：本发明公开了一种孕马血清促性腺激素纯化生产方法，本发明生产方法依次包括偏磷酸沉淀、低浓度乙醇沉淀、高浓度乙醇沉淀、缓冲液溶解沉淀、一次透析除盐、琼脂糖凝凝胶阴柱层析、琼脂糖凝凝胶阳柱层析和二次透析除盐共8个步骤。本发明在原有的工艺基础上加入了层析及超滤，大大增加了活性，以最小的工艺变更，快速、低成本地解决了产品活性问题，本发明可以加在任何现有的PMSG工艺流程上。本发明方法大大提高了产品活性，根据本发明中的实验数据，本发明纯化生产方法使得最终产品活性有显著提高，大大提高了产品质量。本发明纯化生产方法采用琼脂糖凝胶层析法分离纯化得到活性达到两千以上的产品，解决了现有技术中存在的产品质量问题。
一种血清促性腺激素纯化生产方法

[发明专利]碱性磷酸酶标记的甲状腺素的制备方法-CN202110490666.X有效
发明人：李宗祥;罗继全;徐明;贾亮 -专利权人：三诺生物传感股份有限公司
申请日： 2021-05-06 - 公布日： 2023-05-09 - 主分类号： C07K14/59 文献下载
摘要：本发明涉及生化检测技术领域，尤其涉及碱性磷酸酶标记的甲状腺素的制备方法。本发明提供的制备方法将碱性磷酸酶活化后直接与甲状腺素进行连接，不需要对T4进行活化，且不需要偶联BSA等大分子。制得的ALP‑T4复合物具有良好的活性且不含有副产物。并且该制备方法工艺简单，成本低廉。经验证，以该方法制备的ALP‑T4检测游离甲状腺素或总甲状腺素能够具有良好的灵敏度、准确性、精密度和特异性。
碱性磷酸酶标记甲状腺素制备方法

[发明专利]一种人绒毛膜促性腺激素高效纯化方法-CN202310023127.4在审
发明人：蒋路;徐登基;邵国梁;谢斌 -专利权人：杭州浦泰生物科技有限公司
申请日： 2023-01-03 - 公布日： 2023-05-05 - 主分类号： C07K14/59 文献下载
摘要：本发明公开了一种人绒毛膜促性腺激素高效纯化方法，该方法采用染料亲和层析与反相高效液相色谱层析相结合，通过两步层析就可获得高纯度绒促性素，产品效价大于11500IU/mg，较现有产品提高15％以上，远高于国家药典标准。本方法操作简便，生产周期较现有工艺缩短三分之一以上，生产成本较低，适合工业化推广。
一种绒毛促性腺激素高效纯化方法

[发明专利]一种卵泡刺激素β亚基活性肽及其应用-CN202210601524.0在审
发明人：韩兴发;曾宪垠;孟风艳 -专利权人：四川农业大学
申请日： 2022-05-30 - 公布日： 2023-04-25 - 主分类号： C07K14/59 文献下载
摘要：本发明公开了一种卵泡刺激素β亚基活性肽及其应用。该活性肽具有以下序列：Xm‑Yn‑Zc；X包括T、R、D和L中的至少3种氨基酸；Y为肽段LVYKDPARP；Z包括K、I、T、Q和N中的至少1种氨基酸，以及位于活性肽3’端的K；其中，0≤m≤4，n＝0或1，0≤c≤4，且m和n不同时为0。本发明提供的活性肽可作为一种安全有效、质量稳定、价格低廉、纯度高且生产简便的新FSH制剂。使用人工合成的FSHβ活性肽，可避免通过经绝经妇女的尿液中提取或基因重组技术生产FSH的弊端。
一种卵泡刺激素活性及其应用

[发明专利]一种在CHO细胞中表达的重组蛋白rhCG纯化工艺-CN202110870701.0有效
发明人：夏星辉;胡晶锦;高乃波 -专利权人：宁波人健药业集团股份有限公司
申请日： 2021-07-30 - 公布日： 2023-02-03 - 主分类号： C07K14/59 文献下载
摘要：本申请涉及重组蛋白领域，尤其涉及一种在CHO细胞中表达的重组蛋白rhCG纯化工艺，包括在亲和洗脱液中加入二硫苏糖醇和β‑巯基乙醇，在漂洗液中加入EDTA金属螯合剂，防止蛋白氧化和防止重金属对目标蛋白的破坏，得到纯度高的产物。
一种 cho 细胞表达重组蛋白 rhcg 纯化工艺

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