本发明公开了一种与烟草PVY抗性紧密连锁的分子标记，其与野生型位点检测相关的标记命名为ASM‑W，片段大小466bp，如SEQ ID No.1所示；对应的突变位点检测相关的标记命名为ASM‑m，片段大小466bp，SEQ ID No.2所示。本发明还公开一种用于上述与烟草PVY抗性紧密连锁的分子标记的引物，引物序列如SEQ ID NO.3、4、5所示。本发明还公开了上述分子标记和引物在鉴别烟草eIF4E1基因位点的基因型中的应用。本发明的标记和引物可以作为分子标记应用于烟草种质资源鉴定和育种辅助选育，选择含有半坤村晒烟突变类型的种质材料或转育后代。
本发明属于植物基因工程技术领域，尤其涉及一种烟草腺毛特异性启动子pNtCER3a及其应用。所述pNtCER3a具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或与其相似性高于90％以上的核苷酸序列。本发明提供的烟草腺毛特异性启动子pNtCER3a只在烟叶腺毛中驱动目的基因的表达，由此可以定向调控目的基因的表达场所，减少目的基因无差别组织表达对烟草其它组织正常生长的影响，同时增加目的基因在腺毛中表达的效果，提高例如烟草腺毛次生代谢物的合成、积累和提取效率，为将腺毛作为生物反应器以生产人类需要的次生代谢物质和高香气烟草品种的选育、提高烟草叶面分泌物的产量等品质改良方面提供了新的调控手段和解决途径。
本申请涉及烟草NtREV基因技术领域，具体涉及烟草NtREV基因的编辑方法、gRNA、质粒、试剂盒及其应用。该gRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1或2所示。该质粒携带该gRNA对应的脱氧核苷酸序列以及Cas9的编码基因。该试剂盒包括该gRNA或包括该质粒。利用这些gRNA、质粒或试剂盒能够获得了烟草双拷贝NtREV基因的纯合突变植株，该烟草植株的植株顶端分生组织缺失，从而植株呈现出顶芽缺失的表型。
